發(fā)布時(shí)間：2017-06-25 19:10

  本文關(guān)鍵詞：飼料中谷氨酰胺和核苷酸對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)、消化酶活力、抗氧化酶活力及基因表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：以35日齡半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)稚魚(yú)為研究對(duì)象,共設(shè)計(jì)4種谷氨酰胺添加量分別為0.0%、0.5%、1.0%和2.0%的等氮等脂微顆粒飼料(游離谷氨酰胺實(shí)測(cè)值分別為0.03%、0.46%、0.91%、1.73%),6種核苷酸混合物(Sigma:IMP:AMP:GMP:UMP:CMP=1:1:1:1:1)添加量分別為0.000%、0.018%、0.036%、0.054%、0.072%和0.090%的等氮等脂微顆粒飼料,每天飽食投喂5次,在流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行為期30 d的攝食生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),探究飼料中谷氨酰胺和核苷酸水平對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)性能、消化酶活力、抗氧化能力的影響,并從分子水平上研究谷氨酰胺和核苷酸的作用機(jī)制,主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：1.谷氨酰胺對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)、消化酶活力和IGF-1mRNA表達(dá)的影響。研究結(jié)果表明,飼料中添加0.5%-2.0%谷氨酰胺時(shí),半滑舌鰨稚魚(yú)存活率、終末體長(zhǎng)、終末體重和特定生長(zhǎng)率顯著高于未添加組(P0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量增加,腸段胰蛋白酶活力先顯著上升,隨后顯著下降(P0.05),但胰段胰蛋白酶活力在各處理組間差異不顯著(P0.05)。腸段和胰段淀粉酶活力在2.0%谷氨酰胺添加組顯著高于未添加組(P0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量升高,舌鰨稚魚(yú)腸道刷狀緣中堿性磷酸酶和亮氨酸氨基肽酶活力呈現(xiàn)先顯著上升隨后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(shì)(P0.05)。隨著飼料中谷氨酰胺添加量增加,舌鰨稚魚(yú)內(nèi)臟團(tuán)IGF-1mRNA表達(dá)量顯著上升,2.0%添加組表達(dá)量最高,顯著高于未添加組(P0.05)。綜上所述,飼料中添加谷氨酰胺能夠顯著提高舌鰨稚魚(yú)存活率和生長(zhǎng)性能,增強(qiáng)消化酶活力,激活內(nèi)臟團(tuán)中促進(jìn)生長(zhǎng)關(guān)鍵基因IGF-1mRNA表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)中,以SGR進(jìn)行分析,半滑舌鰨稚魚(yú)對(duì)飼料中游離谷氨酰胺最適需求量為0.63%。2.谷氨酰胺對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)抗氧化能力和抗應(yīng)激能力的影響。研究結(jié)果表明,飼料中添加2.0%谷氨酰胺時(shí)半滑舌鰨稚魚(yú)全魚(yú)丙二醛(MDA)含量顯著低于未添加組(P0.05)。半滑舌鰨稚魚(yú)全魚(yú)超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)在各處理組之間差異不顯著(P0.05)。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)活力在0.5%處理組最高,顯著高于2.0%添加組(p0.05)。隨著谷氨酰胺添加量增加,舌鰨內(nèi)臟團(tuán)中SOD和GPX mRNA表達(dá)量先顯著上升(P0.05),隨后當(dāng)添加量繼續(xù)增加時(shí)表達(dá)量下降,而CAT表達(dá)量變化趨勢(shì)和SOD與GPX表達(dá)量變化趨勢(shì)相反。當(dāng)飼料中谷氨酰胺添加量為0.5%-1.0%時(shí),半滑舌鰨稚魚(yú)半致死溶氧濃度顯著低于未添加組和2.0%添加組(P0.05)。應(yīng)激后舌鰨稚魚(yú)內(nèi)臟團(tuán)熱休克蛋白70 (HSP70) mRNA表達(dá)量急劇增加,0.5%和2.0%組HSP70 mRNA表達(dá)量顯著高于未添加組(P0.05)。綜上所述,飼料中添加谷氨酰胺能夠調(diào)控舌鰨稚魚(yú)關(guān)鍵抗氧化酶活力和mRNA表達(dá)量,降低魚(yú)體MDA水平,增強(qiáng)舌鰨稚魚(yú)抗低氧應(yīng)激能力。3.核苷酸對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)和消化酶活力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著飼料中核苷酸添加量從0.000%上升到0.018%,舌鰨稚魚(yú)存活率顯著上升,當(dāng)添加量超過(guò)0.018%后存活率顯著下降(P0.05)。