本文關(guān)鍵詞：龍眼體胚發(fā)生過程中與ARF相關(guān)小分子RNA的功能研究

  更多相關(guān)文章： 龍眼 體胚發(fā)生 小分子RNA ARF基因 功能驗(yàn)證

【摘要】：植物生長素通過調(diào)控干細(xì)胞的再生而誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎發(fā)生。同時(shí),位于生長素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中心的生長素響應(yīng)因子受小分子RNA的調(diào)控。本研究以龍眼體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中不同發(fā)育階段的胚性培養(yǎng)物為試驗(yàn)材料,通過RT-PCR和RACE技術(shù)克隆小分子RNA及其靶基因生長素響應(yīng)基因子ARFs,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析；在此基礎(chǔ)上,采用RLM-RACE法鑒定靶基因TAS3、ARF3、ARF4、ARF6、 ARF8、ARF10、ARF16、ARF17的裂解位點(diǎn)；通過實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)檢測龍眼體胚發(fā)生過程中小分子RNA及其靶基因ARFs的表達(dá)情況并對其調(diào)控機(jī)制做進(jìn)一步分析。為驗(yàn)證miR39、TAS3和ARFs三者之間的互作關(guān)系,進(jìn)一步通過遺傳轉(zhuǎn)化將龍眼TAS3基因在Micro-Tom番茄中過表達(dá),觀察再生植株的表型變化并檢測miR390、ARF3和ARF4在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)情況。本研究主要結(jié)果如下：1龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3初級體克隆及生物信息學(xué)分析以龍眼“紅核子”不同胚性培養(yǎng)物為材料,采用RT-PCR技術(shù)法克隆獲得了龍眼miR160、miR167、miR390、TAS3初級體序列,分別命名為dlo-pri-miR160、 dlo-pri-miR167、dlo-pri-miR390、dlo-pri-TAS3,其大小分別為441 bp、185 bp、 785 bp、579 bp。生物信息學(xué)分析表明,dlo-pri-miR 160、 dlo-pri-miR 167、 dlo-pri-miR390、dlo-pri-TAS3均含有典型的二級結(jié)構(gòu),且自由能比一般植物的平均自由能都較高；系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,龍眼miR160、miR167、TAS3初級體分別與番茄(Solanum lycopersicum)、柑桔(Citrus sinensis)、番茄(Solanum lycopersicum)的親緣關(guān)系較近,龍眼miR390與擬南芥(Arabidopsis thaliana)、葡萄(Vitis vinifera)、大豆(Glycine max)等其他物種的親緣關(guān)系都較遠(yuǎn)。2龍眼胚性愈傷組織靶基因ARFs的克隆及生物信息學(xué)分析以龍眼“紅核子”胚性愈傷組織為材料,通過RT-PCR結(jié)合RACE法對sRNA調(diào)控的靶基因生長素響應(yīng)基因家族成員進(jìn)行克隆。成功獲得ARF3 (KJ200347.1)、 ARF4 (KJ461667.1)、ARF6 (KJ410230)、ARF8 (KJ410232)、ARF10 (KJ410234)、 ARF16 (KJ410235)、ARF17 (KJ410236) cDNA序列,其大小分別為2561 bp、2698 bp、3381 bp、2868 bp、2093 bp、2279 bp、2098 bp。