狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組及與N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
發(fā)布時(shí)間:2023-06-02 02:11
狂犬病是一種嚴(yán)重侵害大腦中樞神經(jīng)的重要人獸共患傳染病,是由狂犬病病毒所引起的,可感染所有的溫血?jiǎng)游锊⒁鹬滤佬缘哪X脊髓炎,其病死率高達(dá)100%。據(jù)WHO報(bào)道全世界每年近6萬人死于狂犬病,而這主要發(fā)生在發(fā)展中國家,其中亞洲和非洲占絕大多數(shù)。我國是狂犬病高發(fā)地區(qū),近幾年因狂犬病發(fā)病死亡的人數(shù)每年都高達(dá)數(shù)千人,且還有上升的趨勢,我國狂犬病發(fā)病和死亡人數(shù)已居世界第二位,僅次于印度。因此,預(yù)防和治療狂犬病的任務(wù)迫在眉睫且十分艱巨?袢〔《臼且粋(gè)具有囊膜的不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒,是彈狀病毒科狂犬病病毒屬成員,主要編碼核蛋白(N),磷蛋白(P),基質(zhì)蛋白(M),糖蛋白(G)和聚合酶蛋白(L)等五個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白。病毒粒子呈子彈狀,外部為脂質(zhì)雙層囊膜,其表面含G蛋白纖突,主要參與介導(dǎo)細(xì)胞膜融合、受體結(jié)合以及誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生中和抗體,此外還與病毒毒力及致病性有關(guān)。M蛋白位于病毒囊膜內(nèi)側(cè),可將核衣殼和囊膜連接起來,主要參與子代病毒的裝配和出芽及病毒形態(tài)的形成。內(nèi)部包裹由N蛋白、P蛋白、L蛋白及病毒基因組RNA組成的核衣殼,即核糖核蛋白復(fù)合物(RNP),作為狂犬病病毒轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的模板。N蛋白主要與狂犬病病毒的...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 細(xì)胞、病毒
1.2 主要試劑及配制
1.3 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 狂犬病病毒的培養(yǎng)與純化
2.2 狂犬病病毒粒子的鑒定
2.3 狂犬病病毒粒子的質(zhì)譜分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鑒定
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 病毒粒子的純化與鑒定
3.2 病毒粒子的質(zhì)譜分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的驗(yàn)證
4 小結(jié)與討論
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 質(zhì)粒載體
1.2 菌株
1.3 細(xì)胞、病毒
1.4 主要試劑及配制
1.5 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗體的制備
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白穩(wěn)定細(xì)胞系的篩選
2.3 TAP法篩選與狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 P蛋白多克隆抗體的鑒定
3.2 N和P蛋白穩(wěn)定細(xì)胞系的鑒定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
4 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
研究論文
個(gè)人簡歷
致謝
本文編號(hào):3827464
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 細(xì)胞、病毒
1.2 主要試劑及配制
1.3 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 狂犬病病毒的培養(yǎng)與純化
2.2 狂犬病病毒粒子的鑒定
2.3 狂犬病病毒粒子的質(zhì)譜分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鑒定
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 病毒粒子的純化與鑒定
3.2 病毒粒子的質(zhì)譜分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的驗(yàn)證
4 小結(jié)與討論
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 質(zhì)粒載體
1.2 菌株
1.3 細(xì)胞、病毒
1.4 主要試劑及配制
1.5 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗體的制備
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白穩(wěn)定細(xì)胞系的篩選
2.3 TAP法篩選與狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 P蛋白多克隆抗體的鑒定
3.2 N和P蛋白穩(wěn)定細(xì)胞系的鑒定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
4 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
研究論文
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致謝
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