本文關(guān)鍵詞：自擬中藥復(fù)方對小鼠大腸桿菌感染的預(yù)防作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：為探討自擬中藥復(fù)方對動物機體的免疫調(diào)節(jié)及預(yù)防感染疾病的作用機理,試驗研究了預(yù)防用自擬中藥復(fù)方對感染大腸桿菌小鼠血液生理指標(biāo)、免疫器官病理變化及其指數(shù)、血清中Th17及Treg型細(xì)胞因子以及TLR4信號通路關(guān)鍵信號分子的影響。方法：(1)選取6只健康小鼠為對照組(記為-72h),另選取252只精神、體況接近的小鼠,按照性別、體重分為6組。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為中藥復(fù)方組,灌胃劑量(相當(dāng)于生藥含量,按0.1mL/10g灌胃)分別為20g/kg、10g/kg、5g/kg;Ⅳ組為藥物對照組,按66mg/kg灌胃黃芪多糖,Ⅴ組為模型組及Ⅵ組為健康對照組灌胃同體積蒸餾水,均1次/d,連用3d。試驗第4d,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組小鼠均腹腔注射1.7×108CFU/mL大腸桿菌液(0.1 mL/只),Ⅵ組小鼠注射等量生理鹽水。(2)在感染Oh、3h、6h、12h、24h、48h、1w,每組分別選取6只小鼠處死獲取全血及血清樣本,采集小鼠-72h、0h、12h、1w的胸腺、脾臟備用。(3)用全自動動物血液細(xì)胞分析儀檢測小鼠血液生理指標(biāo)；用ELISA方法測量血清中IL-6、IL-10、 IL-17、IL-23、TGF-β、TLR4、MyD88、TRIF、NF-κB、P38、JNK、ERK、IRF3、 TNF-α、IFN-β的含量。(4)稱取小鼠-72h、0h、1w的胸腺、脾臟及體質(zhì)量,計算臟器指數(shù),制作-72h、0h、12h、1w的胸腺、脾臟病理切片結(jié)果：(1)用藥3日后,各中藥復(fù)方組小鼠的WBC、LYM及LYM%均顯著高于模型組及對照組(P0.05)；感染3h～24h,中藥復(fù)方組小鼠的WBC、LYM、MID,在3h～12h的RBC、HGB均顯著高于模型組(P0.05)。(2)用藥3日后,中藥復(fù)方組小鼠血清IL-17、1L-23,高劑量組的1L-10,中、低劑量組的IL-17/IL-10均顯著高于模型組及對照組(P0,05)；在感染3h復(fù)方中藥組的IL-10均顯著低于感染組(P0.05),IL-17/IL-10比值均極顯著高于感染組(P0.01),高、中劑量組的IL-17均高于感染組(P0.05),1L-23、TGF-β均低于模型組(P0.05)。(3)用藥3日后,小鼠血清JNK.NF-κB及TNF-α顯著高于模型組及空白對照組(P0.05),P38及IL-6顯著低于模型組及空白對照組(P0.05),高劑量組TRIF、IFN-β極顯著高于模型組及空白對照組(P0.01)；與模型組相比,中藥復(fù)方組血清TLR4在感染期間均顯著降低(P0.05),MyD88在6h后顯著降低(P0.05),NF-κB在6h～12h極顯著降低(P0.01),P38、JNK在感染期間均顯著降低(P0.05),高劑量、低劑量組ERK在感染期間均顯著降低(P0.05),細(xì)胞因子TNF-α、IL-6在3h極顯著降低(P0.01),IFN-β無明顯變化(P0.05)。 (4)用藥3日后,中藥復(fù)方中劑量、低劑量組小鼠的脾質(zhì)量、胸腺質(zhì)量及其指數(shù)均顯著高于模型組及對照組(P0.05),在1w時,中藥復(fù)方組體質(zhì)量、脾質(zhì)量、胸腺質(zhì)量及其系數(shù)均顯著高于感染組(P0.05),脾臟病理組織形態(tài)受損程度較小結(jié)論：(1)通過向小鼠腹腔注射1.7×108CFU/mL大腸桿菌液(0.1 mL/只),可成功復(fù)制小鼠感染模型。(2)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方能明顯改善小鼠血液生理指標(biāo)并提高感染大腸桿菌小鼠的外周血的RBC、HGB、WBC、LYM及MID,從而提高小鼠對大腸桿菌的抗感染能力。(3)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方通過影響感染小鼠血清IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β等細(xì)胞因子的分泌,調(diào)節(jié)Th17及Treg細(xì)胞亞群平衡,調(diào)節(jié)機體免疫力。(4)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方通過減緩感染大腸桿菌引起小鼠血清TLR4信號通路中NF-κB、JNK、P38、ERK及IL-6的升高,減少機體炎癥反應(yīng),實現(xiàn)對機體的保護(hù)作用。(5)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方具有促進(jìn)小鼠胸腺、脾臟的生長,促進(jìn)感染大腸桿菌小鼠脾臟恢復(fù)的作用。
【關(guān)鍵詞】：中藥復(fù)方 大腸桿菌 小鼠 感染 預(yù)防作用
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S853.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 第一節(jié) 研究背景13-19
• 1 中藥對機體免疫功能的影響13-14
• 1.1 中藥對免疫器官的影響14
• 1.2 中藥對外周血細(xì)胞的影響14
• 2 Th淋巴細(xì)胞亞群及其分泌細(xì)胞因子14-16
• 3 Toll樣受體4信號通路16-18
• 3.1 MyD88依賴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路16-17
• 3.2 MyD88非依賴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路17-18
• 4 中藥免疫增強劑的研究與應(yīng)用18-19
• 第二節(jié) 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血液生理指標(biāo)的影響19-28
• 1 材料和方法19-21
• 1.1 試驗藥物及制備19
• 1.2 試驗菌株及菌液配制19
• 1.3 試驗動物19-20