生物信息學(xué)分析表明：在龍眼生長素響應(yīng)蛋白中,D1ARF3、D1ARF6、D1ARF8、DIARF10、D1ARF16和D1ARF17都屬于水溶性蛋白；其中D1ARF6蛋白、D1ARF8蛋白、DIARF10蛋白、D1ARF16蛋白都具有B3-DNA結(jié)合區(qū)、ARF家族的保守區(qū)Auxin_resp和IAA-ARF-dimerisation3種結(jié)構(gòu)域,而D1ARF3蛋白和DIARF17蛋白只具有B3-DNA結(jié)合區(qū)和ARF家族的保守區(qū)Auxin.rresp兩種結(jié)構(gòu)域；龍眼生長素響應(yīng)蛋白ARF6、ARF8中間區(qū)域富含谷氨酰胺、絲氨酸和亮氨酸,龍眼生長素響應(yīng)蛋白ARF3、ARF10、ARF16、ARF17中間非保守區(qū)域都不富含谷氨酸(Glu),都具有抑制轉(zhuǎn)錄活性；同源性分析表明,龍眼生長素響應(yīng)基因家族成員都分別與擬南芥生長素響應(yīng)基因家族成員有很接近的親緣關(guān)系。3龍眼生長素響應(yīng)因子ARFs及TAS3基因的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證為進(jìn)一步驗(yàn)證龍眼體胚中sRNA與ARFs的調(diào)控關(guān)系,以龍眼“紅核子”松散型胚性愈傷組織、球形胚、心形胚、魚雷形胚和子葉形胚5個(gè)不同發(fā)育階段胚性培養(yǎng)物的混樣cDNA為模板,采用改良的RLM-RACE法驗(yàn)證靶基因的裂解位點(diǎn)。經(jīng)測序結(jié)果分析,發(fā)現(xiàn)miR390靶標(biāo)的TAS3前體在TTA/TCC位點(diǎn)被切割;而TAS3識別ARF3和ARF4的第二個(gè)切割位點(diǎn),分別為GCA/AGG、CAA/GTT;在ARF6所挑取的18個(gè)單克隆子中所裂解的位置都位于龍眼miR167識別位點(diǎn)以外的序列中；而ARF8所挑取的25個(gè)單克隆子中只有GCU/GGC這個(gè)切割位點(diǎn)位于miR167識別位點(diǎn)序列中；分別挑取miR160的靶基因生長素響應(yīng)因子ARF10、ARF16、ARF17單克隆子,經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)它們有共同的裂解位點(diǎn)為AGG/GAG.4龍眼體胚發(fā)生過程中小分子RNA及其靶基因ARFs的定量表達(dá)分析采用qPCR技術(shù),分別以龍眼“紅核子”品種體胚不同發(fā)育階段培養(yǎng)物、龍眼“四季蜜”品種不同組織器官、2,4-D處理下的龍眼胚性愈傷組織為材料,檢測龍眼體胚miR16、miR167、miR390與TAS3初級體及其靶基因ARFs的mRNA轉(zhuǎn)錄表達(dá)情況。結(jié)果表明：在龍眼體胚發(fā)育的5個(gè)不同階段中,miR160初級體在球形胚時(shí)期的轉(zhuǎn)錄水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其靶基因ARF10、ARF16、ARF17的轉(zhuǎn)錄水平,這可能與miR160參與球形胚的形態(tài)建成以及對靶基因的負(fù)調(diào)控有關(guān)；但檢測不到龍眼miR167初級體的表達(dá)信號,其靶基因ARF6與ARF8的表達(dá)變化趨勢完全相反；龍眼pri-miR390與TAS3初級體在球形胚時(shí)期的表達(dá)差異較顯著；而TAS3初級體與其靶基因ARF4的表達(dá)模式較接近的,ARF3的整體轉(zhuǎn)錄水平波動較平穩(wěn)且表達(dá)量較低。