昆蟲在長期演化過程中,形成了復(fù)雜的化學(xué)信息感知機(jī)制,高度發(fā)達(dá)的化學(xué)感受系統(tǒng)對(duì)于昆蟲與環(huán)境中的化學(xué)信息聯(lián)系具有重要作用�；瘜W(xué)感受蛋白（chemosensory proteins,CSPs）可以識(shí)別寄主植物氣味揮發(fā)物和信息素組分,在昆蟲的化學(xué)感受系統(tǒng)中起著非常重要的作用,但目前對(duì)于其在化學(xué)感受系統(tǒng)中作用的分子機(jī)制并不明確。小地老虎Agrotis ipsilon（Hufnagel）屬于鱗翅目夜蛾科昆蟲,近年來在我國的發(fā)生危害日趨嚴(yán)重,主要為害玉米、棉花、高粱、煙草和蔬菜等作物幼苗。對(duì)該蟲的化學(xué)感受蛋白的功能解析有助于探索其化學(xué)感受的分子機(jī)制,也可為利用信息素調(diào)節(jié)其種群密度和發(fā)生范圍提供理論依據(jù)。更重要的是,可以為我們提供新的方法如通過干擾信息素類物質(zhì)的識(shí)別過程對(duì)其進(jìn)行有效防治。本文通過RT-PCR克隆了AipsCSP2基因,通過分析該基因序列可知其開放閱讀框長度為360 bp,編碼119個(gè)氨基酸,推導(dǎo)的氨基酸序列中有4個(gè)保守的半胱氨酸,符合典型的化學(xué)感受蛋白的結(jié)構(gòu)特征;采用實(shí)時(shí)熒光定量qPCR技術(shù)研究了該基因在雌雄成蟲不同組織的表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)其在雌蟲的性腺和雄蟲的附腺中特異高表達(dá),在其他部位基... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１昆蟲識(shí)別氣味物質(zhì)的假設(shè)模型（Ｌｅａｌ．?２０１３）??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ?ｉｎ?ｏｌｆａｃｔｏｒｙ?ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ?ｉｎ?ｉｎｓｅｃｔｓ?（Ｌｅａｌ．?２０１３）??①氣味分子進(jìn)入感器淋巴液；②與氣味結(jié)合蛋白或化學(xué)感受蛋白結(jié)合：③ＯＢＰｓ／ＣＳＰｓ和氣味分子復(fù)合物共同激活??

?（ＡＮＳ）??Ｌ＇．ｘｃ．?３３７?ｎｍ．?Ｌ＇ｍ．?４０７－４１２?ｍｉｌ?Ｌｘｃ．?ｈ：?３８０?ｎｍ．?ｌｉｍ．?４６５?ｎｍ??ｌ??ＮＨ２?°?°??：丨：：Ｉ?丫：?、＿ｌ?°??ＯＨ??Ｉ?－?Ａｍｉｎｏａｎｔｈｒａｃｃｎｃ?＜?Ｉ?－?ＡＭＡ）?ｌ２－（＾－Ａｎｔｈｒｏｙｌ〇＼＼?ｓｔｅａｒｉｃ?ａｃｉｄ?（?ＡＳＡ）??／ｉｘｔ?２５６．?２８０．?２Ｖ５?ｎｍ．?／？；；？．?４Ｋ７－４９２?ｎｍ?３６０?ｎｍ．?Ｆｍｉ?ｋ：?４２５?ｎｍ??圖２化學(xué)感受蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)中常用探針化學(xué)結(jié)構(gòu)和熒光特性（Ｇｕ．?２０１３）??Ｆｉｇ．２?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ａｎｄ?ｓｐｅｃｔｒａｌ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｐｒｏｂｅｓ?ｕｓｅｄ?ｉｎ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ｃｈｅｍｏｓｅｓｏｒ＞，??ｐｒｏｔｅｉｎｓ??１．３研究目的和意義??小地老虎ｄｇｒｏ／／．ｙ／／？７７ｏ？?（Ｈｕｆｎａｇｅｌ）屬于鱗翅目夜蛾科昆蟲。其別名有地蠶、土??蠶、黑地蠶、黑土蠶、地剪、切根蟲等，近些年來在我國的發(fā)生危害程度日趨嚴(yán)重，??已經(jīng)成為全國性的農(nóng)業(yè)重要害蟲［６８】，其主要為害作物有玉米、棉花、高粱、煙草和蔬??菜等，同時(shí)也為害果園、花卉苗圃及草坪。小地老虎主要以幼蟲造成危害，白天潛伏??在土中，夜晚出來咬食作物幼苗接近地面的莖部，使整株死亡，造成缺苗斷壟，嚴(yán)重??時(shí)甚至?xí)䴕ХN［６９?７（）］。據(jù)報(bào)道，２０１０年青海省牧草良種繁殖場(chǎng)發(fā)生大面積小地老虎蟲??害，蟲害發(fā)生面積１０萬畝，人工草地蟲害最高密度達(dá)每平方米８６７頭，對(duì)該場(chǎng)種子??基地和退耕還

?河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位（畢業(yè)）論文???３結(jié)果和分析??３．１小地老虎的基因克隆??３．１．１提�。遥危翗悠窓z測(cè)??取２ＭＬ提取的小地老虎羽化后４天的雌雄成蟲的頭部（去除觸角）、胸部、腹部（去??除性腺或附腺）、足、翅、觸角、喙、下唇須、性腺及附腺組織ＲＮＡ樣品和雌成蟲羽??化后０￣６的性腺組織ＲＮＡ樣品進(jìn)行瓊脂糖凝膠檢測(cè)（見圖３，圖４，圖５），電泳條??帶清晰，另取２＾Ｌ用微量分光光度計(jì)測(cè)定濃度及ＯＤ２６０／２８０比值，結(jié)果表明，ＲＮＡ質(zhì)??量及完整性較好，所提�。遥危恋模希模玻叮埃玻福氨戎翟冢保�？２．０之間，純度較高，可以??用于后續(xù)的基因克隆工作。??Ｍｌ?２?３?４?５?６?７?８??．＾Ｓ：?ｍｉｌ??圖３小地老虎雌成蟲組織ＲＮＡ樣品檢測(cè)??Ｆｉｇ．３?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅｓ?ｆｒｏｍ?ｆｅｍａｌｅ?ａｄｕｌｔｓ?ｏｆ?Ａｇｒｏｔｉｓ?ｉｐｓｉｌｏｎ??Ｍ：?ＭａｒｋｅｒＤ２０００；丨：頭（去除觸角）；２：胸；３：足；４：翅；５：觸角；６：喙；７：下唇須；８：腹（去除性腺）??１?２３４５６７８９?１０?１Ｍ２?１３?１４?１５?１６?１７?Ｍ??：、、￣＾?丨：：??５Ｓ?＾?冗?＿雲(yún)馨｜廠；＇：ｌ■蚊．．?＿ｉ｜ｉ｜??圖４小地老虎雄成蟲組織提�。遥危翗悠窓z測(cè)??Ｆｉｇ．４?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅｓ?ｆｒｏｍ?ｍａｌｅ?ａｄｕｌｔｓ?〇｛Ａｇｒｏｔｉｓ?ｉｐｓｉｌｏｎ??１：頭（去除觸角）；２：胸；３：腹（去除附腺）；４：足；５：翅；６－８：附腺；９－１１：觸角；１２－１４：喙；１５－１７：下??唇須；Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ?Ｄ２０００??２０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3597558