本文關(guān)鍵詞：蚯蚓抗損傷有效成分對(duì)小鼠創(chuàng)傷愈合作用的研究

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【摘要】：目的：為了探討蚯蚓抗損傷有效成分(EADEC)促進(jìn)創(chuàng)傷愈合、抗菌消炎作用及機(jī)理,本實(shí)驗(yàn)將探索蚯蚓抗損傷有效成分對(duì)小鼠機(jī)械性損傷模型的治療作用,為其對(duì)創(chuàng)傷愈合的治療效果及機(jī)制提供理論依據(jù),對(duì)今后動(dòng)物源性藥物制劑的研發(fā)及蚯蚓提取物在藥用的延展提供新的思路。內(nèi)容及方法：1、蚯蚓抗損傷有效成分采用電擊蚯蚓、超聲波細(xì)胞破碎、硫酸銨鹽析、超濾管超濾、細(xì)菌篩過(guò)濾等方式進(jìn)行提取。通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳和藥敏試驗(yàn)測(cè)定其蛋白質(zhì)分子量范圍及抑菌性檢測(cè)。添加丙二醇、吐溫80、蔗糖、Nacl等賦形劑制備成噴劑。2、采用KM小鼠60只,建立小鼠背部創(chuàng)傷模型,平均分為空白對(duì)照組、京萬(wàn)紅治療組和蚯蚓抗損傷有效成分組進(jìn)行噴涂治療。每日觀察臨床及局部愈合情況,并在3、7、11、15d后各宰殺四只,采取血液檢測(cè)WBC、Gran、Lymph并分離血清測(cè)定羥脯氨酸(Hyp)、IL-6、TGF-β含量,對(duì)創(chuàng)傷皮膚進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察和免疫組化實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1、EADEC的蛋白分子量主要集中在15-35KD、45-55KD以及60-70KD之間；它對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、鏈球菌以及枯草芽孢桿菌抑菌圈范圍在6-10mm之間。2、EADEC在對(duì)小鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間為14d,相比京萬(wàn)紅組和空白對(duì)照組分別提前1d和2.5d; EADEC和京萬(wàn)紅在第15d創(chuàng)面愈合率均可以達(dá)到100%,相比空白對(duì)照組提高3%；EADEC和京萬(wàn)紅能使小鼠血液中的WBC、PLT、Gran升高；通過(guò)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),EADEC組及京萬(wàn)紅組成纖維細(xì)胞、膠原纖維較多且排列整齊,細(xì)胞質(zhì)豐富,稚嫩肉芽組織迅速形成,肉芽組織中毛細(xì)血管生長(zhǎng)旺盛,與空白對(duì)照組差異明顯(p0.05); EADEC組中Hyp、IL-6和TGF-β的含量好于其他兩組。結(jié)論：1.對(duì)小鼠局部創(chuàng)傷噴涂EADEC具有明顯的促創(chuàng)傷愈合作用,能夠促進(jìn)小鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間,減少損傷期炎癥的發(fā)生,進(jìn)而提高愈合質(zhì)量。2. EADEC促創(chuàng)傷愈合的機(jī)制主要通過(guò)加速Hyp、TGF-β的分泌,進(jìn)而提高膠原蛋白的合成,促進(jìn)毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞的增殖；并通過(guò)加速IL-6、血液中WBC、PLT、 Gran的生成,加速清除壞死組織及異物,提升機(jī)體免疫力,減輕機(jī)械性損傷的炎癥反應(yīng),降低感染幾率,加速創(chuàng)面愈合。
【關(guān)鍵詞】：蚯蚓抗損傷有效成分 創(chuàng)傷愈合 成纖維細(xì)胞 Hyp IL-6 TGF-β1
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S853.74
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-10
• 一、文獻(xiàn)綜述10-22
• 1.1 創(chuàng)傷愈合的研究進(jìn)展10-15
• 1.1.1 創(chuàng)傷愈合的基本過(guò)程10-11
• 1.1.1.1 炎癥反應(yīng)期11
• 1.1.1.2 增殖期11
• 1.1.1.3 成熟期11
• 1.1.2 創(chuàng)傷愈合的影響因素11-15
• 1.1.2.1 中性粒細(xì)胞12
• 1.1.2.2 巨噬細(xì)胞12-13
• 1.1.2.3 成纖維細(xì)胞13
• 1.1.2.4 血管內(nèi)皮細(xì)胞13
• 1.1.2.5 淋巴細(xì)胞13-14
• 1.1.2.6 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)14
• 1.1.2.7 血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)14
• 1.1.2.8 白細(xì)胞介素(IL)14-15
• 1.1.2.9 羥脯氨酸(Hyp)15
• 1.2 蚯蚓有效成分的研究進(jìn)展15-20
• 1.2.1 蚯蚓創(chuàng)傷愈合的有效成分及分離15-17
• 1.2.1.1 抗菌肽15-16
• 1.2.1.2 抗氧化系成分16-17
• 1.2.1.3 纖溶酶17
• 1.2.1.4 鎮(zhèn)痛有效成分17
• 1.2.2 蚯蚓提取物對(duì)創(chuàng)傷愈合的作用及機(jī)理17-19
• 1.2.2.1 止血及解熱鎮(zhèn)痛作用17-18
