本文關(guān)鍵詞：沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧磺隆的適應(yīng)機制

  更多相關(guān)文章： 沼澤紅假單胞菌PSB-S 吡嘧磺隆 適應(yīng)機制 蛋白組

【摘要】：吡嘧磺隆(pyrazosulfuron-ethyl)屬于磺酰脲類除草劑,主要適用作物為水稻。隨著吡嘧磺隆的廣泛大量應(yīng)用,其對后茬作物以及環(huán)境的不良影響已經(jīng)成為日益關(guān)注的問題,迫切需要開展去除磺酰脲類除草劑污染機理方面的研究。本文通過蛋白組學方法等研究沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧磺隆的適應(yīng)機制,主要結(jié)果如下：通過相對抗性定量方法,篩選出對吡嘧磺隆相對最高抗性的菌株沼澤紅假單胞菌Rhodopseudomonas palustris PSB-S,并以此為后續(xù)實驗材料。通過比較蛋白組學研究沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧磺隆的適應(yīng)機制。通過雙向凝膠電泳檢測毗嘧磺隆處理后差異表達顯著的蛋白,并對其進行質(zhì)譜鑒定,成功鑒定出56個差異表達的蛋白；對差異表達的蛋白進行生物學功能及生物學代謝途徑分析,發(fā)現(xiàn)主要有轉(zhuǎn)運蛋白、膜蛋白、受體蛋白等發(fā)生變化,主要有參與蛋白質(zhì)合成、折疊、穩(wěn)定的蛋白表達出現(xiàn)上調(diào),與能量相關(guān)的蛋白表達下調(diào)。通過相對熒光定量PCR研究差異表達蛋白對應(yīng)基因的相對表達情況,結(jié)果表明各基因的mRNA表達水平與對應(yīng)蛋白的表達水平相一致。通過掃描電鏡及透射電鏡研究吡嘧磺隆對沼澤紅假單胞菌PSB-S菌體細胞形態(tài)的影響,結(jié)果從細胞學方面驗證了與蛋白組學研究結(jié)果。綜上所述,本文首次從蛋白水平研究沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧隆的適應(yīng)機制,為創(chuàng)制抗吡嘧磺隆的作物提供了新的基因資源,為吡嘧磺隆污染的生物修復提供了新資源。
【關(guān)鍵詞】：沼澤紅假單胞菌PSB-S 吡嘧磺隆 適應(yīng)機制 蛋白組
【學位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：X592;X172
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 文獻綜述10-24
• 1.1 磺酰脲類除草劑簡介10-13
• 1.1.1 磺酰脲類除草劑的發(fā)展10-11
• 1.1.2 磺酰脲類除草劑的作用機理11-12
• 1.1.3 吡嘧磺隆簡介12-13
• 1.2 磺酰脲類除草劑使用引起的環(huán)境問題13-15
• 1.2.1 磺酰脲類除草劑對農(nóng)作物的危害13
• 1.2.2 磺酰脲類除草劑對環(huán)境的污染13-14
• 1.2.3 磺酰脲類除草劑對非靶標生物的影響14-15
• 1.2.4 磺酰脲類除草劑對人類的危害15
• 1.3 磺酰脲類除草劑在環(huán)境中的降解15-16
• 1.3.1 磺酰脲類除草劑的水溶性光解15
• 1.3.2 磺酰脲類除草劑的化學水解15-16
• 1.3.3 磺酰脲類除草劑微生物的降解16
• 1.4 微生物降解磺酰脲類除草劑的研究進展16-18
• 1.4.1 微生物降解的優(yōu)勢16
• 1.4.2 微生物降解磺酰脲類除草劑的作用機理16-17
• 1.4.3 影響微生物降解酰脲類除草劑的因素17
• 1.4.4 環(huán)境中降解磺酰脲類除草劑的微生物17-18
• 1.5 光合細菌在農(nóng)藥殘留降解中的應(yīng)用18-20
• 1.6 農(nóng)藥抗性的研究進展20-23
• 1.6.1 雜草抗性及其篩選方法20
• 1.6.2 農(nóng)藥抗性微生物的篩選研究及其方法20-22
• 1.6.3 微生物對磺酰脲類除草劑的抗性機理22
• 1.6.4 目前抗性機理研究的方法22-23
• 1.7 實驗目的與意義23-24
• 第二章 抗性菌株篩選24-31
• 2.1 實驗材料24-25
• 2.1.1 主要試劑24
• 2.1.2 主要儀器24
• 2.1.3 主要培養(yǎng)基24-25
• 2.2 實驗方法25-26
• 2.2.1 菌株的選取及活化25
• 2.2.2 菌株的馴化25
• 2.2.3 菌株的抗性測定25-26
• 2.2.4 菌株的抗性倍數(shù)評價26
• 2.3 實驗結(jié)果26-29
• 2.3.1 馴化結(jié)果26-27
• 2.3.2 抗性倍數(shù)評價結(jié)果27-29
• 2.3.3 抗性倍數(shù)與馴化濃度之間的關(guān)系29
• 2.4 小結(jié)與討論29-31
• 第三章 蛋白組學方法研究沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧磺隆的適應(yīng)機制31-53
• 3.1 實驗材料31-32
• 3.1.1 實驗材料與試劑31
• 3.1.2 實驗儀器31-32
• 3.1.3 實驗主要培養(yǎng)基32
• 3.2 實驗方法32-36
• 3.2.1 樣品的準備32
• 3.2.2 蛋白提取和定量32-33
• 3.2.3 2D-DIGE雙向凝膠電泳及圖像分析33-35
• 3.2.4 MALDI-TOF-MS質(zhì)譜法鑒定差異表達蛋白35-36
• 3.2.5 差異表達蛋白的GO富集和KEGG分析36
• 3.3 實驗結(jié)果與分析36-44
• 3.3.1 吡嘧磺隆處理對沼澤紅假單胞菌PSB-S生長的影響36
• 3.3.2 2-DE雙向凝膠電泳結(jié)果分析36-37
• 3.3.3 MALDI-TOF-MS鑒定結(jié)果分析37-43
• 3.3.4 差異表達蛋白的GO富集分析43-44
• 3.4 討論與總結(jié)44-53
• 第四章 差異表達蛋白對應(yīng)基因的相對表達情況53-63
• 4.1 實驗材料53-54
• 4.1.1 實驗材料53
• 4.1.2 實驗試劑53
• 4.1.3 實驗儀器53-54
• 4.2 實驗方法54-58
• 4.2.1 蛋白對應(yīng)基因序列查找54
• 4.2.2 看家基因54
• 4.2.3 引物設(shè)計54
• 4.2.4 總DNA抽提54-55
• 4.2.5 PCR擴增55-56
• 4.2.6 總RNA抽提56-57
• 4.2.7 總RNA濃度的測定57
• 4.2.8 cDNA合成57-58
• 4.2.9 qPCR58
• 4.3 實驗結(jié)果58-62
• 4.3.1 引物篩選58-60
• 4.3.2 總RNA抽提質(zhì)量60
• 4.3.3 RNA濃度測定結(jié)果60-61
• 4.3.4 qPCR結(jié)果61-62
• 4.4 小結(jié)與討論62-63
• 第五章 吡嘧磺隆對PSB-S菌體細胞形態(tài)的影響63-68
• 5.1 實驗材料63
• 5.1.1 實驗材料63
• 5.1.2 實驗試劑63
• 5.1.3 實驗儀器63
• 5.2 實驗方法63-65
• 5.2.1 PSB-S菌株的掃描電鏡觀察63-64
• 5.2.2 PSB-S菌株的透射電鏡觀察64-65
• 5.3 實驗結(jié)果65-67
• 5.3.1 掃描電鏡觀察結(jié)果65-66
• 5.3.2 透射電鏡觀察結(jié)果66-67
• 5.4 小結(jié)與討論67-68
• 參考文獻68-76
• 附錄1 論文所用重要縮寫詞及中文全稱76-77
• 附錄2 常用緩沖液及培養(yǎng)基配方77-78
• 附錄3 常用生化試劑及儀器78-80
• 致謝80-82
• 作者簡介82-83
• 發(fā)表論文附錄83

