紅花（Carthamus tinctorius L.）,為菊科紅花屬草本植物。目前,全世界菊科紅花屬植物約有25種,而在我國,僅有紅花一種。紅花具有較強的抗旱和抗寒的能力,主要栽種于我國河南、新疆、四川、浙江等地區(qū)。轉(zhuǎn)錄因子Dof是植物所特有的一類轉(zhuǎn)錄因子,能夠響應光的應答,參與代謝調(diào)節(jié),從而影響種子的萌發(fā)和成熟,還能夠參與抗逆反應,提高植物的抗性等,在植物的生長發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。本研究以“吉紅一號”紅花為實驗材料,克隆CtDof基因,對其在不同組織及種子不同發(fā)育階段的表達水平進行分析,同時構(gòu)建超表達載體轉(zhuǎn)化擬南芥,鑒定其功能。主要研究結(jié)果如下:1.在紅花不同組織部位之間,紅花Dof基因家族中的Unigene100791基因（CtDof1）的相對表達量最高,尤其是在成熟種子中,Unigene100791基因的相對表達量分別是Unigene39146基因的12.2倍,Unigene41817基因的2.2倍,Unigene71654基因的1.8倍,Unigene97057基因的3.9倍;在種子發(fā)育16天時Unigene100791基因的相對表達量最高,分別是Unigene3914... 

【文章來源】：長春師范大學吉林省

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 紅花的簡述
        1.1.1 紅花的起源與分布
        1.1.2 紅花主要的化學成分及藥理活性
        1.1.3 紅花的應用
    1.2 轉(zhuǎn)錄因子的概述
        1.2.1 轉(zhuǎn)錄因子的定義
        1.2.2 轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 轉(zhuǎn)錄因子的生物學功能
    1.3 Dof轉(zhuǎn)錄因子的概述
        1.3.1 Dof轉(zhuǎn)錄因子的定義
        1.3.2 Dof轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征
        1.3.3 Dof轉(zhuǎn)錄因子的生物學功能
    1.4 研究的內(nèi)容與意義
第2章 紅花CtDof基因家族的表達分析
    2.1 前言
    2.2 實驗材料、試劑和儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 實時熒光定量PCR引物的設計
        2.3.2 實時熒光定量PCR反應cDNA的制備
        2.3.3 Real-Time PCR反應體系及反應條件
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 紅花CtDof基因熒光定量PCR的擴增效率考察
        2.4.2 在紅花不同組織部位的相對表達量
        2.4.3 在紅花種子不同發(fā)育時期的相對表達量
    2.5 討論
第3章 紅花CtDof1基因的克隆及生物信息學分析
    3.1 前言
    3.2 實驗材料、試劑和儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 總RNA的提取
        3.3.2 總RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        3.3.3 紅花CtDof1中間片段的克隆
        3.3.4 紅花CtDof13’末端的克隆
        3.3.5 紅花CtDof1基因的克隆
        3.3.6 紅花CtDof1基因的生物信息學分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 紅花種子總RNA的檢測
        3.4.2 紅花CtDof1基因中間片段在紅花基因組中的驗證
        3.4.3 紅花CtDof1基因 3’RACE的克隆
        3.4.4 紅花CtDof1基因全長基因的克隆
        3.4.5 紅花CtDof1基因及編碼蛋白的生物信息學分析
    3.5 討論
第4章 紅花CtDof1基因的功能驗證
    4.1 前言
    4.2 實驗材料、試劑和儀器
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗試劑
        4.2.3 實驗儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 目的基因引物的設計
        4.3.2 目的基因的克隆
        4.3.3 紅花CtDof1基因植物超表達載體的連接
        4.3.4 紅花CtDof1基因在植物中的超表達
        4.3.5 CtDof1轉(zhuǎn)基因擬南芥在鹽脅迫應答中的功能
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 紅花CtDof1基因植物超表達載體的構(gòu)建
        4.4.2 紅花CtDof1基因在擬南芥中的超表達
        4.4.3 紅花CtDof1基因在紅花中的超表達
        4.4.4 CtDof1轉(zhuǎn)基因擬南芥在鹽脅迫應答中的功能
    4.5 討論
第5章 紅花CtDof1基因原核表達載體的構(gòu)建及誘導分析
    5.1 前言
    5.2 實驗材料、試劑和儀器
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗試劑
        5.2.3 實驗儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 目的基因引物的設計
        5.3.2 紅花CtDof1基因原核表達載體的構(gòu)建
        5.3.3 紅花CtDof1基因的誘導表達
        5.3.4 誘導表達的產(chǎn)物檢測
    5.4 結(jié)果與分析
    5.5 討論
結(jié)論
參考文獻
作者在攻讀碩士學位期間主要研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3530529