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莧菜活性物的提取分離及抑菌作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-20 21:12

  本文關(guān)鍵詞:莧菜活性物的提取分離及抑菌作用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本文在前期研究基礎(chǔ)上從莧菜活性物的提取、莧菜活性物提取工藝優(yōu)化及抑菌能力、莧菜活性物的分離純化和鑒定三個(gè)部分全面系統(tǒng)的對(duì)莧菜中的抑菌活性物進(jìn)行了研究,以期為開發(fā)莧菜作為新的植物源生防試劑,拓展莧菜利用的新功能提供科學(xué)依據(jù),研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:1莧菜活性物對(duì)供試的植物病原細(xì)菌柑橘潰瘍病菌(抑制率66.29%)、水稻細(xì)菌性條斑病菌(抑制率63.39%)、煙草青枯病菌(抑制率42.19%)、西瓜細(xì)菌性果斑病菌(抑制率36.71%)、白菜軟腐病菌(抑制率33.19%)、大腸桿菌(抑制率28.33%);植物病原真菌僅對(duì)水稻紋枯病菌(抑制率62.1%)表現(xiàn)出抑制活性,而對(duì)其他的供試病原真菌則沒(méi)有抑制活性。2不同有機(jī)溶劑提取對(duì)莧菜活性物抑菌活性影響不一樣,依次為乙酸乙酯(抑制率60.79%)水(22.69%)丙酮=無(wú)水乙醇=石油醚,其中乙酸乙酯提取物抑制效果略好于對(duì)照8mg/mL硫酸鏈霉素(56.98%);莧菜活性物存在于莧菜的葉、根、莖,其中葉和根的含量較高,莖的含量較低。3靜置、靜置超聲和振蕩3種提取方式對(duì)莧菜活性物抑菌活性影響差異較大,其中振蕩提取效果最好,抑制率為38.73%,其他2種提取方式僅有26.35%和27.14%。;無(wú)水乙醇、醇水混合(1:5)以及蒸餾水3種溶媒24h的抑制率相差不大,依次為49.3%、45.9%和51.4%;但蒸餾水的抑菌持效性更久,72h后還有41.2%,好于其他2種溶媒的27.2%和40.2%。4不同干燥方式中,經(jīng)過(guò)陽(yáng)光曝曬和鼓風(fēng)機(jī)烘干的莧菜抑菌活要優(yōu)于自然陰干的莧菜,抑制率大小為71.69%63.50%57.14%;不同生長(zhǎng)期莧菜抑菌活性不一致,生長(zhǎng)期的莧菜抑菌活性最強(qiáng),抑制率為63.49%;幼嫩期和衰老期莧菜抑菌活性較弱,抑制率分別僅有38.62%和30.05%。5單因素實(shí)驗(yàn)確定莧菜活性物提取最佳條件:料液比1:20、溫度30℃、提取次數(shù)2次、提取時(shí)間24h。L9(34)正交試驗(yàn)探究莧菜活性物提取最佳條件:料液比1:5、溫度30℃、提取時(shí)間24h,在此條件下對(duì)柑橘潰瘍病菌抑制率為73.81%。6莧菜活性物對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病菌和柑橘潰瘍病菌EC50最小分別為19.87mg/mL和26.81mg/mL;其次是煙草青枯病菌和白菜軟腐病菌,EC50在100mg/mL以下,分別為81.72mg/mL和93.84mg/mL;然后是西瓜細(xì)菌性果斑病菌,EC50為141.1mg/mL;大腸桿菌的EC50最大,EC50值達(dá)到了265.46mg/mL。7不同極性有機(jī)溶劑對(duì)莧菜活性物萃取抑菌能力依次為乙酸乙酯萃取物(64.29%)水相萃取物(42.86%)氯仿萃取物(20.37%)石油醚萃取物。②TLC篩選柱層析最佳洗脫劑為石油醚:丙酮=3:2;柱層析分離合并到7個(gè)餾分,紫外分析儀全波段掃描波長(zhǎng)依次為Ⅰ號(hào)211nm、Ⅱ號(hào)271nm、Ⅲ號(hào)291nm、Ⅳ號(hào)319nm、Ⅴ號(hào)405nm、Ⅵ號(hào)504nm、 Ⅶ號(hào)669nm,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和V號(hào)具有抑菌活性,對(duì)柑橘潰瘍病菌抑制率依次為Ⅲ號(hào)(57.04%)V號(hào)(26.88%)Ⅱ號(hào)(26.08%)Ⅰ號(hào)(24.6%)。上述試驗(yàn)結(jié)果表明莧菜活性物對(duì)常見植物病原菌均有較強(qiáng)的抑制作用,具有開發(fā)成植物源生防制劑的巨大潛力,為開發(fā)新型、安全、環(huán)保的植物源農(nóng)藥提供了新思路。