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王寶玉,許景哲,姜日善;吡嘧磺隆的合成[J];延邊大學學報(自然科學版);2002年03期

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 于丹;稻田吡嘧磺隆用藥量不宜過大[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2009年

2 于丹;部分晚粳稻品種對吡嘧磺隆敏感[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2007年

3 江軍;晚稻芽期別用吡嘧磺隆[N];農(nóng)資導報;2014年

4 譚立云;氯吡嘧磺隆可除番茄田闊葉草[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2013年

5 方圓;油菜田誤用吡嘧磺隆沒法救[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王彥輝;吡嘧磺隆在湖南稻煙輪作區(qū)土壤體系行為研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2012年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 杜嬌;沼澤紅假單胞菌PSB-S對吡嘧磺隆的適應(yīng)機制[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 謝娜;氯吡嘧磺隆在玉米田的應(yīng)用研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2012年

3 張鐸;氯吡嘧磺隆的水解與光解特性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2014年

4 鄧源;吡嘧磺隆在稻田中的殘留消解動態(tài)及其水解研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2014年

5 敦亞楠;吡嘧磺隆和五氟磺草胺在水稻樣品中的貯存穩(wěn)定性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2015年

6 曹q;東北稻田藍藻群落結(jié)構(gòu)的時空變化及其對吡嘧磺隆的響應(yīng)[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學;2015年

7 易麗君;吡嘧磺隆和苯噻酰草胺在“煙—稻”系統(tǒng)中的行為與效應(yīng)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2012年

8 張杰;吡嘧磺隆在水稻植株、土壤、水中的殘留分析方法及消解動態(tài)研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2014年

9 張振興;水直播稻田除草劑配方及54%殺草丹·吡嘧磺隆油懸浮劑的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2011年

，

本文編號：568418