干旱是在我國(guó)主要產(chǎn)茶區(qū)普遍發(fā)生的主要自然災(zāi)害,且茶樹是一種葉用植物,其生長(zhǎng)的健康與否直接影響茶葉的品質(zhì)。愈來愈多的研究表明1nicroRNA (miRNA)在植物干旱脅迫響應(yīng)中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。為研究miRNA對(duì)鐵觀音茶樹干旱脅迫的相應(yīng)機(jī)制,本文采用補(bǔ)水稱重法,對(duì)干旱脅迫的鐵觀音茶樹進(jìn)行sRNA分離鑒定,對(duì)鐵觀音茶樹不同程度干旱脅迫過程中的部分相關(guān)miRNA進(jìn)行定量表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下：1鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中主要生化成分變化本研究采用補(bǔ)水稱重法對(duì)盆栽鐵觀音茶苗進(jìn)行正常供水(對(duì)照CK)、輕度干旱脅迫(T1)、中度干旱脅迫(T2)、重度干旱脅迫(T3)四組處理,研究發(fā)現(xiàn),隨著干旱脅迫程度的增強(qiáng),葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量的下降,葉片光合速率減弱。干旱脅迫程度的加劇引發(fā)植物的膜質(zhì)損傷,使植物葉片中MDA的含量增加,電解液外滲,電導(dǎo)率增強(qiáng)。當(dāng)鐵觀音茶樹遭受輕度干旱脅迫和中度干旱脅迫時(shí),鐵觀音茶樹葉片MDA含量略有增加,植物細(xì)胞電導(dǎo)率略微增強(qiáng)。當(dāng)鐵觀音茶樹遭受重度脅迫時(shí),葉片中MDA含量及葉片電導(dǎo)率增加趨勢(shì)明顯。2 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中的sRNA通...

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 茶樹抗性研究進(jìn)展
        1.1 茶樹生物脅迫的研究進(jìn)展
        1.2 茶樹非生物脅迫的研究進(jìn)展
    2 植物miRNA研究進(jìn)展
        2.1 植物miRNA的生物合成
        2.2 植物miRNA的作用機(jī)理
        2.3 植物miRNA的研究方法
        2.4 MiRNA與植物抗性的應(yīng)答調(diào)控
            2.4.1 植物生物脅迫
            2.4.2 植物非生物脅迫
    3 MiR166家族的研究進(jìn)展
    4 本項(xiàng)目的意義及主要內(nèi)容
        4.1 本項(xiàng)目研究的意義
        4.2 本項(xiàng)目研究的主要內(nèi)容
第二章 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中主要生理生化成分變化
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 葉片含水量及土壤含水量測(cè)定方法
            1.2.2 葉片丙二醛含量測(cè)定方法
            1.2.3 葉片葉綠素含量測(cè)定方法
            1.2.4 葉片電導(dǎo)率測(cè)定方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中葉片及土壤含水量變化
        2.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中葉片葉綠素含量變化
        2.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中葉片丙二醛含量變化
        2.4 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中葉片電導(dǎo)率變化
    3 討論
第三章 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹不同干旱脅迫過程中的sRNA
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 鐵觀音茶樹葉片總RNA的提取方法
            1.2.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA文庫(kù)的構(gòu)建及Solexa測(cè)序
            1.2.3 鐵觀音茶樹分水處理過程中sRNA的生物信息學(xué)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹葉片總RNA的質(zhì)量檢測(cè)
        2.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA的數(shù)據(jù)注釋與分析
            2.2.1 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA的數(shù)據(jù)質(zhì)量及長(zhǎng)度分布
            2.2.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA公共及特有序列比對(duì)
            2.2.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA與分析數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)
            2.2.4 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中sRNA的分類注釋
        2.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中conserved miRNA數(shù)據(jù)分析
            2.3.1 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中conserved miRNA的差異分析
            2.3.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中conserved miRNA的靶基因預(yù)測(cè)
            2.3.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中conserved miRNA靶基因的GO功能預(yù)測(cè)
        2.4 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA的預(yù)測(cè)
            2.4.1 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA的首位堿基偏好性
            2.4.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA的差異分析
            2.4.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA的靶基因預(yù)測(cè)
            2.4.4 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA靶基因的GO功能預(yù)測(cè)
        2.5 參考鐵觀音茶樹轉(zhuǎn)錄組的sRNA數(shù)據(jù)分析
    3 討論
        3.1 鐵觀音茶樹與干旱脅迫相關(guān)miRNA數(shù)量較多
        3.2 鐵觀音茶樹與干旱脅迫相關(guān)的絕大部分miRNA為低豐度表達(dá)
        3.3 鐵觀音茶樹miRNA參與干旱脅迫的應(yīng)答
第四章 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中相關(guān)miRNA的定量表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.2 試驗(yàn)主要試劑
            1.1.3 試驗(yàn)主要儀器
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 鐵觀音茶樹葉片總RNA的提取與質(zhì)量檢測(cè)
            1.2.2 鐵觀音茶樹葉片sRNA的加尾與cDNA合成
            1.2.3 鐵觀音茶樹葉片miRNA qPCR引物設(shè)計(jì)
            1.2.4 Roche LightCycler(?)480 qPCR擴(kuò)增
            1.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鐵觀音茶樹葉片miRNA qPCR引物的特異性和擴(kuò)增效率分析
        2.2 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中conserved miRNA的定量表達(dá)分析
        2.3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中novel miRNA的定量表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 鐵觀音茶樹中存在與干旱脅迫協(xié)同變化的miRNA
        3.2 鐵觀音茶樹novel miRNA與干旱脅迫具有相關(guān)性
第五章 MiR166家族的靶基因克隆及定量表達(dá)分析
    1 MiR166家族的靶基因克隆
        1.1 材料與方法
            1.1.1 材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2 結(jié)果與分析
        1.3 討論
    2 MiR166家族靶基因的定量表達(dá)分析
        2.1 材料與方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 試驗(yàn)方法
        2.2 結(jié)果與分析
            2.2.1 MiR166家族靶基因的引物特異性與擴(kuò)增效率
            2.2.2 MiR166家族靶基因的定量表達(dá)分析
        2.3 討論
            2.3.1 ATHN-14-like及ATHN-15-like與miR166家族存在協(xié)同表達(dá)
            2.3.2 ATHN-15-like在鐵觀音茶樹中度干旱脅迫時(shí)的響應(yīng)最為顯著
第六章 總結(jié)
    1 鐵觀音茶樹干旱脅迫的主要生化成分變化
    2 Solexa測(cè)序技術(shù)鑒定鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中的sRNA
    3 鐵觀音茶樹干旱脅迫過程中相關(guān)miRNA的定量表達(dá)分析
    4 MiR166家族的靶基因克隆及定量表達(dá)分析
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與參加的會(huì)議及項(xiàng)目情況
致謝



本文編號(hào)：3786990