狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組及與N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
發(fā)布時間:2023-06-02 02:11
狂犬病是一種嚴重侵害大腦中樞神經(jīng)的重要人獸共患傳染病,是由狂犬病病毒所引起的,可感染所有的溫血動物并引起致死性的腦脊髓炎,其病死率高達100%。據(jù)WHO報道全世界每年近6萬人死于狂犬病,而這主要發(fā)生在發(fā)展中國家,其中亞洲和非洲占絕大多數(shù)。我國是狂犬病高發(fā)地區(qū),近幾年因狂犬病發(fā)病死亡的人數(shù)每年都高達數(shù)千人,且還有上升的趨勢,我國狂犬病發(fā)病和死亡人數(shù)已居世界第二位,僅次于印度。因此,預防和治療狂犬病的任務迫在眉睫且十分艱巨?袢〔《臼且粋具有囊膜的不分節(jié)段的單股負鏈RNA病毒,是彈狀病毒科狂犬病病毒屬成員,主要編碼核蛋白(N),磷蛋白(P),基質(zhì)蛋白(M),糖蛋白(G)和聚合酶蛋白(L)等五個結(jié)構(gòu)蛋白。病毒粒子呈子彈狀,外部為脂質(zhì)雙層囊膜,其表面含G蛋白纖突,主要參與介導細胞膜融合、受體結(jié)合以及誘導宿主產(chǎn)生中和抗體,此外還與病毒毒力及致病性有關(guān)。M蛋白位于病毒囊膜內(nèi)側(cè),可將核衣殼和囊膜連接起來,主要參與子代病毒的裝配和出芽及病毒形態(tài)的形成。內(nèi)部包裹由N蛋白、P蛋白、L蛋白及病毒基因組RNA組成的核衣殼,即核糖核蛋白復合物(RNP),作為狂犬病病毒轉(zhuǎn)錄與復制的模板。N蛋白主要與狂犬病病毒的...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組學分析
1 實驗材料
1.1 細胞、病毒
1.2 主要試劑及配制
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 狂犬病病毒的培養(yǎng)與純化
2.2 狂犬病病毒粒子的鑒定
2.3 狂犬病病毒粒子的質(zhì)譜分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鑒定
3 實驗結(jié)果
3.1 病毒粒子的純化與鑒定
3.2 病毒粒子的質(zhì)譜分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的驗證
4 小結(jié)與討論
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
1 實驗材料
1.1 質(zhì)粒載體
1.2 菌株
1.3 細胞、病毒
1.4 主要試劑及配制
1.5 主要儀器
2 實驗方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗體的制備
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白穩(wěn)定細胞系的篩選
2.3 TAP法篩選與狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 實驗結(jié)果
3.1 P蛋白多克隆抗體的鑒定
3.2 N和P蛋白穩(wěn)定細胞系的鑒定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
4 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
文獻綜述
參考文獻
研究論文
個人簡歷
致謝
本文編號:3827464
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組學分析
1 實驗材料
1.1 細胞、病毒
1.2 主要試劑及配制
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 狂犬病病毒的培養(yǎng)與純化
2.2 狂犬病病毒粒子的鑒定
2.3 狂犬病病毒粒子的質(zhì)譜分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鑒定
3 實驗結(jié)果
3.1 病毒粒子的純化與鑒定
3.2 病毒粒子的質(zhì)譜分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的驗證
4 小結(jié)與討論
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
1 實驗材料
1.1 質(zhì)粒載體
1.2 菌株
1.3 細胞、病毒
1.4 主要試劑及配制
1.5 主要儀器
2 實驗方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗體的制備
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白穩(wěn)定細胞系的篩選
2.3 TAP法篩選與狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 實驗結(jié)果
3.1 P蛋白多克隆抗體的鑒定
3.2 N和P蛋白穩(wěn)定細胞系的鑒定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定
4 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
文獻綜述
參考文獻
研究論文
個人簡歷
致謝
本文編號:3827464
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