在龍眼“四季蜜”中,dlo-pri-miR160及其靶基因表達(dá)差異較顯著的組織器官是種子、根；龍眼pri-miR390、pri-TAS3、ARF3、ARF4在9個(gè)組織器官中都有表達(dá),且都在根部中有最高的表達(dá)量；雖然檢測不到龍眼miR167初級體的表達(dá)信號,但其靶基因生長素響應(yīng)因子ARF6、ARF8在花蕾、根中都有較高的轉(zhuǎn)錄水平。在2,4-D處理下的龍眼胚性愈傷組織中,ARF10的表達(dá)量明顯較高且整體轉(zhuǎn)錄水平呈上升的趨勢,dlo-pri-miR160與ARF16、ARF17的表達(dá)量較低且差異并不顯著；dlo-pri-miR167依然沒有表達(dá)信號,其靶基因ARF6、ARF8隨著生長素濃度的增加而升高,兩者在0.5 mg/L時(shí)的表達(dá)差異較顯著；dlo-pri-miR390的整體轉(zhuǎn)錄水平略低且變化平穩(wěn),TAS3初級體在1.0 mg/L、2.0mg/L時(shí)的轉(zhuǎn)錄水平較高,其靶基因ARF3、ARF4在1.0 mg/L處的表達(dá)量最高,同時(shí)在2.0 mg/L時(shí)表達(dá)驟然降低。5龍眼TAS3基因轉(zhuǎn)化Micro-Tom番茄及功能驗(yàn)證本試驗(yàn)利用酶切連接法將TAS3基因片段構(gòu)建到植物表達(dá)載體pCAMBIA-1301上,并將其轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌EHA105的感受態(tài)細(xì)胞中,進(jìn)行Micro-Tom番茄的遺傳轉(zhuǎn)化。為驗(yàn)證轉(zhuǎn)化結(jié)果對其進(jìn)行PCR檢測,試驗(yàn)結(jié)果顯示,龍眼TAS3基因已成功轉(zhuǎn)入到Micro-Tom番茄中；與對照組的普通Micro-Tom番茄相比,所獲得轉(zhuǎn)基因番茄植株的表型存在明顯差異,主要表現(xiàn)在植株葉片的異常卷曲以及莖干和根部的粗壯。利用qPCR技術(shù)檢測miR390、ARF3和ARF4在轉(zhuǎn)基因番茄植株中的表達(dá)情況,結(jié)果表明：生長素響應(yīng)基因ARF3、ARF4在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)水平都明顯低于對照水平,推測轉(zhuǎn)基因番茄植株中因TAS3基因的過量表達(dá)而強(qiáng)烈抑制了生長素響應(yīng)因子的表達(dá),與預(yù)期結(jié)果一致。此外,本研究也發(fā)現(xiàn)龍眼TAS3基因?qū)χ参锏母⑶o、葉的生長發(fā)育有著重要的影響。綜上所述,龍眼小分子RNA準(zhǔn)確地裂解其靶基因生長素響應(yīng)因子而影響體胚的生長發(fā)育,即龍眼miR160負(fù)調(diào)控ARF10、ARF16、ARF17, miR167負(fù)調(diào)控ARF6、ARF8, miR390負(fù)調(diào)控TAS3, TAS3負(fù)調(diào)控ARF3、ARF4。除龍眼miR167初級體檢測不到信號表達(dá)外,龍眼小分子RNA及其靶基因在龍眼“四季蜜”的花蕾、成花、葉片、小果、大果、果肉、果皮、種子和根9個(gè)不同組織器官中都有表達(dá),且都在根部中有較高的轉(zhuǎn)錄水平。經(jīng)PCR試驗(yàn)鑒定,在micro-Tom番茄中過表達(dá)龍眼TAS3基因并成功獲得轉(zhuǎn)基因植株,其根、莖、葉都發(fā)生明顯的變化。因此,在龍眼體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中,小分子RNA與其靶基因生長素響應(yīng)因子共同構(gòu)成一個(gè)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控而影響植物的生長發(fā)育。
【關(guān)鍵詞】：龍眼 體胚發(fā)生 小分子RNA ARF基因 功能驗(yàn)證
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S667.2
【目錄】：