不同核苷酸添加水平顯著影響了舌鰨稚魚(yú)的生長(zhǎng),添加水平為0.018%-0.054%時(shí)舌鰨稚魚(yú)終末體長(zhǎng)、終末體重和特定生長(zhǎng)率顯著高于未添加組(p0.05)。隨著飼料中核苷酸添加量增加,胰段和腸段胰蛋白酶活力、腸段淀粉酶活力先顯著上升,在0.036%添加組達(dá)到最大值,隨后顯著下降(P0.05),胰段淀粉酶活力變化趨勢(shì)相似,但在0.054%添加組達(dá)到最大值。飼料中添加核苷酸顯著提高了舌鰨稚魚(yú)腸道刷狀緣中堿性磷酸酶和亮氨酸氨基肽酶活力,各添加組之間差異不顯著(P0.05)。綜上所述,飼料中添加核苷酸能夠顯著提高舌鰨稚魚(yú)存活率和生長(zhǎng)性能,增強(qiáng)消化酶活力。以SGR為評(píng)價(jià)指標(biāo),本實(shí)驗(yàn)中半滑舌鰨稚魚(yú)核苷酸最適宜添加量為0.018%。4.核苷酸對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)非特異性免疫相關(guān)酶活力、抗氧化能力和抗低氧應(yīng)激能力的影響。研究結(jié)果表明,飼料中核苷酸添加量為0.018%、0.036%和0.072%時(shí),半滑舌鰨稚魚(yú)全魚(yú)MDA含量顯著低于未添加組和0.090%添加組(P0.05)。飼料中添加0.018%核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)全魚(yú)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活力具有定的提升作用,顯著高于0.0.72%添加組。飼料中不同核苷酸添加水平對(duì)溶菌酶(LZM)活力的影響不顯著(P0.05)。隨著飼料中核苷酸含量增加,舌鰨稚魚(yú)全魚(yú)SOD活力先上升隨后下降,0.018-0.054%添加組SOD活力顯著高于其他處理組。除0.036%添加組CAT活力顯著低于未添加組外,其余各組CAT活力無(wú)顯著差異。0.018%組SODmRNA表達(dá)量顯著高于未添加組(P0.05),其余各組無(wú)顯著差異。核苷酸添加量為0.018-0.036%時(shí),GPX表達(dá)量顯著低于未添加組(P0.05),而0.018%、0.054%、0.072%和0.090%組CATmRNA表達(dá)量均顯著低于未添加組(P0.05)。飼料中核苷酸添加量為0.018%時(shí),舌鰨稚魚(yú)半致死溶氧濃度顯著低于未添加組和0.090%添加組(P0.05),同時(shí),添加核苷酸能夠顯著增加低氧應(yīng)激后舌鰨稚魚(yú)內(nèi)臟團(tuán)HSP70 mRNA表達(dá)量(P0.05)。綜上所述,飼料中添加核苷酸能夠提高舌鰨稚魚(yú)非特異性免疫力和抗氧化能力,降低魚(yú)體MDA水平,增強(qiáng)舌鰨稚魚(yú)抗低氧應(yīng)激能力。
【關(guān)鍵詞】：半滑舌鰨 谷氨酰胺 核苷酸 仔稚魚(yú) 抗氧化 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S965
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-15
• 引言15-17
• 第一章 文獻(xiàn)綜述17-31
• 1. 谷氨酰胺營(yíng)養(yǎng)生理研究進(jìn)展17-22
• 1.1 谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)和功能17
• 1.2 谷氨酰胺的代謝17-18
• 1.3 谷氨酰胺在魚(yú)類中的研究進(jìn)展18-22
• 1.3.1 谷氨酰胺對(duì)生長(zhǎng)性能的影響18-19
• 1.3.2 谷氨酰胺對(duì)腸道形態(tài)和功能的影響19-20
• 1.3.3 谷氮酰胺對(duì)抗氧化能力的影響20
• 1.3.4 谷氨酰胺對(duì)免疫的影響20-22
• 2. 核苷酸的營(yíng)養(yǎng)生理研究進(jìn)展22-29
• 2.1 核苷酸的概念、組成和分類22
• 2.2 核苷酸的代謝和吸收22-23
• 2.3 核苷酸營(yíng)養(yǎng)——從“非必需”到“條件必需”的轉(zhuǎn)化23-25
• 2.4 核苷酸在水產(chǎn)動(dòng)物中的研究進(jìn)展25-29
• 2.4.1 核苷酸對(duì)生長(zhǎng)性能的影響25-26
• 2.4.2 核苷酸對(duì)脂代謝的影響26
• 2.4.3 核苷酸對(duì)腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的影響26-27
• 2.4.4 核苷酸對(duì)免疫的影響27-29
• 2.4.5 核苷酸對(duì)抗應(yīng)激能力的影響29
• 3. 研究目的和意義29-31
• 第二章 飼料中添加谷氨酰胺對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)、消化酶活力以及IGF-1 mRNA表達(dá)的影響31-52
• 1. 前言31-32
• 2. 材料方法32-42
• 2.1 實(shí)驗(yàn)飼料32-33
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和養(yǎng)殖過(guò)程33
• 2.3 取樣和解剖33-34
• 2.4 分析方法34-42
• 2.4.1 飼料成分分析34
• 2.4.2 消化酶活力分析34
• 2.4.3 Insulin-like growth factor Ⅰ(IGF-1)基因的克隆34-38
• 2.4.4 IGF-ImRNA表達(dá)量測(cè)定38-42
