本文關(guān)鍵詞：不同粗蛋白水平日糧對斷乳仔豬空腸上皮細(xì)胞的影響

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【摘要】：空腸上皮是空腸與外部環(huán)境直接接觸的選擇性屏障,在營養(yǎng)物質(zhì)吸收消化和抵御病菌等病原體的入侵方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。低蛋白平衡日糧能在不影響斷乳仔豬的生長性能的前提下改善腹瀉的發(fā)生率和嚴(yán)重程度,仔豬的腹瀉主要因?yàn)橐皇强漳c的發(fā)育尚未完善,而是日糧的蛋白質(zhì)的消化吸收不完全造成,且蛋白質(zhì)消化吸收的主要場所是空腸。然而,低蛋白日糧對斷乳仔豬的空腸上皮細(xì)胞的蛋白質(zhì)代謝的影響尚待研究。因此,本文以10kg的斷乳仔豬為研究對象,通過分級分離空腸隱窩-絨毛軸不同分化程度上皮細(xì)胞,結(jié)合氨基酸檢測、PCR等技術(shù)分析不同粗蛋白水平日糧對仔豬空腸隱窩-絨毛軸細(xì)胞的游離氨基酸、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體、mTOR信號通路和泛素-蛋白酶體降解通路的影響。本試驗(yàn)選擇10kg左右杜×長×大三元雜交仔豬54頭,隨機(jī)分為3組,每組18頭,單欄飼養(yǎng),每個重復(fù)1頭豬,預(yù)飼3d,試驗(yàn)期45d,日糧蛋白水平為14%、17%和20%,分別于第10d、第25d和第45d每組選6頭分離空腸隱窩-絨毛軸不同分化程度上皮細(xì)胞。結(jié)果表明：1)不同蛋白質(zhì)水平日糧對空腸不同分化程度細(xì)胞的游離氨基酸的含量均有不同的顯著影響。飼喂10d時,17%粗蛋白水平日糧顯著提高了F1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)；飼喂25d時,14%粗蛋白水平日糧顯著提高了F'1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)；而飼喂45d時,14%粗蛋白水平日糧顯著提高了F"1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)。2)不同蛋白質(zhì)水平日糧對斷乳仔豬不同時期的空腸不同分化程度細(xì)胞的影響均不一致,其中,飼喂不同粗蛋白水平日糧10d時,17%粗蛋白水平日糧顯著增加了F1和F2的中性氨基酸載體的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂25d時,14%粗蛋白水平日糧顯著增加了空腸中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體和堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時,14%粗蛋白水平日糧顯著增加了腸上皮細(xì)胞膜上的ATP酶的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。3)不同蛋白質(zhì)水平日糧對斷乳仔豬不同時期的空腸不同分化程度細(xì)胞的mTOR信號通路和泛素-蛋白酶體途徑的影響均不一致。mTOR信號通路,飼喂10d時,對空腸三個部位的細(xì)胞均無顯著差異(P0.05)；飼喂25d時,14%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛上的HIF1α和EIF-4E-BP1的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平顯著降低了隱窩細(xì)胞的HIF1α和p70S6K的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時,17%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛中端HIFlα的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。泛素-蛋白酶體途徑,飼喂10d時,對空腸三個部位的細(xì)胞均無顯著差異(P0.05)；飼喂25d時,14%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛頂端E1和E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平日糧顯著降低了隱窩細(xì)胞E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時,14%粗蛋白水平日糧顯著降低了絨毛頂端E2的mRNA的表達(dá)量而20%粗蛋白水平顯著降低了E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平日糧顯著降低了絨毛中端E1和E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。結(jié)論：在斷乳初期,應(yīng)適當(dāng)降低日糧中粗蛋白水平,讓仔豬更好的從哺乳期過渡到采食固體期,而在斷乳中期后期,可繼續(xù)降低日糧的粗蛋白水平,達(dá)到節(jié)省蛋白來源的原料,緩解蛋白原料的緊缺。
【關(guān)鍵詞】：粗蛋白 斷乳仔豬 絨毛-隱窩軸 蛋白質(zhì)代謝
【學(xué)位授予單位】：江西科技師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S828.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 引言12-13
• 第1章 文獻(xiàn)綜述13-20
• 1.1 低蛋白日糧的出現(xiàn)及發(fā)展13-14
• 1.1.1 理想蛋白日糧的提出與發(fā)展13
• 1.1.2 低蛋白平衡日糧的提出及發(fā)展13-14
• 1.2 腸道隱窩-絨毛軸細(xì)胞14-15
• 1.2.1 隱窩-絨毛軸細(xì)胞14
• 1.2.2 隱窩-絨毛細(xì)胞分離的方法14-15
• 1.3 低蛋白日糧與仔豬腸道15-16
• 1.3.1 對斷乳仔豬腸道的發(fā)育的影響15-16
