植原體是危害農(nóng)作物、觀賞性植物等的重要病原。棗瘋病相關(guān)植原體是植原體16S rV-B亞組的重要成員,能夠侵染棗樹、刺槐和絲棉木等多種植物。棗樹是山東省重要的經(jīng)濟作物,棗瘋病嚴重影響棗業(yè)的安全生產(chǎn)。目前棗瘋病相關(guān)植原體的潛在寄主和癥狀形成的機制還不清楚。本論文分析了棗瘋病相關(guān)植原體的潛在寄主,預測并分析了棗瘋病相關(guān)植原體的潛在效應(yīng)因子在棗瘋病叢枝和花變?nèi)~癥狀形成過程中作用,鑒定了兩個潛在效應(yīng)因子的寄主互作蛋白,主要結(jié)果如下:(1)分析了棗瘋病相關(guān)植原體的田間寄主。利用植原體16SrRNA特異性引物對山東省煙臺市和泰安市采集的8種不同寄主的15個植原體疑似樣品進行PCR擴增。序列分析表明棗樹、櫻桃、臭椿、柿子樹、荊條、小蓬草和榆樹上擴增到的植原體16S rRNA序列相似度達到100%,與GenBank中棗瘋植原體nky株系序列相似度較高,為99.07%;基于16SrRNA部分序列的系統(tǒng)進化和限制性片段長度多態(tài)性的iphyclassifier分析均表明本研究獲得的棗瘋病相關(guān)植原體分離物屬于16SrV-B亞組。(2)明確JWB406是引起叢枝癥狀的效應(yīng)因子。利用SignalP v3.0和TMH...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
前言
    1.1 植原體研究概況
        1.1.1 植原體的危害
        1.1.2 植原體的傳播
        1.1.3 植原體的檢測方法
        1.1.4 植原體的分類
        1.1.5 植原體的基因組
        1.1.6 植原體的分泌蛋白
    1.2 棗瘋植原體研究概況
    1.3 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料與主要試劑
        2.1.1 供試植物和樣品
        2.1.2 實驗菌株與載體
        2.1.3 主要試劑及溶液
    2.2 主要實驗儀器
    2.3 引物設(shè)計及載體構(gòu)建
    2.4 實驗方法
        2.4.1 植原體疑似樣品的檢測
        2.4.2 基于16SrRNA序列的植原體系統(tǒng)進化分析
        2.4.3 植原體中效應(yīng)因子的預測
        2.4.4 植原體效應(yīng)因子瞬時表達
        2.4.5 酵母文庫篩選擬南芥中效應(yīng)因子互作蛋白
        2.4.6 酵母雙雜技術(shù)驗證效應(yīng)因子與寄主蛋白的互作
        2.4.7 效應(yīng)因子亞細胞定位分析
        2.4.8 免疫膠體金分析效應(yīng)因子在植物體內(nèi)定位
3 結(jié)果與分析
    3.1 棗瘋病相關(guān)植原體的田間寄主
    3.2 棗瘋病相關(guān)植原體的潛在效應(yīng)因子
    3.3 過表達候選效應(yīng)因子改變植物表型
    3.4 效應(yīng)因子JWB406和JWB157 的序列分析
    3.5 效應(yīng)因子JWB406和JWB157 定位于細胞核和細胞質(zhì)
    3.6 棗瘋病植原體效應(yīng)因子JWB406在植物體內(nèi)定位
    3.7 酵母雙雜篩選效應(yīng)因子JWB406和JWB157 擬南芥中的寄主互作蛋白
    3.8 JWB406 與擬南芥蛋白SPL11和GATA3 互作
4 討論
    4.1 棗瘋病相關(guān)植原體寄主范圍
    4.2 植原體癥狀形成機制研究
    4.3 SPL轉(zhuǎn)錄因子家族
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3840339