本文關(guān)鍵詞：Bt蛋白在褐飛虱體內(nèi)的分布及對體內(nèi)相關(guān)酶活性的影響

  更多相關(guān)文章： 褐飛虱 CrylAb蛋白 SOD酶 AchE酶 GSH酶 CAT酶 POD酶 FE酶 CES酶 酶活性

【摘要】：本研究通過對Bt蛋白脅迫下褐飛虱(Brownriceplanthopper)體內(nèi)相關(guān)酶,如超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH)、過氧化氫酶(CAT)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、FE酯酶、羧酸酯酶(CES)活性及不同部位酶活變化的研究和探討,為Bt水稻對非靶標(biāo)生物的安全性評價提供依據(jù)；利用室內(nèi)建立以轉(zhuǎn)CrylAb基因水稻(汕優(yōu)63)飼養(yǎng)褐飛虱,不同時間段取樣測定其體內(nèi)各個部位酶活力及酶總活力,通過酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測轉(zhuǎn)CrylAb基因水稻飼養(yǎng)的褐飛虱,利用差速離心法獲取褐飛虱的各個細(xì)胞結(jié)構(gòu),運(yùn)用分光光度計法和酶標(biāo)儀法對褐飛虱體內(nèi)及細(xì)胞碎片、線粒體及亞細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)的酶活力情況進(jìn)行檢測。結(jié)果表明：1.室內(nèi)種植的轉(zhuǎn)CrylAb基因水稻(汕優(yōu)63)中,通過CrylAb蛋白檢測試劑盒檢測,含有CrylAb蛋白12.8385 ng/L2.取食轉(zhuǎn)CrylAb基因水稻后,褐飛虱體內(nèi)CrylAb蛋白在細(xì)胞碎片、線粒體和亞細(xì)胞器中內(nèi)均有分布,不同細(xì)胞部位,Bt蛋白的含量：亞細(xì)胞器線粒體細(xì)胞碎片,且1d-15d內(nèi)褐飛虱體內(nèi)中3個部位都能檢測到CrylAb蛋白。3.在CrylAb蛋白脅迫下,褐飛虱體內(nèi),0d-15d中,褐飛虱體內(nèi)總CAT酶活性先降低,后增加,10d降到最低值,15d又出現(xiàn)快速增加恢復(fù)；GST酶活性,也是先降低,后逐漸增加,進(jìn)食第5d降到最低值,之后一直增大；POD酶活性則是先增加,后降低,隨著取食時間的延長恢復(fù)到飼養(yǎng)Bt水稻前的酶活性水平；褐飛虱體內(nèi)SOD酶活性,則隨取食時間的延長,褐飛虱體內(nèi)的SOD酶活性略有增加；褐飛虱體內(nèi)酯酶總活性,隨取食時間的變化,CES酶活性逐漸降低,AchE酶活性先增加,后降低,恢復(fù)到未飼養(yǎng)Bt蛋白水稻前的酶總活力水平,然而FE酶活性,隨取食時間的延長,褐飛虱體內(nèi)的FE酶活性一直降低。4.綜合分析在取食CrylAb蛋白水稻后,褐飛虱體內(nèi)及不同部位的POD、GST、CAT、 SOD、CES、AchE、FE等酶活性變化,在受到外來蛋白(或活性物質(zhì))刺激作用下,會出現(xiàn)一個相應(yīng)的生化反應(yīng)的過程,造成不同功能酶的活性變化,甚至與對照組相比有顯著性差異變化。但隨著取食時間的延長,這種酶活性的變化又逐漸恢復(fù)到初始水平。其原因可能是生物自身免疫系統(tǒng)對外來物做出的一種自我保護(hù)的生理反應(yīng)；也可能是CrylAb蛋白隨著食物鏈進(jìn)入生物體后,對生物活體某些機(jī)能有一定的毒性作用,造成生物體做出應(yīng)激性的生理保護(hù)反應(yīng),來中和或減緩其對機(jī)體的毒害作用。
【關(guān)鍵詞】：褐飛虱 CrylAb蛋白 SOD酶 AchE酶 GSH酶 CAT酶 POD酶 FE酶 CES酶 酶活性
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S435.112.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述11-18
