以非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞為模型,探究藻藍(lán)蛋白抑制其增殖和遷移的調(diào)控機(jī)制。采用MTT法、克隆形成試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、劃痕試驗(yàn)等方法檢測藻藍(lán)色素蛋白對細(xì)胞增殖、遷移的影響。采用轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序分析篩選關(guān)鍵基因:受體相互作用蛋白激酶1（Receptor interacting proteinkinase1,RIPK1）,通過體外轉(zhuǎn)染小干擾RNA沉默RIPK1,利用熒光定量PCR、免疫印跡技術(shù)檢測沉默效率,驗(yàn)證沉默RIPK1后細(xì)胞增殖機(jī)制及體外遷移能力的變化。結(jié)果表明,藻藍(lán)蛋白降低了細(xì)胞的存活率、生長速率、集落形成能力以及體外遷移能力。細(xì)胞轉(zhuǎn)染RIPK1 siRNA后,RIPK1的表達(dá)受到顯著抑制,同時,細(xì)胞生長速率、集落形成能力以及體外遷移能力也降低,并且細(xì)胞周期出現(xiàn)G1期阻滯,這與藻藍(lán)蛋白處理A549細(xì)胞的表型一致。本研究證實(shí)了藻藍(lán)蛋白能夠通過下調(diào)RIPK1表達(dá)抑制肺癌A549細(xì)胞的增殖和遷移,為利用新型抗癌功能性食品著色劑奠定了基礎(chǔ),同時也對非小細(xì)胞肺癌的安全性治療提供了理論依據(jù)。 

【文章來源】：中國食品學(xué)報(bào). 2020,20(10)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

藻藍(lán)蛋白對A549細(xì)胞的體外增殖能力的影響

劃痕試驗(yàn)結(jié)果如圖3a所示，4.8μmol/L劑量的藻藍(lán)蛋白作用于肺癌A549細(xì)胞使其體外遷移能力減弱，顯微鏡拍照劃痕結(jié)果可知試驗(yàn)組在劃痕24,48 h后向劃痕中央遷移的距離大于對照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，遷移率如圖3b所示，遷移率顯著減小。以上說明藻藍(lán)蛋白能抑制肺癌A549細(xì)胞的體外遷移能力。圖3 藻藍(lán)蛋白對A549細(xì)胞的體外遷移能力的影響

藻藍(lán)蛋白對A549細(xì)胞的體外遷移能力的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3368880