化學殺蟲劑發(fā)展史上最重要的里程碑是新煙堿類殺蟲劑的發(fā)現(xiàn)。據(jù)報道，2006年新煙堿類殺蟲劑在全世界的年銷量達到十五億六千萬美元，約占世界化學殺蟲劑總銷售額的17%。吡蟲啉是新煙堿類殺蟲劑中的典型代表藥劑，是世界范圍內(nèi)最有效、銷售量最好的殺蟲劑，在田間廣泛使用，主要用于防治刺吸式口器害蟲，害蟲接觸藥劑后，其中樞神經(jīng)正常傳導受阻，使害蟲麻痹死亡。 隨著吡蟲啉的廣泛使用，吡蟲啉將會通過多種途徑進入環(huán)境，勢必對生態(tài)系統(tǒng)的非靶標生物產(chǎn)生不利影響，從而對整個生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能帶來各種各樣的危害。因此，研究吡蟲啉對非靶標生物的毒性，是評價吡蟲啉對生態(tài)環(huán)境安全性的一個重要指標。 為了評估吡蟲啉對土壤生態(tài)環(huán)境的影響，本文以吡蟲啉為研究對象，選取土壤中的模式生物--赤子愛勝蚓為生物標志物，將蚯蚓暴露于空白對照土壤和經(jīng)吡蟲啉染毒后濃度為0.10、0.50、1.00mg/kg土壤的處理組土壤中，于染毒后的第7，14，21和28天，取樣進行各指標的測定。通過測定吡蟲啉對蚯蚓活性氧簇（ROS）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶（GST）活性、丙二醛（MDA）含量的影響...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

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1 引言
    1.1 吡蟲啉理化性質(zhì)概述
        1.1.1 吡蟲啉的理化性質(zhì)及作用機理
        1.1.2 吡蟲啉的環(huán)境特性
    1.2 吡蟲啉對非靶標生物的毒性
        1.2.1 吡蟲啉對蜜蜂的毒性
        1.2.2 吡蟲啉對家蠶的毒性
        1.2.3 吡蟲啉對植物的毒性
        1.2.4 .吡蟲啉對水生生物的毒性
        1.2.5 吡蟲啉對蚯蚓的毒性．
    1.3 選擇指示生物及指標的依據(jù)
        1.3.1 赤子愛勝蚓作為指示生物的意義
        1.3.2 選取的指標的價值
    1.4 活性氧自由基（ROS）產(chǎn)生與消除途徑
        1.4.1 ROS 簡介
        1.4.2 生物體內(nèi) ROS 存在意義
        1.4.3 ROS 的清除途徑
    1.5 抗氧化酶系清除活性氧簇機理
        1.5.1 超氧化物歧化酶（SOD）消除 O2-機理
        1.5.2 過氧化氫酶（CAT）消除 H2O2機理
    1.6 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶（GST）的解毒機制
    1.7 脂質(zhì)過氧化終產(chǎn)物--丙二醛（MDA）簡介
    1.8 單細胞凝膠電泳（SCGE）概述
        1.8.1 單細胞凝膠電泳簡介
        1.8.2 單細胞凝膠電泳基本原理
    1.9 本文研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 藥品試劑
    2.2 儀器設備
    2.3 赤子愛勝蚓選取及染毒方式
        2.3.1 OECD 標準人工土及農(nóng)藥貯備液配制
        2.3.2 染毒濃度及時間
        2.3.3 測定指標
        2.3.4 染毒方法
    2.4 蚯蚓體內(nèi) ROS 的測定方法
        2.4.1 ROS 試劑配制
        2.4.2 ROS 測定原理
        2.4.3 ROS 測定方法
    2.5 蚯蚓體內(nèi)抗氧化酶系的測定方法
        2.5.1 蚯蚓酶液制備
        2.5.2 酶液蛋白質(zhì)含量的測定
        2.5.3 SOD 測定
        2.5.4 CAT 測定
    2.6 蚯蚓體內(nèi) GST 活性的測定方法
        2.6.1 GST 試劑配制
        2.6.2 GST 活性測定
        2.6.3 GST 結(jié)果與計算
    2.7 蚯蚓體內(nèi) MDA 含量的測定方法
        2.7.1 MDA 測定原理
        2.7.2 MDA 試劑配制
        2.7.3 MDA 測定
        2.7.4 MDA 結(jié)果與計算
    2.8 蚯蚓體腔細胞 DNA 損傷的測定方法
        2.8.1 彗星實驗試劑配制
        2.8.2 蚯蚓體腔細胞的制備
        2.8.3 電泳膠板的制作
        2.8.4 細胞裂解
        2.8.5 DNA 解旋
        2.8.6 電泳
        2.8.7 中和、脫水
        2.8.8 染色
        2.8.9 觀察和分析
    2.9 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 吡蟲啉對蚯蚓 ROS 含量的影響
    3.2 吡蟲啉對蚯蚓抗氧化酶活性影響
        3.2.1 吡蟲啉對蚯蚓 SOD 活性影響
        3.2.2 吡蟲啉對蚯蚓 CAT 活性的影響
    3.3 吡蟲啉對蚯蚓解毒酶 GST 活性的影響
    3.4 吡蟲啉對蚯蚓 MDA 含量的影響
    3.5. 吡蟲啉對蚯蚓體腔細胞 DNA 的損傷
        3.5.1 彗星圖像
        3.5.2 吡蟲啉對蚯蚓體腔細胞細胞 DNA 損傷程度（Olive 尾矩）的影響
4 討論
    4.1 吡蟲啉對對蚯蚓 ROS 含量的影響
    4.2 吡蟲啉對蚯蚓氧化脅迫研究
        4.2.1 吡蟲啉對蚯蚓 SOD 活性的影響
        4.2.2 吡蟲啉對蚯蚓 CAT 活性的影響
    4.3 吡蟲啉對蚯蚓 GST 活性的影響
    4.4 吡蟲啉對蚯蚓 MDA 含量的影響
    4.5 吡蟲啉對蚯蚓體腔細胞 DNA 的損傷
    4.6 各個測定指標的相關(guān)性
5 結(jié)論
6 本論文創(chuàng)新之處
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表論文



本文編號：4034013