本文關(guān)鍵詞：我國(guó)三省部分地區(qū)羊四種病原感染情況調(diào)查

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【摘要】：羊腹瀉是由多種原因引起羊的以拉稀為主要癥狀的一類疾病的總稱。近些年來一直困擾著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展,已經(jīng)成為羊養(yǎng)殖中影響羊的種群繁育速度和經(jīng)濟(jì)效益的主要疾病之一,應(yīng)引起高度重視。引起羊腹瀉的因素多而復(fù)雜,但以寄生蟲性病原和細(xì)菌性病原為主導(dǎo)因素。隱孢子蟲、賈第蟲和球蟲是引起羊腹瀉較為常見的寄生蟲性病原,這三種病原在世界范圍內(nèi)均有分布,羊均易感染。羊細(xì)菌性腹瀉病是一種以腹瀉為特征性癥狀的羊消化道疾病,嚴(yán)重影響羊早期的生長(zhǎng)發(fā)育,然而引起羊腹瀉的細(xì)菌性病原主要以羊魏氏梭菌和沙門氏菌為主,這二種細(xì)菌性病原危害最為嚴(yán)重。為了解致羊腹瀉的三種病原的流行情況,為羊腹瀉病的防治提供科學(xué)的參考和依據(jù)。根據(jù)不同地區(qū)和飼養(yǎng)方式,選取河南省的鄭州市、登封市、中牟縣、開封市、新鄉(xiāng)市、新密市、長(zhǎng)葛市、安陽市、南陽市、平頂山市以及安徽省合肥市、陜西省等地12個(gè)縣市的13個(gè)羊場(chǎng),共采集羊糞便樣品553份。經(jīng)顯微鏡檢查后發(fā)現(xiàn),球蟲感染率為88.61%,其中感染率最高為100%,最低為67.31%,感染強(qiáng)度最大為4200000(OPG),隱孢子蟲感染率為1.27%,賈第蟲感染率為3.25%。對(duì)收集的糞便DNA樣品同時(shí)采用PCR法對(duì)隱孢子蟲、賈第蟲、魏氏梭菌進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果,基于SSUrRNA的nested-PCR共檢出50份隱孢子蟲陽性樣品,基于16SrRNA的nested-PCR共檢出39份賈第蟲陽性樣品,隱孢子蟲和賈第蟲感染率分別為9.04%(50/553)、7.05%(39/553);基于ɑ毒素基因的常規(guī)PCR共檢出13份魏氏梭菌陽性樣品,感染率為2.35%(13/553)。幼齡羊的隱孢子蟲、賈第蟲和魏氏梭菌感染率明顯高于成年羊,其中幼齡羊的感染率分別為13.02%(41/315)、8.25%(26/315)、2.86%(9/315),成年羊的感染率分別為4.04%(8/198)、6.57%(13/198)、2.02%(4/198);放牧羊的隱孢子蟲、賈第蟲和魏氏梭菌的感染率分別為31.34%(21/67)、7.46%(5/67)、5.97%(4/67),舍飼羊的感染率分別為5.97%(29/486)、7.00%(34/486)、1.85%(9/486);綿羊隱孢子蟲、賈第蟲、魏氏梭菌的感染率分別為9.28%(31/334)、8.08%(27/334)、3.59%(12/334),山羊的感染率分別為8.68%(19/219)、5.48%(12/219)、0.46%(1/219),綿羊感染率均高于山羊。為了確定引起羊腹瀉的各個(gè)病原的種類,將擴(kuò)增出的陽性樣品序列擴(kuò)增后分別在NCBI中進(jìn)行Blast比對(duì),下載相關(guān)參考序列,應(yīng)用Clustalⅹ2.11軟件分別進(jìn)行序列比對(duì),鑒定出致病種。在本次調(diào)查的羊糞便樣品中共鑒出3個(gè)隱孢子蟲蟲種,分別是C.ubiquitum(N=27)、C.xiaoi(N=19)、C.parvum(N=4);賈第蟲經(jīng)鑒定分別為集聚體A(N=1)和集聚體E(N=38);魏氏梭菌經(jīng)鑒定分屬于A型(N=9)、C型(N=2)和D型(N=2)。其中C.parvum、C.ubiquitum、賈第蟲集聚體A和魏氏梭菌A、C型均屬人畜共患的病原種類,應(yīng)引起高度重視。本研究表明羊腹瀉病原在各種年齡和飼養(yǎng)方式中普遍存在,實(shí)踐中也發(fā)現(xiàn)該病已經(jīng)嚴(yán)重影響我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和健康發(fā)展,其中的人畜共患性寄生蟲和細(xì)菌性病原是人類健康的潛在威脅。所以,對(duì)引起羊腹瀉的重要病原應(yīng)盡早做出準(zhǔn)確診斷,采取有效的綜合預(yù)防措施。本研究為羊腹瀉的診斷和防控提供技術(shù)手段和參考依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：羊腹瀉 病原 隱孢子蟲 賈第蟲 魏氏梭菌 PCR 分子流行病學(xué)
【學(xué)位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.26
【目錄】：

• 致謝5-7
• 摘要7-9
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述9-23
• 引言9
• 1 隱孢子蟲研究及流行概況9-13
• 2.羊賈第蟲研究及流行概況13-18
• 3 魏氏梭菌概況18-23
• 第二部分 研究?jī)?nèi)容23-47
• 第一章 三種致羊腹瀉腸道寄生蟲的感染情況調(diào)查23-30
• 引言23
• 1.材料與方法23-25
• 2.結(jié)果與分析25-28
• 3.結(jié)論與討論28-30
• 第二章 致羊腹瀉的三種病原的分子鑒定30-47
• 引言30-31
• 1.材料與方法31-36
• 2 結(jié)果與分析36-43
• 3 結(jié)論與討論43-47
• 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-60
• 英文摘要60-61

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