• 1.4 主要試劑和儀器20
• 1.5 試驗動物分組與處理20
• 1.6 檢測指標(biāo)及方法20
• 1.7 數(shù)據(jù)處理20-21
• 2 結(jié)果21-26
• 2.1 各組小鼠腹腔注射大腸桿菌前后的臨床癥狀21
• 2.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血液生理指標(biāo)的影響21-26
• 3 討論26-27
• 3.1 成功復(fù)制小鼠大腸桿菌感染模型26-27
• 3.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血液生理指標(biāo)的影響27
• 4 小結(jié)27-28
• 第三節(jié) 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清Th17、Treg型細(xì)胞因子的影響28-37
• 1 材料與方法28-29
• 1.1 試驗藥物及制備28
• 1.2 試驗菌株及菌液配制28
• 1.3 試驗動物及分組28
• 1.4 主要儀器和試劑28
• 1.5 樣本采集及檢測28
• 1.6 數(shù)據(jù)處理28-29
• 2 結(jié)果29-34
• 2.1 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清Th17型細(xì)胞因子的影響29-30
• 2.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清Treg型細(xì)胞因子的影響30-34
• 2.3 中藥復(fù)方及黃芪多糖對腹腔注射大腸桿菌小鼠IL-17/IL-10比值的影響34
• 3 討論34-36
• 3.1 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清IL-17、IL-23的影響34-35
• 3.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清TGF-p、IL-10的影響35
• 3.3 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠Th17/Treg型細(xì)胞因子平衡的影響35-36
• 4 小結(jié)36-37
• 第四節(jié) 自擬中藥復(fù)方對感染大腸桿菌小鼠血清中TLR4信號通路中關(guān)鍵炎癥信號分子及細(xì)胞因子的影響37-54
• 1 材料與方法37-38
• 1.1 試驗藥物及制備37
• 1.2 試驗菌株及菌液配制37
• 1.3 試驗動物分組及處理37
• 1.4 主要儀器和試劑37
• 1.5 檢測指標(biāo)及方法37
• 1.6 數(shù)據(jù)處理37-38
• 2 結(jié)果38-49
• 2.1 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清TLR4、MyD88、TRIF的影響38-42
• 2.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清中MyD88依賴途徑及非依賴途徑中炎癥信號分子的影響42-44
• 2.3 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清TNF-α、IL-6、IFN-β的影響44-49
• 3 討論49-53
• 3.1 腹腔注射大腸桿菌對小鼠血清中TLR4介導(dǎo)的MyD88依賴途徑、非依賴途徑中關(guān)鍵炎癥信號分子,及下游細(xì)胞因子IL-6、TNF-α、IFN-β的影響49-51
• 3.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠血清TLR4介導(dǎo)的MyD88依賴途徑、非依賴途徑中關(guān)鍵炎癥信號分子,及下游細(xì)胞因子IL-6、TNF-α、IFN-β的影響51-53
• 4 小結(jié)53-54
• 第五節(jié) 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠體質(zhì)量及胸腺、脾臟的影響54-61
• 1 材料與方法54-55
• 1.1 試驗藥物及制備54
• 1.2 試驗菌株及菌液配制54
• 1.3 試驗動物分組及處理54
• 1.4 主要儀器和試劑54
• 1.5 檢測指標(biāo)及方法54-55
• 1.6 數(shù)據(jù)處理55
• 2 結(jié)果55-56
• 2.1 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠體質(zhì)量、脾臟和胸腺質(zhì)量及其指數(shù)的影響55
• 2.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠脾臟和胸腺病理組織的影響55-56
• 3 討論56
• 3.1 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠體質(zhì)量、脾臟和胸腺質(zhì)量及其指數(shù)的影響56
• 3.2 自擬中藥復(fù)方對腹腔注射大腸桿菌小鼠脾臟和胸腺病理組織的影響56
• 4 小結(jié)56-61
• 第六節(jié) 結(jié)論61-62
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 致謝68-69
• 期間發(fā)表的論文69

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋金斌;中藥復(fù)方中藥物的相互作用[J];中國獸醫(yī)雜志;1985年04期

2 王建國;周富榮;;中藥復(fù)方飼料添加劑的篩選試驗[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;1989年01期

3 王建國;周富榮;;中藥復(fù)方添加劑的篩選[J];飼料研究;1989年05期

4 傅竹新;;中藥復(fù)方桑茶的開發(fā)與應(yīng)用[J];蠶桑通報;1993年04期

5 湯法銀;汪德剛;;中藥復(fù)方藥效物質(zhì)研究進(jìn)展[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2006年06期

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本文編號：424424