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長(zhǎng)蛸餌料分子學(xué)鑒定與人工繁育研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-09 11:07

  本文關(guān)鍵詞:長(zhǎng)蛸餌料分子學(xué)鑒定與人工繁育研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:長(zhǎng)蛸(Octopus minor)廣泛分布于我國(guó)南北沿海,為習(xí)見頭足類,也是我國(guó)北方重要的出口經(jīng)濟(jì)蛸類。近年來(lái),由于環(huán)境惡化和過度捕撈,長(zhǎng)蛸的漁獲量日益下降,開展長(zhǎng)蛸繁育生物學(xué)和養(yǎng)殖技術(shù)研究具有現(xiàn)實(shí)意義。本文以長(zhǎng)蛸為研究對(duì)象,研究了基礎(chǔ)生物學(xué)和人工繁育技術(shù),包括長(zhǎng)蛸性成熟期間的餌料種類分子學(xué)鑒定、多雄交配策略研究、受精卵采集與孵化以及幼體培育等,旨在為長(zhǎng)蛸增養(yǎng)殖、種質(zhì)資源保護(hù)與合理開發(fā)提供理論技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:1.長(zhǎng)蛸性成熟期間餌料分子學(xué)鑒定2014年4-7月每月中旬,在山東榮成月湖分別采捕雄雌長(zhǎng)蛸各20-25只。經(jīng)解剖測(cè)量與組織學(xué)觀察,結(jié)果發(fā)現(xiàn):4月份雄性已性成熟,雌性處于卵黃合成期,性腺指數(shù)從0.010(4月份)顯著上升至0.106(7月份);各月份雄性體重均大于雌性,雌雄體重在4、5月份間和6、7月份間差異不明顯,然而在5到6月份之間都有明顯的增長(zhǎng)(P0.05),平均體重分別由117.29g、192.4g增加到128.68g、202.88g;除去性腺和消化系統(tǒng)剩余組織重量的變化趨勢(shì)與體重一致;雌雄個(gè)體的內(nèi)臟團(tuán)重沒有明顯變化;雌性每月平均食糜重均大于雄性食糜重,雌雄兩組空胃率平均為50%和73.26%,表明雌性個(gè)體在4-7月份的攝食強(qiáng)度高于雄性個(gè)體。采用DNA條形碼技術(shù)擴(kuò)增了長(zhǎng)蛸胃含物mtCOI序列,成功率達(dá)87.88%,擴(kuò)增片段在556-708bp,分析結(jié)果顯示胃含物中最多的種類是黃鰭刺蝦虎魚(占31.03%),其次是矛尾復(fù)蝦虎魚(12.07%),其余的種類占18.97%,分別為粗棘云鰣,紋縞蝦虎魚,巢沙蠶,短脊鼓蝦,口蝦蛄,日本蝎等6個(gè)種類。同時(shí),在胃含物餌料組成的鑒定中還鑒定出了一種寄生蟲外和長(zhǎng)蛸本物種,并對(duì)長(zhǎng)蛸殘食進(jìn)行了分析。2.長(zhǎng)蛸多雄交配策略研究2012年6-8月份在山東榮成月湖采捕雌蛸親體暫養(yǎng)于室內(nèi)產(chǎn)卵。待到胚胎發(fā)育到紅眼期開始取樣,選取10個(gè)家系(B1-B10):每個(gè)家系中包括15個(gè)子代以及對(duì)應(yīng)的母本肌肉。選用已開發(fā)的微衛(wèi)星位點(diǎn)OM02,OM03,OM04, OM05, OM07和OM08對(duì)所有個(gè)體進(jìn)行擴(kuò)增。由于OM02位點(diǎn)含有無(wú)效等位基因、多樣性低以及與位點(diǎn)OM05連鎖不平衡等原因,使用其余5對(duì)微衛(wèi)星引物進(jìn)行長(zhǎng)蛸多雄交配策略的分子學(xué)鑒定。結(jié)果顯示: 10組家系中6組具多父性(占到60%);使用GERUD計(jì)算結(jié)果顯示家系中子代共享最小父本數(shù)為1-3個(gè),父本的基因型都不同:家系B2、B3、B4和B9中子代共享一個(gè)父本,其余家系具有多父性。多父家系中有4組(占多父組66.7%)出現(xiàn)顯著的繁殖偏歧,并且在這4家系中存在一個(gè)父本的子代占到組中子代總數(shù)的50%以上,這表明長(zhǎng)蛸存在精子競(jìng)爭(zhēng)現(xiàn)象或是雌性親本有選擇精子的現(xiàn)象。3.長(zhǎng)蛸孵化與幼體培育本節(jié)改進(jìn)了之前的采卵器,并進(jìn)行了長(zhǎng)蛸幼體的培育。根據(jù)長(zhǎng)蛸的野外巢穴“寬進(jìn)口窄出口”的構(gòu)造和長(zhǎng)蛸喜打斗的習(xí)性改進(jìn)了之前使用的采卵器。改用套網(wǎng)的方法封住采卵器的一端,將即將產(chǎn)卵的親體分離,減少其爭(zhēng)斗,有效的提高了收集受精卵的數(shù)量,為改進(jìn)前的2.71倍。采用光滑河藍(lán)蛤和菲律賓蛤仔培養(yǎng)長(zhǎng)蛸初孵幼體,分析其生長(zhǎng)和存活情況。