發(fā)布時間：2017-06-01 22:14

  本文關(guān)鍵詞：核桃根腐病拮抗解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵優(yōu)化及其菌劑的研制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：核桃(Juglans regia)是胡桃科核桃屬多年生落葉果樹,核桃的果實(shí)、種殼、枝葉及木材都有多種用途,因其果仁營養(yǎng)豐富,口味較佳及其用途多樣,使核桃被評為世界四大堅果之一。核桃在全世界很多地方都有種植,在中國核桃是經(jīng)濟(jì)樹種中分布最廣泛的樹種之一,而且在最近的研究中發(fā)現(xiàn)中國是核桃起源地之一。隨著核桃病害的逐漸嚴(yán)重,人們對于核桃病害的研究也越來越重視。通過查閱大量文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌對許多植物病害有較強(qiáng)拮抗性,因此本實(shí)驗(yàn)利用一株在預(yù)實(shí)驗(yàn)中對核桃根腐病病原菌有較強(qiáng)抑制作用的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens作為生防菌,通過發(fā)酵工藝優(yōu)化提高其發(fā)酵液的抑菌率。最后,將發(fā)酵液制成一種有效的可濕性粉劑。主要內(nèi)容結(jié)果如下：(1)解淀粉芽孢桿菌培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的優(yōu)化。在單因素法和正交試驗(yàn)相結(jié)合的研究中發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基中最佳的碳源為1%的可溶性淀粉,最佳氮源為1%的蛋白胨,最佳無機(jī)鹽為0.01%的KH2PO4和0.05%的MgSO4;在小型發(fā)酵罐中用單因素法通過不同接種量和不同時間段的抑菌率變化篩選出的最佳發(fā)酵條件為：1%的接種量和42 h的發(fā)酵時間,然后通過正交試驗(yàn)篩選出的最佳發(fā)酵條件溫度為25℃,初始pH值為7.0,攪拌速度為200 r/min,通氣量為100 L/h,在這樣的條件下可以使生防菌獲得較高的抑菌活性。其中在正交試驗(yàn)中的數(shù)據(jù)顯示營養(yǎng)元素中影響抑菌性大小的順序?yàn)椋嚎扇苄缘矸鄣鞍纂薓gSO4KH2PO4;發(fā)酵條件中影響抑菌性大小的順序?yàn)椋和饬繑嚢杷俣萷H溫度。(2)可濕性粉劑的載體和助劑的篩選和最佳配比的確定。首先利用各種載體和助劑對生防菌活性的影響,采用單因素法進(jìn)行篩選,得到的結(jié)果為：載體為高嶺土,分散劑為三聚磷酸鈉,潤濕劑為十二烷基苯磺酸鈉,保護(hù)劑為腐殖酸。然后再通過懸浮率和生防菌活性兩個因素,進(jìn)行正交試驗(yàn)后得到的數(shù)據(jù)通過比較顯示最佳的配比為：高嶺土35%、三聚磷酸鈉5%、十二烷基苯磺酸鈉10%、腐殖酸2.5%,其中對于生防菌活性的影響大小的順序?yàn)椋焊邘X土三聚磷酸鈉腐殖酸十二烷基苯磺酸鈉,對菌劑懸浮率影響大小的順序?yàn)椋焊邘X土三聚磷酸鈉十二烷基苯磺酸鈉腐殖酸。(3)可濕性粉劑的指標(biāo)性檢測。利用優(yōu)化發(fā)酵后得到的發(fā)酵液與確定最佳配比的載體和助劑混合,再進(jìn)行烘干、粉碎制得可濕性粉劑。在對制備的可濕性粉劑各項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果為：懸浮率為74%,潤濕時間為97 s,pH值為6.75,細(xì)度98%能通過200目篩,含水量為2.61%,盆栽實(shí)驗(yàn)中500倍稀釋度藥劑防效最高為71.43%。
【關(guān)鍵詞】：核桃根腐病 解淀粉芽孢桿菌 發(fā)酵優(yōu)化 可濕性粉劑
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S436.64;S482.292
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-12
• 1 文獻(xiàn)綜述12-23
• 1.1 生防菌解淀粉芽孢桿菌12-13
• 1.1.1 形態(tài)生理特征12
• 1.1.2 解淀粉芽孢桿菌的研究和應(yīng)用12-13
