本文關(guān)鍵詞：不同粗蛋白水平日糧對(duì)斷乳仔豬空腸上皮細(xì)胞的影響

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【摘要】：空腸上皮是空腸與外部環(huán)境直接接觸的選擇性屏障,在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收消化和抵御病菌等病原體的入侵方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。低蛋白平衡日糧能在不影響斷乳仔豬的生長(zhǎng)性能的前提下改善腹瀉的發(fā)生率和嚴(yán)重程度,仔豬的腹瀉主要因?yàn)橐皇强漳c的發(fā)育尚未完善,而是日糧的蛋白質(zhì)的消化吸收不完全造成,且蛋白質(zhì)消化吸收的主要場(chǎng)所是空腸。然而,低蛋白日糧對(duì)斷乳仔豬的空腸上皮細(xì)胞的蛋白質(zhì)代謝的影響尚待研究。因此,本文以10kg的斷乳仔豬為研究對(duì)象,通過分級(jí)分離空腸隱窩-絨毛軸不同分化程度上皮細(xì)胞,結(jié)合氨基酸檢測(cè)、PCR等技術(shù)分析不同粗蛋白水平日糧對(duì)仔豬空腸隱窩-絨毛軸細(xì)胞的游離氨基酸、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體、mTOR信號(hào)通路和泛素-蛋白酶體降解通路的影響。本試驗(yàn)選擇10kg左右杜×長(zhǎng)×大三元雜交仔豬54頭,隨機(jī)分為3組,每組18頭,單欄飼養(yǎng),每個(gè)重復(fù)1頭豬,預(yù)飼3d,試驗(yàn)期45d,日糧蛋白水平為14%、17%和20%,分別于第10d、第25d和第45d每組選6頭分離空腸隱窩-絨毛軸不同分化程度上皮細(xì)胞。結(jié)果表明：1)不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)空腸不同分化程度細(xì)胞的游離氨基酸的含量均有不同的顯著影響。飼喂10d時(shí),17%粗蛋白水平日糧顯著提高了F1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)；飼喂25d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著提高了F'1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)；而飼喂45d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著提高了F"1的各種類型的游離氨基酸的含量(P0.05)。2)不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)斷乳仔豬不同時(shí)期的空腸不同分化程度細(xì)胞的影響均不一致,其中,飼喂不同粗蛋白水平日糧10d時(shí),17%粗蛋白水平日糧顯著增加了F1和F2的中性氨基酸載體的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂25d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著增加了空腸中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體和堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著增加了腸上皮細(xì)胞膜上的ATP酶的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。3)不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)斷乳仔豬不同時(shí)期的空腸不同分化程度細(xì)胞的mTOR信號(hào)通路和泛素-蛋白酶體途徑的影響均不一致。mTOR信號(hào)通路,飼喂10d時(shí),對(duì)空腸三個(gè)部位的細(xì)胞均無顯著差異(P0.05)；飼喂25d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛上的HIF1α和EIF-4E-BP1的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平顯著降低了隱窩細(xì)胞的HIF1α和p70S6K的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時(shí),17%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛中端HIFlα的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。泛素-蛋白酶體途徑,飼喂10d時(shí),對(duì)空腸三個(gè)部位的細(xì)胞均無顯著差異(P0.05)；飼喂25d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著提高了絨毛頂端E1和E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平日糧顯著降低了隱窩細(xì)胞E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05)；飼喂45d時(shí),14%粗蛋白水平日糧顯著降低了絨毛頂端E2的mRNA的表達(dá)量而20%粗蛋白水平顯著降低了E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05),17%粗蛋白水平日糧顯著降低了絨毛中端E1和E2的mRNA的表達(dá)量(P0.05)。結(jié)論：在斷乳初期,應(yīng)適當(dāng)降低日糧中粗蛋白水平,讓仔豬更好的從哺乳期過渡到采食固體期,而在斷乳中期后期,可繼續(xù)降低日糧的粗蛋白水平,達(dá)到節(jié)省蛋白來源的原料,緩解蛋白原料的緊缺。
【關(guān)鍵詞】：粗蛋白 斷乳仔豬 絨毛-隱窩軸 蛋白質(zhì)代謝
【學(xué)位授予單位】：江西科技師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S828.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 引言12-13
• 第1章 文獻(xiàn)綜述13-20
• 1.1 低蛋白日糧的出現(xiàn)及發(fā)展13-14
• 1.1.1 理想蛋白日糧的提出與發(fā)展13
• 1.1.2 低蛋白平衡日糧的提出及發(fā)展13-14
• 1.2 腸道隱窩-絨毛軸細(xì)胞14-15
• 1.2.1 隱窩-絨毛軸細(xì)胞14
• 1.2.2 隱窩-絨毛細(xì)胞分離的方法14-15
• 1.3 低蛋白日糧與仔豬腸道15-16