• 縮寫詞9-10
• 摘要10-14
• Abstract14-18
• 第一章 引言18-26
• 1 植物小分子RNA研究進(jìn)展18-21
• 1.1 植物miRNA及其生物學(xué)功能18-20
• 1.2 植物體胚發(fā)生過程中miRNA的研究進(jìn)展20
• 1.3 植物ta-siRNA及其生物學(xué)功能20-21
• 2 植物生長素響應(yīng)基因家族研究進(jìn)展21-22
• 2.1 植物生長素響應(yīng)因子的特征21-22
• 2.2 植物生長素響應(yīng)基因克隆與表達(dá)研究22
• 3 植物miRNA及TAS3與其靶基因生長素響應(yīng)因子的功能研究22-24
• 3.1 植物miR160、miR167、miR390、TAS3及其靶基因生長素響應(yīng)因子的互作機(jī)制22-23
• 3.2 Micro-Tom番茄遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展23-24
• 4 本研究的意義和主要內(nèi)容24-26
• 4.1 本項(xiàng)目研究的意義24-25
• 4.2 本項(xiàng)目的研究內(nèi)容25-26
• 第二章 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3初級體克隆及生物信息學(xué)分析26-42
• 第一節(jié) 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3初級體克隆26-31
• 1 材料與方法26-29
• 1.1 材料26
• 1.2 方法26-29
• 1.2.1 龍眼體胚不同發(fā)育時(shí)期的培養(yǎng)材料總RNA提取及cDNA合成26-27
• 1.2.2 龍眼體胚pri-miR160、pri-miR167、pri-miR390與pri-TAS3克隆的引物設(shè)計(jì)及PCR擴(kuò)增27-29
• 1.2.3 目的基因克隆的PCR反應(yīng)體系及擴(kuò)增程序29
• 1.2.4 目的片段的回收、克隆和測序29
• 2 結(jié)果與分析29-30
• 2.1 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3基因初級體保守序列的擴(kuò)增29-30
• 2.2 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3基因初級體cDNA末端的RACE擴(kuò)增30
• 3 討論30-31
• 3.1 龍眼體胚miR160、miR167、miR390、TAS3初級體序列克隆存在的問題及意義30-31
• 第二節(jié) 龍眼胚性愈傷組織pri-miR160、pri-miR167、pri-miR390與pri-TAS3生物信息學(xué)分析31-42
• 1 材料與方法31-32
• 1.1 材料31
• 1.2 方法31-32
• 2 結(jié)果與分析32-41
• 2.1 龍眼體胚pri-miR160、pri-miR167、pri-miR390與pri-TAS3二級結(jié)構(gòu)及成熟序列的預(yù)測與分析32-38
• 2.1.1 龍眼體胚pri-miR160二級結(jié)構(gòu)及成熟序列的預(yù)測與分析32-34
• 2.1.2 龍眼體胚pri-miR167二級結(jié)構(gòu)及成熟序列的預(yù)測與分析34-35
• 2.1.3 龍眼體胚pri-miR390二級結(jié)構(gòu)及成熟序列的預(yù)測與分析35-36
• 2.1.4 龍眼體胚pri-TAS3二級結(jié)構(gòu)及成熟序列的預(yù)測與分析36-38
• 2.2 龍眼體胚pri-miR160、pri-miR167、pri-miR390與pri-TAS3的同源性分析38-41
• 2.2.1 龍眼體胚pri-miR160的同源性分析38
• 2.2.2 龍眼體胚pri-miR167的同源性分析38-39
• 2.2.3 龍眼體胚pri-miR390的同源性分析39-40
• 2.2.4 龍眼體胚pri-TAS3的同源性分析40-41
• 3 討論41-42
• 第三章 龍眼胚性愈傷組織靶基因ARFs的克隆及生物信息學(xué)分析42-53
• 第一節(jié) 龍眼胚性愈傷組織靶基因ARFs的克隆42-46
• 1 材料與方法42-44
• 1.1 材料42
• 1.2 方法42-44
• 1.2.1 龍眼胚性愈傷組織、球形胚和魚雷形胚總RNA提取和cDNA的合成42
• 1.2.2 龍眼胚性愈傷組織ARFs基因的引物設(shè)計(jì)及PCR擴(kuò)增42-43
• 1.2.3 龍眼胚性愈傷組織ARF基因家族PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系和程序43-44
• 1.2.4 目的片段的回收、克隆和測序44
• 2 結(jié)果與分析44-46
• 2.1 龍眼胚性愈傷組織ARFs基因保守區(qū)序列的獲得44
• 2.2 龍眼生長素響應(yīng)因子ARFs基因cDNA末端的RACE擴(kuò)增44-45
• 2.3 龍眼生長素響應(yīng)因子ARFs基因的核苷酸序列分析45-46