• 1.2 生物防治研究現(xiàn)狀13-16
• 1.2.1 生物防治概述13-14
• 1.2.2 生防菌的作用機(jī)制14-16
• 1.3 微生物發(fā)酵工藝16-18
• 1.3.1 培養(yǎng)基的優(yōu)化16-17
• 1.3.2 培養(yǎng)條件的優(yōu)化17-18
• 1.4 微生物農(nóng)藥的研究現(xiàn)狀18-22
• 1.4.1 微生物農(nóng)藥概述18-19
• 1.4.2 微生物農(nóng)藥可濕性粉劑的研究現(xiàn)狀19-20
• 1.4.3 可濕性粉劑研究現(xiàn)狀20-22
• 1.5 生物防治目前所存在的問題22-23
• 1.5.1 生物防治的穩(wěn)定性差22-23
• 1.5.2 規(guī)�；a(chǎn)技術(shù)落后23
• 1.5.3 生防制劑儲存期較短23
• 1.5.4 田間應(yīng)用技術(shù)推廣不夠成熟23
• 2 研究目的及內(nèi)容23-24
• 2.1 研究內(nèi)容23-24
• 2.2 技術(shù)路線24
• 3 材料與方法24-31
• 3.1 實(shí)驗(yàn)主要材料25-26
• 3.1.1 試驗(yàn)菌株25
• 3.1.2 供試藥劑25
• 3.1.3 基本培養(yǎng)基25
• 3.1.4 主要儀器25-26
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法26-31
• 3.2.1 菌株活化26
• 3.2.2 種子液和發(fā)酵液的制備26
• 3.2.3 發(fā)酵液抑菌活性比較26
• 3.2.4 生防菌存活率的檢測26
• 3.2.5 發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化26-27
• 3.2.6 發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化27-28
• 3.2.7 生防菌菌劑載體和助劑的篩選28-30
• 3.2.8 生防菌穩(wěn)定性研究30
• 3.2.9 生防菌可濕性粉劑的質(zhì)量檢測和盆栽試驗(yàn)30-31
• 4 結(jié)果與分析31-41
• 4.1 發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化31-34
• 4.1.1 碳源的篩選31-32
• 4.1.2 氮源的篩選32-33
• 4.1.3 無機(jī)鹽的篩選33
• 4.1.4 最佳發(fā)酵培養(yǎng)基的確定33-34
• 4.2 發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化34-36
• 4.2.1 接種量的優(yōu)化34-35
• 4.2.2 發(fā)酵時間的優(yōu)化35
• 4.2.3 最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化35-36
• 4.3 生防菌菌劑載體和助劑的篩選36-39
• 4.3.1 載體的篩選36-37
• 4.3.2 潤濕劑的篩選37
• 4.3.3 分散劑的篩選37-38
• 4.3.4 保護(hù)劑的篩選38
• 4.3.5 載體與助劑配比的優(yōu)化38-39
• 4.4 生防菌穩(wěn)定性研究39-40
• 4.4.1 不同溫度對生防菌存活率的影響39-40
• 4.4.2 不同pH值對于生防菌存活率的影響40
• 4.5 生防菌可濕性粉劑的質(zhì)量檢測和盆栽試驗(yàn)40-41
• 4.5.1 生防菌可濕性粉劑的質(zhì)量檢測41
• 4.5.2 生防菌菌劑的盆栽防治效果41
• 5 討論與結(jié)論41-47
• 5.1 發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化41-42
• 5.2 發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化42-44
• 5.3 載體和助劑的篩選44-45
• 5.4 生防菌穩(wěn)及其菌劑的檢測45-46
• 5.5 存在的問題及展望46-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 致謝51

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