• 1.1 BT、BT蛋白的簡介及應(yīng)用11
• 1.2 轉(zhuǎn)基因的研究現(xiàn)狀11-16
• 1.2.1 轉(zhuǎn)基因技術(shù)的概念及技術(shù)11-12
• 1.2.2 轉(zhuǎn)基因作物的研究12-15
• 1.2.3 轉(zhuǎn)基因動物的研究15-16
• 1.3 轉(zhuǎn)BT基因?qū)Π袠?biāo)生物的研究16
• 1.4 BT基因?qū)Ψ前袠?biāo)生物的研究16-17
• 1.5 轉(zhuǎn)BT基因的安全性評價的現(xiàn)狀17-18
• 第二部分 CRY1AB蛋白在褐飛虱體內(nèi)隨時間的傳遞情況及其在體內(nèi)各分區(qū)的分布18-26
• 2.1 實驗材料19-20
• 2.1.1 供試水稻19
• 2.1.2 蟲源及處理19
• 2.1.3 供試水稻處理、及褐飛虱試驗處理流程19-20
• 2.2 主要試劑和儀器20
• 2.3 實驗方法20-21
• 2.3.1 水稻中Bt蛋白含量的測定20
• 2.3.2 褐飛虱體內(nèi)可溶性總蛋白測定方法20
• 2.3.3 褐飛虱體內(nèi)Bt蛋白含量的測定方法20-21
• 2.3.4 數(shù)據(jù)分析21
• 2.4 結(jié)果與分析21-24
• 2.4.1 水稻中Cry1Ab蛋白含量測定結(jié)果21
• 2.4.2 褐飛虱不同部位Cry1Ab蛋白含量、可溶性總蛋白含量及不同部位Cry1Ab蛋白含量/可溶性蛋白結(jié)果21-23
• 2.4.3 不同飼養(yǎng)時間褐飛虱體內(nèi)Cry1Ab蛋白總含量變化結(jié)果23-24
• 2.5 結(jié)果討論24-25
• 2.6 結(jié)論25-26
• 第三部分 取食BT水稻對褐飛虱體內(nèi)各種酶活性影響26-39
• 3.1 實驗材料27
• 3.1.1 供試水稻27
• 3.1.2 供試褐飛虱飼養(yǎng)及樣品處理方法27
• 3.2 主要試劑和儀器27-28
• 3.3 實驗方法28-29
• 3.3.1 褐飛虱體內(nèi)CES酶活力的測定方法28
• 3.3.2 褐飛虱體內(nèi)POD酶活力的測定方法28
• 3.3.3 褐飛虱體內(nèi)GST酶活力的測定方法28
• 3.3.4 褐飛虱體內(nèi)SOD酶活力的測定方法28
• 3.3.5 褐飛虱體內(nèi)AchE酶活力的測定方法28-29
• 3.3.6 褐飛虱體內(nèi)CAT酶活力的測定方法29
• 3.3.7 褐飛虱體內(nèi)FE酶活力的測定方法29
• 3.3.8 數(shù)據(jù)分析29
• 3.4 結(jié)果與分析29-35
• 3.4.1 褐飛虱體內(nèi)CES酶活力的分布情況29-30
• 3.4.2 褐飛虱體內(nèi)POD酶活力的分布情況30-31
• 3.4.3 褐飛虱體內(nèi)GST酶活力的分布情況31-32
• 3.4.4 褐飛虱體內(nèi)SOD酶活力的分布情況32-33
• 3.4.5 褐飛虱體內(nèi)AchE酶活力的分布情況33-34
• 3.4.6 褐飛虱體內(nèi)CAT酶活力的分布情況34
• 3.4.7 褐飛虱體內(nèi)FE酶活力的分布情況34-35
• 3.5 褐飛虱體內(nèi)總酶活性的測定結(jié)果35
• 3.6 討論35-38
• 3.6.1 褐飛虱取食含Cry1Ab蛋白水稻對酯酶活性的影響35-36
• 3.6.2 褐飛虱取食含Cry1Ab蛋白水稻對氧化還原性酶活性的影響36
• 3.6.3 取食含Bt蛋白水稻后褐飛虱體內(nèi)及各部位之間的酯酶和氧化還原酶的影響36-38
• 3.7 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

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本文編號：529653