• 第二節(jié) 龍眼生長素響應(yīng)因子ARF3、ARF4、ARF6、ARF8、ARF10、ARF16和ARF17的生物信息學(xué)分析46-53
• 1 材料與方法46
• 1.1 材料46
• 1.2 方法46
• 2 結(jié)果與分析46-51
• 2.1 龍眼胚性愈傷組織生長素響應(yīng)蛋白ARFs理化性質(zhì)與保守結(jié)構(gòu)域的預(yù)測與分析46-47
• 2.2 龍眼胚性愈傷組織生長素響應(yīng)蛋白ARFs磷酸化位點(diǎn)的預(yù)測與分析47-48
• 2.3 龍眼胚性愈傷組織生長素響應(yīng)蛋白ARFs二級及三維結(jié)構(gòu)的預(yù)測與分析48-49
• 2.4 龍眼胚性愈傷組織生長素響應(yīng)蛋白ARFs的亞細(xì)胞定位和信號肽預(yù)測分析49
• 2.5 龍眼胚性愈傷組織ARFs蛋白質(zhì)的跨膜結(jié)構(gòu)預(yù)測與分析49-50
• 2.6 龍眼胚性愈傷組織生長素響應(yīng)蛋白ARF3、ARF6、ARF8、ARF10、ARF16和ARF17與擬南芥ARF蛋白家族的的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析50-51
• 3 討論51-53
• 第四章 龍眼生長素響應(yīng)因子ARFs及TAS3基因的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證53-59
• 1 材料與方法53-54
• 1.1 材料53
• 1.2 方法53-54
• 2 結(jié)果與分析54-57
• 2.1 龍眼TAS3基因及其靶基因ARF3、ARF4的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證54-55
• 2.2 龍眼miR167靶基因ARF6、ARF8的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證55-56
• 2.3 龍眼miR160靶基因ARF10、ARF16、ARF17的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證56-57
• 3 討論57-59
• 第五章 龍眼體胚發(fā)生過程中小分子RNA及其靶基因ARFs的定量表達(dá)分析59-76
• 1 材料與方法59-61
• 1.1 材料59-60
• 1.2 方法60-61
• 1.2.1 不同濃度2,4-D處理龍眼胚性愈傷組織60
• 1.2.2 總RNA的提取和cDNA的合成60
• 1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR60-61
• 2 結(jié)果與分析61-72
• 2.1 龍眼體胚發(fā)生過程中小分子RNA及其靶基因ARFs在龍眼體細(xì)胞胚胎不同發(fā)育階段的qPCR分析61-65
• 2.1.1 龍眼TAS3基因及其靶基因ARF3、ARF4在龍眼體細(xì)胞胚胎不同發(fā)育階段的表達(dá)分析62
• 2.1.2 龍眼miR167初級體及其靶基因ARF6、ARF8在龍眼體細(xì)胞胚胎不同發(fā)育階段的表達(dá)分析62-63
• 2.1.3 龍眼miR160初級體及其靶基因ARF1O、ARF16、ARF17在龍眼體細(xì)胞胚胎不同發(fā)育階段的表達(dá)分析63-64
• 2.1.4 龍眼miR390初級體及其靶基因TAS3在龍眼體細(xì)胞胚胎不同發(fā)育階段的表達(dá)分析64-65
• 2.2 龍眼小分子RNA及其靶基因ARFs在龍眼“四季蜜”不同組織部位的qPCR分析65-69
• 2.2.1 龍眼TAS3基因及其靶基因ARF3、ARF4在龍眼“四季蜜”不同組織部位的表達(dá)分析65-66
• 2.2.2 龍眼miR167初級體及其靶基因ARF6、ARF8在龍眼“四季蜜”不同組織部位的表達(dá)分析66-67
• 2.2.3 龍眼miR160初級體及其靶基因ARF10、ARF16、ARF17在龍眼“四季蜜”不同組織部位的表達(dá)分析67-68
• 2.2.4 龍眼miR390初級體及其靶基因TAS3在龍眼“四季蜜”不同組織部位的表達(dá)分析68-69
• 2.3 龍眼小分子RNA及其靶基因ARFs在2,4-D處理下龍眼胚性愈傷組織中的qPCR分析69-72
• 2.3.1 龍眼TAS3基因及其靶基因ARF3、ARF4在2,4-D處理下龍眼胚性愈傷組織中的表達(dá)分析69
• 2.3.2 龍眼miR167初級體及其靶基因ARF6、ARF8在2,4-D處理下龍眼胚性愈傷組織中的表達(dá)分析69-70
• 2.3.3 龍眼miR1 60初級體及其靶基因ARF10、ARF16、ARF17在2,4-D處理下龍眼胚性愈傷組織中的表達(dá)分析70-71
• 2.3.4 龍眼miR390初級體及其靶基因TAS3在2,4-D處理下龍眼胚性愈傷組織中的表達(dá)分析71-72
• 3 討論72-76
• 3.1 龍眼miR160、miR167、miR390、TAS3初級體及其靶基因ARFs的互作機(jī)制介導(dǎo)龍眼體胚的發(fā)生72-73
• 3.2 龍眼miR160、miR167、miR390、TAS3初級體及其靶基因ARFs在龍眼“四季蜜”不同組織的特異性表達(dá)73-74
• 3.3 不同濃度2,4-D處理下龍眼miR160、miR167、miR390、TAS3初級體及其靶基因ARFs的表達(dá)差異74-76
