當今世界小麥播種總面積、小麥總產量和總庫存量在谷類作物中均占據首位,以小麥為主要糧食的人口占世界人口總數的三分之一以上。同時小麥也是我國主要的三大糧食作物之一,小麥產量決定國家糧食安全。目前各種白粉病等真菌性病害嚴重影響小麥的產量,因此良好抗病基因的鑒定和利用有助于提高小麥的抗病性。在植物遭受脅迫時,類萌芽素基因GLPs在發(fā)育、防御和應激等方面揮重要作用。在本研究中,在前期通過對白粉病誘導的小偃麥SN6306轉錄組分析的基礎上,從中鑒定到一個來自中間偃麥草且受白粉病菌誘導的類萌芽素基因TiGLP1,進一步對TiGLP1基因進行了功能分析;同時對小麥TaGLP基因家族進行分析鑒定。主要結果如下:(1)TiGLP1基因的克隆將小麥白粉病生理小種E09誘導后的小偃麥SN6306進行轉錄組測序,對其中明顯上調表達的差異基因TiGLP1基因進行克隆。利用在線軟件對基因序列分析表明,TiGLP1基因cDNA全長為651 bp,ORF編碼216個氨基酸的蛋白質。有22個氨基酸殘基的信號肽。對14個物種GLPs蛋白序列進行比對和進化樹分析,比對發(fā)現TiGLP1的氨基酸序列與中間偃麥草中擴增得到的TiG...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 萌芽素和類萌芽素的研究
        1.1.1 萌芽素和類萌芽素結構
        1.1.2 萌芽素和類萌芽素系統(tǒng)發(fā)育
    1.2 萌芽素和類萌芽素功能
        1.2.1 草酸氧化酶功能
        1.2.2 超氧化物歧化酶功能
        1.2.3 葡萄糖焦磷酸化酶功能
    1.3 植物萌芽素和類萌芽素基因家族研究進展
        1.3.1 萌芽素和類萌芽素在擬南芥中的研究
        1.3.2 萌芽素和類萌芽素在大麥中的研究
    1.4 萌芽素和類萌芽素對逆境脅迫的響應
        1.4.1 萌芽素和類萌芽素對生物脅迫響應
        1.4.2 萌芽素和類萌芽素對非生物脅迫的響應
    1.5 研究目的與意義
    1.6 主要研究內容
2 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 菌株與載體
    2.3 數據庫、序列分析所用的軟件及在線分析網站
    2.4 生化試劑
    2.5 主要溶液配方
    2.6 主要儀器
    2.7 引物的設計與合成
    2.8 方法
        2.8.1 小麥材料的準備
        2.8.2 TiGLP1基因克隆
        2.8.3 TiGLP1基因功能分析
        2.8.4 TaGLP全基因鑒定方法
3 結果與分析
    3.1 TiGLP1基因克隆及序列分析
        3.1.1 TiGLP1基因cDNA的獲得
        3.1.2 TiGLP1基因在小麥YN15、CS、SN6306和中間偃麥草基因組DNA擴增比對
        3.1.3 TiGLP1蛋白多序列比對和系統(tǒng)進化分析
    3.2 TiGLP1基因的功能驗證
        3.2.1 白粉病菌誘導下TiGLP1基因的表達上調
        3.2.2 TiGLP1蛋白亞細胞定位于胞外
        3.2.3 TiGLP1轉基因煙草及鑒定
        3.2.4 轉TiGLP1基因煙草響應Pst DC3000生理生化變化
    3.3 TaGLP基因家族鑒定和分析
        3.3.1 小麥中TaGLP基因的鑒定
        3.3.2 TaGLP基因的染色體分布
        3.3.3 TaGLP基因的系統(tǒng)發(fā)育關系分析
        3.3.4 TaGLP基因的基因結構和保守基序分析
        3.3.5 TaGLP基因在小麥-Bgt互作中的表達分析
        3.3.6 TaGLP基因的熒光定量分析
4 討論
    4.1 TiGLP1基因參與了白粉病菌的侵染植物的抗病過程
    4.2 TiGLP1基因能夠增強植物對Pst DC3000的抗性
    4.3 TaGLP基因家族成員鑒定、染色體位置和系統(tǒng)進化樹
5 結論
參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3789465