• 1.3.1 對(duì)斷乳仔豬腸道的發(fā)育的影響15-16
• 1.3.2 對(duì)斷乳仔豬腸道氮代謝的影響16
• 1.3.3 對(duì)斷乳仔豬的屏障功能的影響16
• 1.4 低蛋白平衡日糧對(duì)仔豬腸道發(fā)育的作用機(jī)制16-18
• 1.4.1 促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成16-17
• 1.4.2 激活信號(hào)通路17
• 1.4.3 對(duì)細(xì)胞凋亡和自噬的作用17-18
• 1.5 腸道與蛋白質(zhì)代謝吸收18-19
• 1.6 試驗(yàn)?zāi)康募皟?nèi)容19-20
• 1.6.1 試驗(yàn)?zāi)康?/span>19
• 1.6.2 試驗(yàn)內(nèi)容19-20
• 第2章 不同粗蛋白水平日糧對(duì)仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響20-38
• 2.1 前言20
• 2.2 材料與方法20-22
• 2.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧20
• 2.2.2 動(dòng)物飼喂管理20-22
• 2.2.3 樣品采集22
• 2.2.4 檢測(cè)指標(biāo)22
• 2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析22-23
• 2.4 結(jié)果23-35
• 2.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響23-27
• 2.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸的影響27-31
• 2.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響31-35
• 2.5 討論35-37
• 2.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響35-36
• 2.5.2 飼喂不同粗蛋水平白日糧25d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響36
• 2.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的游離氨基酸譜的影響36-37
• 2.6 小結(jié)37-38
• 第3章 不同粗蛋白水平日糧對(duì)斷乳仔豬絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響38-53
• 3.1 引言38-39
• 3.2 材料與方法39-43
• 3.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧39
• 3.2.2 飼養(yǎng)管理39
• 3.2.3 樣品采集39
• 3.2.4 指標(biāo)的測(cè)定39-43
• 3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析43
• 3.4 結(jié)果與分析43-49
• 3.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體系統(tǒng)的影響43-45
• 3.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的影響45-47
• 3.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的影響47-49
• 3.5 討論49-52
• 3.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響49-50
• 3.5.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響50-51
• 3.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的小肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的影響51-52
• 3.6 小結(jié)52-53
• 第4章 不同粗蛋白水平日糧對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞MTOR信號(hào)通路和依賴泛素蛋白質(zhì)降解通路的影響53-68
• 4.1 前言53-54
• 4.2 材料與方法54-57
• 4.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧54
• 4.2.2 飼養(yǎng)管理54
• 4.2.3 樣品采集54
• 4.2.4 指標(biāo)的測(cè)定54-57
• 4.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析57
• 4.4 結(jié)果與分析57-64
• 4.4.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響57-59
• 4.4.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mmTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響59-62
• 4.4.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mmTOR和泛素-蛋白質(zhì)降解途徑的影響62-64
• 4.5 討論64-67
• 4.5.1 飼喂不同粗蛋白水平日糧10d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響64-65
• 4.5.2 飼喂不同粗蛋白水平日糧25d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響65-66
• 4.5.3 飼喂不同粗蛋白水平日糧45d對(duì)斷乳仔豬的空腸絨毛-隱窩軸細(xì)胞的mTOR和泛素-蛋白降解途徑的影響66-67
• 4.6 小結(jié)67-68
• 第5章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)68-69
• 5.1 結(jié)論68
• 5.2 創(chuàng)新點(diǎn)68-69
• 參考文獻(xiàn)69-80
• 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果80-81
• 致謝81

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