目的建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）檢測(cè)植物來(lái)源保健食品中去甲烏藥堿的分析方法。方法樣品經(jīng)甲醇溶液超聲提取,采用0.1%甲酸（A）和甲醇（B）作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,采用LC-MS/MS進(jìn)行測(cè)量,采用正離子源模式（positive electrospray ionization,ESI+）和多離子監(jiān)測(cè)模式（multiple reaction monitoring,MRM）。結(jié)果去甲烏藥堿在上述色譜條件下能完全分離。去甲烏藥堿線(xiàn)性范圍為5.34～106.8ng/mL,相關(guān)系數(shù)r²=0.9999,方法檢出限為2μg/kg,定量限為6μg/kg;平均回收率98.7%～101.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation, RSD）<2.0%。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便,精密度和回收率高,重復(fù)性好,可以用于測(cè)定植物來(lái)源保健食品中去甲烏藥堿。 

【文章來(lái)源】：食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2020,11(23)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

去甲烏藥堿子離子掃描圖

第23期蘇昭侖,等:液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定植物來(lái)源保健食品中去甲烏藥堿8635效果更好。進(jìn)一步考察流動(dòng)相中添加甲酸、乙酸對(duì)分離效果和質(zhì)譜響應(yīng)的影響。結(jié)果表明,目標(biāo)物在0.1%甲酸水-甲醇組成的流動(dòng)相梯度洗脫,分離效率高、峰形對(duì)稱(chēng)、保留時(shí)間穩(wěn)定且質(zhì)譜響應(yīng)高。去甲烏藥堿在MRM模式下的色譜圖如圖2~4所示。圖2去甲烏藥堿對(duì)照品色譜圖Fig.2Thechromatogramofhigenaminestandard圖3樣品色譜圖Fig.3Thechromatogramofsample圖4以乙腈-水為流動(dòng)相的色譜圖Fig.4Thechromatogramwithacetonitrile-waterasmobilephase3.2前處理?xiàng)l件優(yōu)化本研究采用水、25%甲醇、50%甲醇、75%甲醇、甲醇為提取溶劑,提取時(shí)間為20min,結(jié)果表明,水提取得率最低,25%甲醇提取得率明顯升高,但當(dāng)采用50%甲醇時(shí)其得率與75%甲醇并無(wú)明顯差別,因此,采用50%甲醇作為提取溶劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同比例甲醇提取溶劑的提取效率比較(n=6)Table1Comparisonofextractionefficiencyofdifferentmethanolextractionsolvents(n=6)提取溶劑平均含量/(mg/kg)RSD/%水2.724.525%甲醇5.162.950%甲醇8.643.175%甲醇8.593.5甲醇7.742.63.3方法的線(xiàn)性關(guān)系在實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明,去甲烏藥堿在5.34~106.8ng/mL范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系,r2=0.9999,線(xiàn)性方程:Y=41400X+72700。3.4方法的檢出限和定量限去甲烏藥堿標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋,取信噪比為3:1時(shí),為最低檢出限,去甲烏藥堿的濃度為0.04ng/mL,當(dāng)樣品取樣量1g,定容50mL時(shí),方法的去甲烏藥堿檢出限為2μg/kg;取信噪比為10:1時(shí),為最低定量限,去甲烏藥堿的濃度為0.12ng/mL,當(dāng)樣品取樣量1g,定容50mL時(shí),方法的去甲烏藥堿定量限為6μg/kg

第23期蘇昭侖,等:液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定植物來(lái)源保健食品中去甲烏藥堿8635效果更好。進(jìn)一步考察流動(dòng)相中添加甲酸、乙酸對(duì)分離效果和質(zhì)譜響應(yīng)的影響。結(jié)果表明,目標(biāo)物在0.1%甲酸水-甲醇組成的流動(dòng)相梯度洗脫,分離效率高、峰形對(duì)稱(chēng)、保留時(shí)間穩(wěn)定且質(zhì)譜響應(yīng)高。去甲烏藥堿在MRM模式下的色譜圖如圖2~4所示。圖2去甲烏藥堿對(duì)照品色譜圖Fig.2Thechromatogramofhigenaminestandard圖3樣品色譜圖Fig.3Thechromatogramofsample圖4以乙腈-水為流動(dòng)相的色譜圖Fig.4Thechromatogramwithacetonitrile-waterasmobilephase3.2前處理?xiàng)l件優(yōu)化本研究采用水、25%甲醇、50%甲醇、75%甲醇、甲醇為提取溶劑,提取時(shí)間為20min,結(jié)果表明,水提取得率最低,25%甲醇提取得率明顯升高,但當(dāng)采用50%甲醇時(shí)其得率與75%甲醇并無(wú)明顯差別,因此,采用50%甲醇作為提取溶劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同比例甲醇提取溶劑的提取效率比較(n=6)Table1Comparisonofextractionefficiencyofdifferentmethanolextractionsolvents(n=6)提取溶劑平均含量/(mg/kg)RSD/%水2.724.525%甲醇5.162.950%甲醇8.643.175%甲醇8.593.5甲醇7.742.63.3方法的線(xiàn)性關(guān)系在實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明,去甲烏藥堿在5.34~106.8ng/mL范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系,r2=0.9999,線(xiàn)性方程:Y=41400X+72700。3.4方法的檢出限和定量限去甲烏藥堿標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋,取信噪比為3:1時(shí),為最低檢出限,去甲烏藥堿的濃度為0.04ng/mL,當(dāng)樣品取樣量1g,定容50mL時(shí),方法的去甲烏藥堿檢出限為2μg/kg;取信噪比為10:1時(shí),為最低定量限,去甲烏藥堿的濃度為0.12ng/mL,當(dāng)樣品取樣量1g,定容50mL時(shí),方法的去甲烏藥堿定量限為6μg/kg

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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