• 1.3.2 對斷乳仔豬腸道氮代謝的影響16
• 1.3.3 對斷乳仔豬的屏障功能的影響16
• 1.4 低蛋白平衡日糧對仔豬腸道發(fā)育的作用機(jī)制16-18
• 1.4.1 促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成16-17
• 1.4.2 激活信號通路17
• 1.4.3 對細(xì)胞凋亡和自噬的作用17-18
• 1.5 腸道與蛋白質(zhì)代謝吸收18-19
• 1.6 試驗(yàn)?zāi)康募皟?nèi)容19-20
• 1.6.1 試驗(yàn)?zāi)康?/span>19
• 1.6.2 試驗(yàn)內(nèi)容19-20
• 第2章 不同粗蛋白水平日糧對仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響20-38
• 2.1 前言20
• 2.2 材料與方法20-22
• 2.2.1 試驗(yàn)動物及日糧20
• 2.2.2 動物飼喂管理20-22
• 2.2.3 樣品采集22
• 2.2.4 檢測指標(biāo)22
• 2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析22-23
• 2.4 結(jié)果23-35
• 2.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響23-27
• 2.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響27-31
• 2.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響31-35
• 2.5 討論35-37
• 2.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響35-36
• 2.5.2 飼喂不同粗蛋水平白日糧25d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響36
• 2.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響36-37
• 2.6 小結(jié)37-38
• 第3章 不同粗蛋白水平日糧對斷乳仔豬絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響38-53
• 3.1 引言38-39
• 3.2 材料與方法39-43
• 3.2.1 試驗(yàn)動物與日糧39
• 3.2.2 飼養(yǎng)管理39
• 3.2.3 樣品采集39
• 3.2.4 指標(biāo)的測定39-43
• 3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析43
• 3.4 結(jié)果與分析43-49
• 3.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體系統(tǒng)的影響43-45
• 3.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的影響45-47
• 3.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的影響47-49
• 3.5 討論49-52
• 3.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響49-50
• 3.5.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響50-51
• 3.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響51-52
• 3.6 小結(jié)52-53
• 第4章 不同粗蛋白水平日糧對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞MTOR信號通路和依賴泛素蛋白質(zhì)降解通路的影響53-68
• 4.1 前言53-54
• 4.2 材料與方法54-57
• 4.2.1 試驗(yàn)動物與日糧54
• 4.2.2 飼養(yǎng)管理54
• 4.2.3 樣品采集54
• 4.2.4 指標(biāo)的測定54-57
• 4.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析57
• 4.4 結(jié)果與分析57-64
• 4.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響57-59
• 4.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mmTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響59-62
• 4.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mmTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響62-64
• 4.5 討論64-67
• 4.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響64-65
• 4.5.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響65-66
• 4.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響66-67
• 4.6 小結(jié)67-68
• 第5章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)68-69
• 5.1 結(jié)論68
• 5.2 創(chuàng)新點(diǎn)68-69
• 參考文獻(xiàn)69-80
• 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果80-81
• 致謝81

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