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中間偃麥草類萌芽素蛋白基因TiGLP1的功能分析及小麥TaGLP基因家族分析

發(fā)布時(shí)間:2023-04-11 17:28
  當(dāng)今世界小麥播種總面積、小麥總產(chǎn)量和總庫存量在谷類作物中均占據(jù)首位,以小麥為主要糧食的人口占世界人口總數(shù)的三分之一以上。同時(shí)小麥也是我國主要的三大糧食作物之一,小麥產(chǎn)量決定國家糧食安全。目前各種白粉病等真菌性病害嚴(yán)重影響小麥的產(chǎn)量,因此良好抗病基因的鑒定和利用有助于提高小麥的抗病性。在植物遭受脅迫時(shí),類萌芽素基因GLPs在發(fā)育、防御和應(yīng)激等方面揮重要作用。在本研究中,在前期通過對白粉病誘導(dǎo)的小偃麥SN6306轉(zhuǎn)錄組分析的基礎(chǔ)上,從中鑒定到一個(gè)來自中間偃麥草且受白粉病菌誘導(dǎo)的類萌芽素基因TiGLP1,進(jìn)一步對TiGLP1基因進(jìn)行了功能分析;同時(shí)對小麥TaGLP基因家族進(jìn)行分析鑒定。主要結(jié)果如下:(1)TiGLP1基因的克隆將小麥白粉病生理小種E09誘導(dǎo)后的小偃麥SN6306進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,對其中明顯上調(diào)表達(dá)的差異基因TiGLP1基因進(jìn)行克隆。利用在線軟件對基因序列分析表明,TiGLP1基因cDNA全長為651 bp,ORF編碼216個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。有22個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽。對14個(gè)物種GLPs蛋白序列進(jìn)行比對和進(jìn)化樹分析,比對發(fā)現(xiàn)TiGLP1的氨基酸序列與中間偃麥草中擴(kuò)增得到的TiG...

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
符號(hào)說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 萌芽素和類萌芽素的研究
        1.1.1 萌芽素和類萌芽素結(jié)構(gòu)
        1.1.2 萌芽素和類萌芽素系統(tǒng)發(fā)育
    1.2 萌芽素和類萌芽素功能
        1.2.1 草酸氧化酶功能
        1.2.2 超氧化物歧化酶功能
        1.2.3 葡萄糖焦磷酸化酶功能
    1.3 植物萌芽素和類萌芽素基因家族研究進(jìn)展
        1.3.1 萌芽素和類萌芽素在擬南芥中的研究
        1.3.2 萌芽素和類萌芽素在大麥中的研究
    1.4 萌芽素和類萌芽素對逆境脅迫的響應(yīng)
        1.4.1 萌芽素和類萌芽素對生物脅迫響應(yīng)
        1.4.2 萌芽素和類萌芽素對非生物脅迫的響應(yīng)
    1.5 研究目的與意義
    1.6 主要研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 菌株與載體
    2.3 數(shù)據(jù)庫、序列分析所用的軟件及在線分析網(wǎng)站
    2.4 生化試劑
    2.5 主要溶液配方
    2.6 主要儀器
    2.7 引物的設(shè)計(jì)與合成
    2.8 方法
        2.8.1 小麥材料的準(zhǔn)備
        2.8.2 TiGLP1基因克隆
        2.8.3 TiGLP1基因功能分析
        2.8.4 TaGLP全基因鑒定方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 TiGLP1基因克隆及序列分析
        3.1.1 TiGLP1基因cDNA的獲得
        3.1.2 TiGLP1基因在小麥YN15、CS、SN6306和中間偃麥草基因組DNA擴(kuò)增比對
        3.1.3 TiGLP1蛋白多序列比對和系統(tǒng)進(jìn)化分析
    3.2 TiGLP1基因的功能驗(yàn)證
        3.2.1 白粉病菌誘導(dǎo)下TiGLP1基因的表達(dá)上調(diào)
        3.2.2 TiGLP1蛋白亞細(xì)胞定位于胞外
        3.2.3 TiGLP1轉(zhuǎn)基因煙草及鑒定
        3.2.4 轉(zhuǎn)TiGLP1基因煙草響應(yīng)Pst DC3000生理生化變化
    3.3 TaGLP基因家族鑒定和分析
        3.3.1 小麥中TaGLP基因的鑒定
        3.3.2 TaGLP基因的染色體分布
        3.3.3 TaGLP基因的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析
        3.3.4 TaGLP基因的基因結(jié)構(gòu)和保守基序分析
        3.3.5 TaGLP基因在小麥-Bgt互作中的表達(dá)分析
        3.3.6 TaGLP基因的熒光定量分析
4 討論
    4.1 TiGLP1基因參與了白粉病菌的侵染植物的抗病過程
    4.2 TiGLP1基因能夠增強(qiáng)植物對Pst DC3000的抗性
    4.3 TaGLP基因家族成員鑒定、染色體位置和系統(tǒng)進(jìn)化樹
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào):3789465

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