【關(guān)鍵詞】:莧菜 提取工藝 抑制作用 分離純化 結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S482.292
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-11
  • 1 緒論11-22
  • 1.1 莧菜概述11-14
  • 1.2 植物活性成分提取分離技術(shù)14-18
  • 1.3 植物活性成分應(yīng)用研究進(jìn)展18-21
  • 1.4 研究目的與意義21-22
  • 2 材料與方法22-31
  • 2.1 試驗(yàn)材料22-23
  • 2.1.1 供試植物22
  • 2.1.2 供試菌種22
  • 2.1.3 供試培養(yǎng)基22-23
  • 2.2 主要試劑與儀器23-24
  • 2.2.1 供試試劑23
  • 2.2.2 主要儀器與設(shè)備23-24
  • 2.3 試驗(yàn)方法24-31
  • 2.3.1 菌種活化與活性測(cè)定24
  • 2.3.2 莧菜活性物提取24-26
  • 2.3.3 莧菜活性物提取工藝及抑菌能力26-27
  • 2.3.4 莧菜活性物分離純化與鑒定27-30
  • 2.3.5 數(shù)據(jù)處理與分析30-31
  • 3 結(jié)果與分析31-47
  • 3.1 莧菜活性物提取31-37
  • 3.1.1 莧菜活性物抑菌譜測(cè)定31-32
  • 3.1.2 莧菜不同部位抑菌活性物含量32
  • 3.1.3 不同浸提溶劑對(duì)莧菜活性物提取效果32-33
  • 3.1.4 莧菜活性物最佳溶媒選擇33-34
  • 3.1.5 不同浸提方法對(duì)莧菜活性物提取效果34-35
  • 3.1.6 不同干燥方式莧菜抑菌活性物含量35-36
  • 3.1.7 不同生長(zhǎng)期莧菜抑菌活性物含量36-37
  • 3.2 莧菜活性物提取工藝及抑菌能力37-44
  • 3.2.1 料液比對(duì)莧菜活性物浸提效果影響37-38
  • 3.2.2 提取溫度對(duì)莧菜活性物浸提效果影響38-39
  • 3.2.3 提取次數(shù)對(duì)莧菜活性物浸提效果影響39
  • 3.2.4 提取時(shí)間對(duì)莧菜活性物浸提效果影響39-40
  • 3.2.5 正交試驗(yàn)40-42
  • 3.2.6 莧菜活性物對(duì)6種植物病原細(xì)菌最小抑菌濃度(MIC)42-43
  • 3.2.7 莧菜活性物對(duì)6種植物病原細(xì)菌室內(nèi)毒力測(cè)定43-44
  • 3.3 莧菜活性物分離純化與鑒定44-47
  • 3.3.1 不同溶劑萃取物對(duì)柑橘潰瘍病菌抑菌活性44
  • 3.3.2 硅膠柱層析洗脫劑選擇44-45
  • 3.3.3 柱層析洗脫分離45
  • 3.3.4 柱層析合并餾分溶解性及抑菌活性45-47
  • 4 結(jié)論與討論47-49
  • 4.1 結(jié)論47
  • 4.2 討論47-49
  • 5 論文創(chuàng)新點(diǎn)49-50
  • 參考文獻(xiàn)50-60
  • 附錄60-63
  • 致謝63-64
  • 作者簡(jiǎn)介64

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本文編號(hào):466896


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