結(jié)果顯示:長(zhǎng)蛸初孵幼體無(wú)外卵黃,體表光滑,第一對(duì)腕(最長(zhǎng)腕)約為胴長(zhǎng)的2.9倍,第1-4對(duì)腕平均吸盤數(shù)(n=3)分別為66±4.60、55±3.76、43±4.59和41±3.82;1-15d幼體投喂的是藍(lán)蛤(殼長(zhǎng)15.4-20.3mm),之后投喂菲律賓蛤仔(殼長(zhǎng)33.2-39.3mm);幼體30d-70d總成活率由80.99%降至54.65%;整個(gè)培育過程中,幼體生長(zhǎng)率與餌料效率呈極顯著線性回歸關(guān)系(P0.01),y:1.452x-2.731(R2=0.865);1-80d胴長(zhǎng)/全長(zhǎng)比增幅高于腕長(zhǎng)/全長(zhǎng),表明胴體增長(zhǎng)快于腕的增長(zhǎng);各腕吸盤數(shù)變化不顯著;幼體鮮重與培養(yǎng)天數(shù)呈指數(shù)函數(shù)關(guān)系,Wt=0.301e0.010t(R2=0.854,P0.01,);幼體最終生長(zhǎng)率122.05%,平均生長(zhǎng)率9.97%/旬。
【關(guān)鍵詞】:長(zhǎng)蛸 胃含物 餌料鑒定 多雄交配 DNA條形碼 幼體培育
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S917.4
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-13
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述13-23
  • 第一節(jié) 頭足類養(yǎng)殖技術(shù)現(xiàn)狀13-18
  • 1.1 頭足類簡(jiǎn)介13
  • 1.2 頭足類養(yǎng)殖現(xiàn)狀13-18
  • 第二節(jié) 頭足類餌料18-20
  • 2.1 頭足類的天然餌料18-19
  • 2.2 頭足類人工配合餌料進(jìn)展19-20
  • 第三節(jié) 長(zhǎng)蛸研究進(jìn)展20-22
  • 3.1 長(zhǎng)蛸分類地位20
  • 3.2 長(zhǎng)蛸研究進(jìn)展20-22
  • 第四節(jié) 立論依據(jù)和研究意義22-23
  • 第二章 長(zhǎng)蛸性成熟期餌料分子學(xué)鑒定23-36
  • 0 前言23-24
  • 1 材料和方法24-26
  • 1.1 樣品采集24
  • 1.2 數(shù)據(jù)分析24
  • 1.3 組織學(xué)觀察24-25
  • 1.4 DNA的提取與擴(kuò)增25-26
  • 2 結(jié)果26-33
  • 2.1 性成熟和性腺指數(shù)26
  • 2.2 長(zhǎng)蛸成體體重變化26-27
  • 2.3 長(zhǎng)蛸攝食強(qiáng)度27-28
  • 2.4 消化腺重Wdg和體重TWt的關(guān)系28
  • 2.5 餌料組成種類的分子鑒定28-33
  • 3 討論33-36
  • 3.1 長(zhǎng)蛸性成熟與攝食強(qiáng)度關(guān)系33-34
  • 3.2 餌料組成34-35
  • 3.3 種內(nèi)互殘現(xiàn)象35-36
  • 第三章 長(zhǎng)蛸多雄交配繁殖策略研究36-45
  • 0 引言36-38
  • 1 材料和方法38-40
  • 1.1 樣品采集38-39
  • 1.2 DNA的提取與擴(kuò)增39
  • 1.3 數(shù)據(jù)分析39-40
  • 2 結(jié)果40-42
  • 3 討論42-45
  • 第四章 長(zhǎng)蛸孵化與幼體培育45-57
  • 第一節(jié) 長(zhǎng)蛸受精卵采集與孵化45-50
  • 0 前言45-46
  • 1 材料與方法46-48
  • 1.1 采卵器結(jié)構(gòu)46
  • 1.2 應(yīng)用說(shuō)明及操作過程46-48
  • 2 討論48-49
  • 3 小結(jié)49-50
  • 第二節(jié) 長(zhǎng)蛸初孵幼體培育與生長(zhǎng)研究50-57
  • 0 引言50
  • 1 材料與方法50-51
  • 1.1 親蛸采捕繁育和孵化50
  • 1.2 幼體培育50-51
  • 1.3 數(shù)據(jù)分析51
  • 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果51-55
  • 2.1 初孵幼體生物特征51-52
  • 2.2 幼體攝食行為與成活率52
  • 2.3 幼體生長(zhǎng)52-53
  • 2.4 幼體餌料效率、攝食率和生長(zhǎng)率53-54
  • 2.5 幼體鮮重與培養(yǎng)天數(shù)的關(guān)系54-55
  • 2.6 遮蔽物的優(yōu)劣55
  • 3 討論55-57
  • 3.1 幼體遮蔽物的選擇55
  • 3.2 幼體生長(zhǎng)與餌料選用55-56
  • 3.3 幼體生長(zhǎng)特征和互殘現(xiàn)象56-57
  • 參考文獻(xiàn)57-71
  • 碩士期間的學(xué)術(shù)成果71-72
  • 致謝72

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本文編號(hào):352359

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