發(fā)布時(shí)間：2021-12-09 04:47

　　植物內(nèi)生真菌是一類存在于宿主植物組織內(nèi),卻又不引起植物病害的微生物,它們?cè)陂L(zhǎng)期的共同進(jìn)化過程中與宿主形成了趨于穩(wěn)定的互惠共生關(guān)系。植物內(nèi)生真菌是具有高度多樣性的微生物資源,能產(chǎn)生多種不同藥效價(jià)值的次生代謝活性產(chǎn)物,是一類具備良好開發(fā)價(jià)值的微生物,可作為抗菌、抗氧化及抗癌等天然藥物的潛在來源。由于內(nèi)生真菌具備抗菌活性,有望成為微生物農(nóng)藥制劑的重要來源,這對(duì)于農(nóng)業(yè)病蟲害的生物防治也將產(chǎn)生重要意義。本文以瓦布貝母內(nèi)生真菌作為研究對(duì)象,對(duì)菌株及其次生代謝產(chǎn)物的抑菌活性進(jìn)行了篩選,并對(duì)具有高效廣譜抑菌活性的內(nèi)生真菌菌株進(jìn)行了菌種鑒定和發(fā)酵條件的優(yōu)化。主要研究結(jié)果包括以下幾個(gè)方面：1、對(duì)分離自瓦布貝母鱗莖的50株內(nèi)生真菌進(jìn)行了抑菌活性的多重篩選。首先運(yùn)用菌餅法,將4種指示細(xì)菌（革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌）和1種指示真菌作為指示菌,對(duì)50株內(nèi)生真菌進(jìn)行了抑菌活性的初篩,其中有41株內(nèi)生真菌對(duì)一種以上指示菌具有抑制作用,占菌株總數(shù)的82.00%；有23株內(nèi)生真菌對(duì)三種以上指示菌具有抑制作用,占菌株總數(shù)的46.00%。采用雙層平板法,將上述試驗(yàn)中對(duì)三種以上指示菌具有抑制作用的23株內(nèi)生真菌進(jìn)行抑菌活性的復(fù)... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 貝母概述
        1.1.1 貝母的活性成分
        1.1.2 貝母的藥用價(jià)值
    1.2 植物內(nèi)生真菌起源及研究進(jìn)展
    1.3 植物內(nèi)生真菌的多樣性
        1.3.1 種類多樣性
        1.3.2 分布多樣性
        1.3.3 形態(tài)多樣性
        1.3.4 宿主多樣性
    1.4 內(nèi)生真菌與宿主植物的關(guān)系
    1.5 植物內(nèi)生真菌的次生代謝產(chǎn)物
        1.5.1 抗腫瘤活性物質(zhì)
        1.5.2 抗菌活性物質(zhì)
        1.5.3 抗氧化活性物質(zhì)
        1.5.4 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)
    1.6 植物內(nèi)生真菌的生物學(xué)特性和應(yīng)用價(jià)值
        1.6.1 促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育
        1.6.2 增強(qiáng)植物抗性
        1.6.3 生物防治
        1.6.4 天然藥物的新來源
    1.7 貝母內(nèi)生真菌研究進(jìn)展
2 立題依據(jù)
3 材料與方法
    3.1 供試材料
        3.1.1 內(nèi)生真菌菌株
        3.1.2 供試指示菌
        3.1.3 培養(yǎng)基
            3.1.3.1 所需培養(yǎng)基
            3.1.3.2 培養(yǎng)基成分及配制
        3.1.4 主要試劑
        3.1.5 主要儀器
    3.2 內(nèi)生真菌的純培養(yǎng)
    3.3 內(nèi)生真菌的液體培養(yǎng)與發(fā)酵產(chǎn)物的處理
    3.4 抑菌活性的測(cè)定
        3.4.1 初篩
        3.4.2 復(fù)篩
            3.4.2.1 雙層平板法
            3.4.2.2 平皿打孔法
        3.4.3 擴(kuò)大篩選
    3.5 生物活性測(cè)定
        3.5.1 不同提取部位的制備
        3.5.2 不同提取部位的抑菌活性測(cè)定
    3.6 內(nèi)生真菌的鑒定
        3.6.1 形態(tài)學(xué)鑒定
        3.6.2 分子生物學(xué)鑒定
            3.6.2.1 DNA的提取
            3.6.2.2 PCR反應(yīng)
            3.6.2.3 聚類分析
    3.7 發(fā)酵條件的優(yōu)化
        3.7.1 培養(yǎng)基的優(yōu)化
            3.7.1.1 固體培養(yǎng)基的優(yōu)化
            3.7.1.2 液體培養(yǎng)基的優(yōu)化
        3.7.2 發(fā)酵條件的優(yōu)化
            3.7.2.1 最佳接種量的選擇
            3.7.2.2 最佳培養(yǎng)溫度的選擇
            3.7.2.3 最佳起始pH的選擇
            3.7.2.4 最佳培養(yǎng)時(shí)間的選擇
4 結(jié)果與分析
    4.1 瓦布貝母內(nèi)生真菌的抑菌活性
        4.1.1 菌餅法初篩結(jié)果
        4.1.2 雙層平板法復(fù)篩結(jié)果
        4.1.3 平皿打孔法復(fù)篩結(jié)果
        4.1.4 平皿打孔法擴(kuò)大病原菌種類篩選結(jié)果
    4.2 活性菌株不同提取部位的抑菌活性
    4.3 活性菌株的分類鑒定
        4.3.1 形態(tài)鑒定結(jié)果
        4.3.2 ITS序列分析
        4.3.3 活性菌株分類地位
    4.4 發(fā)酵條件的優(yōu)化
        4.4.1 固體培養(yǎng)基篩選結(jié)果
        4.4.2 發(fā)酵培養(yǎng)基篩選結(jié)果
5 結(jié)論與討論
    5.1 瓦布貝母內(nèi)生真菌的抑菌活性
    5.2 活性菌株的分類鑒定
    5.3 發(fā)酵條件的優(yōu)化
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
專利申請(qǐng)情況



本文編號(hào)：3529947