• 2.5 數(shù)據(jù)計(jì)算和統(tǒng)計(jì)分析42
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-43
• 3.1 飼料中谷氨酰胺含量對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)存活和生長(zhǎng)的影響42
• 3.2 飼料中谷氨酰胺含量對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)消化酶活力的影響42-43
• 3.3 飼料中谷氨酰胺含量對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)內(nèi)臟團(tuán)IGF-1mRNA表達(dá)量的影響43
• 3.4 半滑舌鰨稚魚(yú)對(duì)飼料中游離谷氨酰胺最適需求量分析43
• 4. 討論43-46
• 附表和圖46-52
• 第三章 飼料中添加谷氮酰胺對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)抗氧化能力和抗應(yīng)激能力的影響52-70
• 1. 引言52-54
• 2. 材料方法54-58
• 2.1 實(shí)驗(yàn)飼料、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和養(yǎng)殖過(guò)程、取樣和解剖54
• 2.2 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)54
• 2.3 分析方法54-58
• 2.3.1 飼料成分分析54
• 2.3.2 丙二醛以及抗氧化酶活力分析54-55
• 2.3.3 SOD、GPX、CAT、HSP70、HIF-1α因克隆55-58
• 2.3.4 SOD、GPX、CAT、HSP70和HIF-1α mRNA表達(dá)量測(cè)定58
• 2.4 統(tǒng)計(jì)分析58
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果58-60
• 3.1 抗氧化指標(biāo)58-59
• 3.1.1 丙二醛(MDA)含量58
• 3.1.2 SOD、GPX和CAT活力58-59
• 3.1.3 SOD、GPX和CAT mRNA的表達(dá)59
• 3.2 抗應(yīng)激指標(biāo)59-60
• 3.2.1 半致死溶氧濃度59
• 3.2.2 HSP70和HIF-1α mRNA表達(dá)59-60
• 4. 討論60-62
• 附表和圖62-70
• 第四章 飼料中添加核苷酸對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)性能和消化酶活力的影響70-78
• 1. 引言70-71
• 2. 材料方法71
• 2.1 實(shí)驗(yàn)飼料71
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和養(yǎng)殖過(guò)程、取樣和解剖、分析方法和統(tǒng)計(jì)71
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果71-72
• 3.1 核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響71-72
• 3.2 核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)消化酶活力的影響72
• 4. 討論72-75
• 附表和圖75-78
• 第五章 飼料中添加核苷酸對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)非特異性免疫相關(guān)酶活力、抗氧化能力和抗低氧應(yīng)激能力的影響78-90
• 1. 引言78-79
• 2. 材料方法79-80
• 2.1 實(shí)驗(yàn)飼料79
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和養(yǎng)殖過(guò)程、取樣和解剖79
• 2.3 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)79-80
• 2.4 分析方法和統(tǒng)計(jì)80
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果80-82
• 3.1 核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)非特異性免疫相關(guān)酶活力的影響80
• 3.1.1 iNOS活力80
• 3.1.2 溶菌酶活力80
• 3.2 核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)抗氧化酶活力及基因表達(dá)的影響80-81
• 3.2.1 丙二醛(MDA)含量80-81
• 3.2.2 抗氧化酶活力81
• 3.2.3 抗氧化酶mRNA表達(dá)量81
• 3.3 核苷酸對(duì)舌鰨稚魚(yú)抗低氧應(yīng)激能力的影響81-82
• 4. 討論82-84
• 附表和圖84-90
• 第六章 全文總結(jié)90-91
• 參考文獻(xiàn)91-110
• 致謝110-111
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷111

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本文編號(hào)：483236