干旱是在我國(guó)主要產(chǎn)茶區(qū)普遍發(fā)生的主要自然災(zāi)害,且茶樹(shù)是一種葉用植物,其生長(zhǎng)的健康與否直接影響茶葉的品質(zhì)。愈來(lái)愈多的研究表明1nicroRNA (miRNA)在植物干旱脅迫響應(yīng)中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。為研究miRNA對(duì)鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫的相應(yīng)機(jī)制,本文采用補(bǔ)水稱重法,對(duì)干旱脅迫的鐵觀音茶樹(shù)進(jìn)行sRNA分離鑒定,對(duì)鐵觀音茶樹(shù)不同程度干旱脅迫過(guò)程中的部分相關(guān)miRNA進(jìn)行定量表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下：1鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中主要生化成分變化本研究采用補(bǔ)水稱重法對(duì)盆栽鐵觀音茶苗進(jìn)行正常供水(對(duì)照CK)、輕度干旱脅迫(T1)、中度干旱脅迫(T2)、重度干旱脅迫(T3)四組處理,研究發(fā)現(xiàn),隨著干旱脅迫程度的增強(qiáng),葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量的下降,葉片光合速率減弱。干旱脅迫程度的加劇引發(fā)植物的膜質(zhì)損傷,使植物葉片中MDA的含量增加,電解液外滲,電導(dǎo)率增強(qiáng)。當(dāng)鐵觀音茶樹(shù)遭受輕度干旱脅迫和中度干旱脅迫時(shí),鐵觀音茶樹(shù)葉片MDA含量略有增加,植物細(xì)胞電導(dǎo)率略微增強(qiáng)。當(dāng)鐵觀音茶樹(shù)遭受重度脅迫時(shí),葉片中MDA含量及葉片電導(dǎo)率增加趨勢(shì)明顯。2 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中的sRNA通...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 茶樹(shù)抗性研究進(jìn)展
        1.1 茶樹(shù)生物脅迫的研究進(jìn)展
        1.2 茶樹(shù)非生物脅迫的研究進(jìn)展
    2 植物miRNA研究進(jìn)展
        2.1 植物miRNA的生物合成
        2.2 植物miRNA的作用機(jī)理
        2.3 植物miRNA的研究方法
        2.4 MiRNA與植物抗性的應(yīng)答調(diào)控
            2.4.1 植物生物脅迫
            2.4.2 植物非生物脅迫
    3 MiR166家族的研究進(jìn)展
    4 本項(xiàng)目的意義及主要內(nèi)容
        4.1 本項(xiàng)目研究的意義
        4.2 本項(xiàng)目研究的主要內(nèi)容
第二章 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中主要生理生化成分變化
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 葉片含水量及土壤含水量測(cè)定方法
            1.2.2 葉片丙二醛含量測(cè)定方法
            1.2.3 葉片葉綠素含量測(cè)定方法
            1.2.4 葉片電導(dǎo)率測(cè)定方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中葉片及土壤含水量變化
        2.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中葉片葉綠素含量變化
        2.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中葉片丙二醛含量變化
        2.4 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中葉片電導(dǎo)率變化
    3 討論
第三章 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹(shù)不同干旱脅迫過(guò)程中的sRNA
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 鐵觀音茶樹(shù)葉片總RNA的提取方法
            1.2.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA文庫(kù)的構(gòu)建及Solexa測(cè)序
            1.2.3 鐵觀音茶樹(shù)分水處理過(guò)程中sRNA的生物信息學(xué)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹(shù)葉片總RNA的質(zhì)量檢測(cè)
        2.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA的數(shù)據(jù)注釋與分析
            2.2.1 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA的數(shù)據(jù)質(zhì)量及長(zhǎng)度分布
            2.2.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA公共及特有序列比對(duì)
            2.2.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA與分析數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)
            2.2.4 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中sRNA的分類注釋
        2.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中conserved miRNA數(shù)據(jù)分析
            2.3.1 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中conserved miRNA的差異分析
            2.3.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中conserved miRNA的靶基因預(yù)測(cè)
            2.3.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中conserved miRNA靶基因的GO功能預(yù)測(cè)
        2.4 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA的預(yù)測(cè)
            2.4.1 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA的首位堿基偏好性
            2.4.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA的差異分析
            2.4.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA的靶基因預(yù)測(cè)
            2.4.4 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA靶基因的GO功能預(yù)測(cè)
        2.5 參考鐵觀音茶樹(shù)轉(zhuǎn)錄組的sRNA數(shù)據(jù)分析
    3 討論
        3.1 鐵觀音茶樹(shù)與干旱脅迫相關(guān)miRNA數(shù)量較多
        3.2 鐵觀音茶樹(shù)與干旱脅迫相關(guān)的絕大部分miRNA為低豐度表達(dá)
        3.3 鐵觀音茶樹(shù)miRNA參與干旱脅迫的應(yīng)答
第四章 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中相關(guān)miRNA的定量表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 鐵觀音茶樹(shù)葉片總RNA的提取與質(zhì)量檢測(cè)
            1.2.2 鐵觀音茶樹(shù)葉片sRNA的加尾與cDNA合成
            1.2.3 鐵觀音茶樹(shù)葉片miRNA qPCR引物設(shè)計(jì)
            1.2.4 Roche LightCycler(?)480 qPCR擴(kuò)增
            1.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹(shù)葉片miRNA qPCR引物的特異性和擴(kuò)增效率分析
        2.2 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中conserved miRNA的定量表達(dá)分析
        2.3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中novel miRNA的定量表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 鐵觀音茶樹(shù)中存在與干旱脅迫協(xié)同變化的miRNA
        3.2 鐵觀音茶樹(shù)novel miRNA與干旱脅迫具有相關(guān)性
第五章 MiR166家族的靶基因克隆及定量表達(dá)分析
    1 MiR166家族的靶基因克隆
        1.1 材料與方法
            1.1.1 材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2 結(jié)果與分析
        1.3 討論
    2 MiR166家族靶基因的定量表達(dá)分析
        2.1 材料與方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 試驗(yàn)方法
        2.2 結(jié)果與分析
            2.2.1 MiR166家族靶基因的引物特異性與擴(kuò)增效率
            2.2.2 MiR166家族靶基因的定量表達(dá)分析
        2.3 討論
            2.3.1 ATHN-14-like及ATHN-15-like與miR166家族存在協(xié)同表達(dá)
            2.3.2 ATHN-15-like在鐵觀音茶樹(shù)中度干旱脅迫時(shí)的響應(yīng)最為顯著
第六章 總結(jié)
    1 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫的主要生化成分變化
    2 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中的sRNA
    3 鐵觀音茶樹(shù)干旱脅迫過(guò)程中相關(guān)miRNA的定量表達(dá)分析
    4 MiR166家族的靶基因克隆及定量表達(dá)分析
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與參加的會(huì)議及項(xiàng)目情況
致謝



本文編號(hào)：3786990