• 第六章 龍眼TAS3基因轉(zhuǎn)化Micro-Tom番茄的研究76-85
• 1 材料與方法76-78
• 1.1 材料76-77
• 1.1.1 試驗(yàn)材料76
• 1.1.2 培養(yǎng)基組分76
• 1.1.3 試驗(yàn)試劑76-77
• 1.2 方法77-78
• 1.2.1 龍眼TAS3基因超表達(dá)載體的構(gòu)建77
• 1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的龍眼TAS3表達(dá)載體的轉(zhuǎn)化77
• 1.2.3 根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化番茄子葉77-78
• 1.2.4 轉(zhuǎn)基因植株的檢測78
• 1.2.5 檢測TAS3、miR390、ARF3和ARF4在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)情況78
• 2 結(jié)果與分析78-83
• 2.1 構(gòu)建植物表達(dá)載體及重組質(zhì)粒的鑒定78-79
• 2.2 檢測轉(zhuǎn)基因植株79-80
• 2.3 T_0代轉(zhuǎn)基因植物的表型80-81
• 2.4 轉(zhuǎn)基因番茄定量表達(dá)分析81-83
• 2.4.1 檢測分析TAS3、miR390在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)情況81-82
• 2.4.2 檢測分析ARF3在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)情況82
• 2.4.3 檢測分析ARF4在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)情況82-83
• 3 討論83-85
• 3.1 過表達(dá)龍眼TAS3基因影響植物根部、莖干及葉片的生長83
• 3.2 龍眼TAS3、miR390和ARFs三者之間的互作機(jī)制研究83-85
• 第七章 小結(jié)85-90
• 1 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3初級體克隆及生物信息學(xué)分析85
• 2 龍眼胚性愈傷組織靶基因ARF3、ARF4、ARF6、ARF8、ARF10、ARF16、ARF17的克隆及生物信息學(xué)分析85-86
• 3 龍眼TAS3、ARF3、ARF4、ARF6、ARF8、ARF1O、ARF16、ARF17的裂解位點(diǎn)驗(yàn)證86-87
• 4 龍眼體胚miR160、miR167、miR390與TAS3初級體及其靶基因ARFs的定量表達(dá)分析87
• 5 龍眼TAS3基因超表達(dá)研究及其與miR390、ARFs三者間的互作機(jī)制研究87-90
• 參考文獻(xiàn)90-96
• 附錄96-110
• 附錄1 GenBank上登錄的龍眼miR160、miR167、miR390與TAS3初級體及其靶基因的序列信息(12條)96-109
• 附錄2 轉(zhuǎn)基因植株表型圖109-110
• 在學(xué)碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況110-111
• 一、在學(xué)期間發(fā)表論文110
• 二、在學(xué)期間參加的學(xué)術(shù)會議110-111
• 致謝111

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李曉燕;陳雪梅;蓋穎;;楊樹不同組織中ARF表達(dá)與生長素相關(guān)性研究[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年06期

2 王壘;陳勁楓;婁麗娜;婁群峰;;黃瓜ARF家族序列特征及部分成員在果實(shí)發(fā)育早期的表達(dá)分析[J];園藝學(xué)報(bào);2011年04期

3 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 俞東容;魯盈;王永鈞;;IgA腎病并發(fā)ARF臨床分析[A];浙江省腎臟病骨干醫(yī)師學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 劉曉林;浸沒式ArF光刻物鏡的光學(xué)設(shè)計(jì)及像差控制[D];北京理工大學(xué);2015年

2 陳寒溪;第二軌道外交——CSCAP對ARF的影響[D];清華大學(xué);2004年

3 繆琳;ARF對Miz-1抑制p53轉(zhuǎn)錄活性的阻抑作用[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 林麗霞;龍眼體胚發(fā)生過程中與ARF相關(guān)小分子RNA的功能研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

2 沈佳;細(xì)胞抑癌因子ARF與腺病毒E1A蛋白關(guān)系的研究[D];華東師范大學(xué);2011年

，

本文編號：773846