神經(jīng)肽FF是屬于RFamide相關(guān)肽家族中的一種八肽,在多種生物過(guò)程中具有調(diào)節(jié)功能。本文克隆了小黃魚(yú)（Larimichthys polyactis）神經(jīng)肽FF相關(guān)基因（LpNPFF:Accession No.MT012894）及其兩種受體（LpNPFFR1:Accession No.MT012894和LpNPFFR2:Accession No.MT12896）。序列分析結(jié)果顯示小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF相關(guān)基因cDNA全長(zhǎng)835bp,開(kāi)放閱讀框（ORF）編碼了127個(gè)氨基酸殘基,包含一個(gè)21個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽和兩個(gè)成熟的PQRFamide肽,預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)相對(duì)分子量（MW）為29.8 kDa,等電點(diǎn)（pI）為5.90。LpNPFFR1和LpNPFFR2屬于典型的G蛋白偶聯(lián)受體家族,均具有7個(gè)跨膜區(qū)域,他們的ORF區(qū)域分別編碼了427和444個(gè)氨基酸殘基。多序列同源性比對(duì)與系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF及其兩種受體基因皆與大黃魚(yú)（Larimichthys crocea）的親緣關(guān)系最近;RT-PCR和RT-qPCR結(jié)果顯示,小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF及其受體基因在性未成熟期（第Ⅱ期）的小黃魚(yú)的腦和性腺... 

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 神經(jīng)肽FF相關(guān)研究進(jìn)展
    1.3 神經(jīng)肽FF受體相關(guān)研究進(jìn)展
    1.4 神經(jīng)肽FF相關(guān)功能
        1.4.1 神經(jīng)肽FF與生殖
        1.4.2 神經(jīng)肽FF相關(guān)調(diào)節(jié)因子
    1.5 研究的目的和意義
第二章 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF克隆與表達(dá)分析
    2.1 小黃神經(jīng)肽FF基因克隆及生物信息學(xué)分析
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1.4 討論
    2.2 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF基因組織表達(dá)特異性分析
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.4 討論
    2.3 LpNPFF在小黃魚(yú)腦和卵巢中m RNA的定位分析
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.4 討論
    2.4 FaRPs成熟肽在小黃魚(yú)腦和卵巢中的定位分析
        2.4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.4 討論
第三章 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF受體的克隆與表達(dá)分析
    3.1 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF受體基因克隆及生物信息學(xué)分析
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1.4 討論
    3.2 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF受體基因組織表達(dá)特異性分析
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.4 討論
第四章 小黃魚(yú)神經(jīng)肽FF功能初步研究
    4.1 LpNPFF對(duì) CHO-K1 細(xì)胞分泌蛋白活性的影響
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1.3 討論
    4.2 LpNPFF對(duì) RAW264.7 細(xì)胞分泌NO的影響
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.3 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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