• 1.2.2.2 抗菌消炎及抗氧化作用18-19
• 1.2.2.3 促進(jìn)創(chuàng)傷愈合作用19
• 1.2.3 蚯蚓提取物對(duì)動(dòng)物創(chuàng)傷的臨床應(yīng)用19-20
• 1.3 研究目的及意義20-22
• 二、實(shí)驗(yàn)材料與研究方法22-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
• 2.1.1 蚯蚓22
• 2.1.2 小鼠22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料22-24
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器22-23
• 2.2.2 耗材、藥品、試劑23-24
• 2.2.3 試劑盒24
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法24-30
• 2.3.1 蚯蚓抗損傷有效成分的技術(shù)路線24-25
• 2.3.2 蚯蚓抗損傷有效成分的提取工藝25-26
• 2.3.2.1 蚯蚓粗樣品的制備25
• 2.3.2.2 硫酸銨鹽析、超濾25-26
• 2.3.3 蚯蚓抗損傷有效成分蛋白分子量測(cè)定及抑菌性實(shí)驗(yàn)26
• 2.3.3.1 蚯蚓抗損傷有效成分蛋白分子量測(cè)定26
• 2.3.3.2 蚯蚓抗損傷有效成分抑菌性實(shí)驗(yàn)26
• 2.3.4 蚯蚓抗損傷制劑的制備26-27
• 2.3.5 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)27-28
• 2.3.5.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組27
• 2.3.5.2 動(dòng)物機(jī)械性損傷模型的制作27-28
• 2.3.5.3 給藥方式28
• 2.3.6 實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法28-30
• 2.3.6.1 臨床觀察28
• 2.3.6.2 局部觀察28
• 2.3.6.3 組織學(xué)觀察28-29
• 2.3.6.4 相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)測(cè)定29-30
• 2.3.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)檢查30
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析30-44
• 3.1 蚯蚓抗損傷有效成分蛋白分子量及抑菌性測(cè)定30-32
• 3.1.1 蛋白分子量測(cè)定30-31
• 3.1.2 蚯蚓抗損傷制劑對(duì)常見(jiàn)細(xì)菌的抑菌性31-32
• 3.2 臨床觀察32-34
• 3.3 創(chuàng)面愈合率和愈合時(shí)間比較34-35
• 3.4 血液學(xué)測(cè)定結(jié)果35-36
• 3.5 組織病理學(xué)觀察36-39
• 3.6 ki-67蛋白在小鼠皮膚中免疫組化的表達(dá)39-42
• 3.7 血清相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果42-44
• 3.7.1 血清中羥脯氨酸含量的測(cè)定結(jié)果42-43
• 3.7.2 血清中IL-6含量的測(cè)定結(jié)果43
• 3.7.3 血清中TGF-β含量的測(cè)定結(jié)果43-44
• 四、討論44-50
• 4.1 蚯蚓抗損傷有效成分的分離工藝44-45
• 4.2 蚯蚓抗損傷有效成分制劑的篩選45-46
• 4.3 蚯蚓抗損傷有效成分促進(jìn)小鼠創(chuàng)傷愈合作用46-48
• 4.3.1 調(diào)節(jié)血細(xì)胞及毛細(xì)血管作用46-47
• 4.3.2 促進(jìn)創(chuàng)傷組織生長(zhǎng)47-48
• 4.3.3 調(diào)節(jié)羥脯氨酸(Hyp)含量的作用48
• 4.4 蚯蚓抗損傷有效成分對(duì)細(xì)胞因子的影響48-50
• 五、全文總結(jié)50-52
• 參考文獻(xiàn)52-59
• 中英文縮詞表59-60
• 致謝60-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)介61

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 劉瑞祥;;氦氖激光促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的療效觀察[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);1987年06期

3 王鈞昌;孫國(guó)斌;吳心華;;糖、蒜對(duì)創(chuàng)傷愈合的效果試驗(yàn)及其臨床應(yīng)用[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;1987年06期

4 魏鎖成;氦氖激光對(duì)綿羊創(chuàng)傷愈合效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;1990年01期

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7 張友思,陳季春,胡良彪;水牛創(chuàng)傷愈合特點(diǎn)的初步探討[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;1985年07期

8 張q，

本文編號(hào)：611365