[研究背景]能源是支撐社會(huì)經(jīng)濟(jì)持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)資源,化石能源儲(chǔ)備日益減少為了保證經(jīng)濟(jì)發(fā)展,開發(fā)新能源成為各國勢(shì)在必行的發(fā)展策略。水稻秸稈纖維素含量高,在中國的種植面積廣,是生物質(zhì)能源開發(fā)利用的重要資源。因此篩選能快速有效降解秸稈纖維素的復(fù)合菌系,對(duì)其進(jìn)行馴化和降解特性的研究成為了廣大科研人員探索有效利用秸稈的方法的重要方向。 [目的]篩選能高效降解水稻秸稈纖維素的復(fù)合菌系,分析其降解特性為其應(yīng)用提供參考。 [方法]以長(zhǎng)期耕種的水稻田中泥土及堆放一個(gè)月左右的水稻秸稈堆腐物為菌源,采用限制性篩選的方法,用以水稻秸稈粉為唯一碳源的PCS培養(yǎng)基篩選、馴化秸稈纖維素降解菌復(fù)合系。用梯度實(shí)驗(yàn)法和用響應(yīng)面法進(jìn)行復(fù)合系發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化。用DNS顯色法和蒽酮顯色法測(cè)定復(fù)合系發(fā)酵過程中的CMC酶活和總糖含量。采用單菌落分離法和剛果紅染色、七葉苷顯色、基因測(cè)序分析等方法研究復(fù)合系中的單菌落。 [結(jié)果] (1)復(fù)合系I-D在馴化到第四代時(shí)就能在7天內(nèi)完全崩解作為指示標(biāo)志的濾紙條,發(fā)酵液的pH值也穩(wěn)定在8-9之間,傳代到第十代后降解效率仍沒有退化,pH值也穩(wěn)定在9左右。I-D發(fā)酵7天,對(duì)濾紙條崩解率為1...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 生物質(zhì)能源
        1.1.2 纖維素資源現(xiàn)狀
        1.1.3 纖維素酶的結(jié)構(gòu)和功能
        1.1.4 纖維素降解微生物的研究進(jìn)展
        1.1.5 纖維素降解菌復(fù)合系研究現(xiàn)狀
    1.2 水稻秸稈資源概述
        1.2.1 水稻秸稈資源的現(xiàn)狀
        1.2.2 水稻秸稈的利用現(xiàn)狀
        1.2.3 水稻秸稈組成
        1.2.4 水稻秸稈預(yù)處理的方法
    1.3 微生物復(fù)合系研究方法
        1.3.1 限制性培養(yǎng)技術(shù)
        1.3.2 DGGE技術(shù)
        1.3.3 宏基因組測(cè)序技術(shù)
    1.4 本論文立題依據(jù)、研究目標(biāo)及技術(shù)路線
        1.4.1 立題依據(jù)
        1.4.2 研究目標(biāo)
        1.4.3 技術(shù)路線
第二章 高效水稻秸稈纖維素降解菌復(fù)合系的篩選與馴化
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 樣品采集
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 試劑及緩沖液的配置
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 復(fù)合系初篩
        2.2.2 制備白蟻后腸懸浮液
        2.2.3 DNS法繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.2.4 CMCase活力的測(cè)定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 復(fù)合系篩選和馴化
        2.3.2 繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.3 CMC酶活的測(cè)定
    2.4 討論
第三章 復(fù)合系I-D發(fā)酵條件優(yōu)化
    3.1 材料與試劑
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 試劑及緩沖液的配置
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 減重法測(cè)定水稻秸稈失重率
        3.2.2 復(fù)合系纖維素降解條件的單因素實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 響應(yīng)面法優(yōu)化纖維素降解條件
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.2 BBD試驗(yàn)建立回歸方程
        3.3.3 響應(yīng)曲面的擬合以及最佳操作點(diǎn)的確定
        3.3.4 驗(yàn)證試驗(yàn)
    3.4 討論
第四章 復(fù)合系I-D對(duì)水稻秸稈的降解特性研究
    4.1 材料與試劑
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 試劑及緩沖液的配置
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 復(fù)合系I-D纖維素降解能力的驗(yàn)證
        4.2.2 水稻秸稈成分降解率的測(cè)定
        4.2.3 水稻秸稈降解過程總糖含量測(cè)定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 長(zhǎng)水稻秸稈降解效果
        4.3.2 水稻秸稈主要組成成分降解率
        4.3.3 發(fā)酵過程可溶性總糖含量
    4.4 討論
第五章 復(fù)合系I-D中單菌落分離及鑒定
    5.1 材料與試劑
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 培養(yǎng)基
        5.1.3 試劑及緩沖液的配置
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 單菌落的分離
        5.2.2 菌落功能篩選
        5.2.3 細(xì)菌革蘭氏染色
        5.2.4 細(xì)菌16 S rDNA序列鑒定
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 單菌落的分離結(jié)果
        5.3.2 菌落功能篩選結(jié)果
        5.3.3 單菌落D6生物學(xué)特性
        5.3.4 單菌落D6 16S rDNA序列鑒定結(jié)果
    5.4 討論
第六章 結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及下一步工作計(jì)劃
    6.1 全文結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 下一步工作計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：4034421