大豆異黃酮屬于植物雌激素,其化學(xué)結(jié)構(gòu)與哺乳動(dòng)物雌激素17-β雌二醇相似,與雌激素受體（ER）結(jié)合,發(fā)揮類雌激素樣活性,能清除自由基,抑制過氧化損傷并具有神經(jīng)保護(hù)功能。有研究表明,大豆異黃酮能促進(jìn)細(xì)胞增殖。為了進(jìn)一步研究大豆異黃酮對(duì)牦牛顆粒細(xì)胞增殖與凋亡的影響,本試驗(yàn)分離培養(yǎng)牦牛卵巢顆粒細(xì)胞,添加不同濃度大豆苷元、染料木素、17-β雌二醇和孕激素,MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,Elisa法檢測(cè)顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中雌激素和孕激素濃度,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)顆粒細(xì)胞中增殖相關(guān)基因AKT1和凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Bad、p53、Fas、FasL和Caspase-3mRNA的表達(dá),研究?jī)?nèi)容如下:1.牦牛卵巢顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定。采集健康母牦牛卵巢,抽吸卵泡液,離心,細(xì)胞懸液置于37℃、5%CO₂飽和濕度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)FSHR。結(jié)果:分離培養(yǎng)的顆粒細(xì)胞呈單層上皮樣貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)完整,多呈長(zhǎng)梭形、多邊形。生長(zhǎng)曲線呈“S”型,細(xì)胞培養(yǎng)至24h時(shí)生長(zhǎng)緩慢,處于潛伏生長(zhǎng)期;24h-48h細(xì)胞分裂旺盛、增殖快,進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期;48h-120h細(xì)胞平穩(wěn)增殖,... 

【文章來源】：西北民族大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

牦牛卵巢顆粒細(xì)A、B：牦牛顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)24h；C、D：牦牛顆粒細(xì)K

西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2017級(jí)碩士研究生畢業(yè)論文13圖2-2卵巢顆粒細(xì)胞HE染色形態(tài)觀察A：HE染色×100B:HE染色×400Figure2-2ObservationofHEstainingofovariangranulosacellsA:HEstaining×100B:HEstaining×400圖2-3牦牛卵巢顆粒細(xì)胞FSHR免疫細(xì)胞化學(xué)染色A：陰性對(duì)照組×100;B：實(shí)驗(yàn)組×100;C：陰性對(duì)照×400;D：實(shí)驗(yàn)組×400Figure2-3ImmunohistochemicalstainingofFSHRinyakovariangranulosacellsA:negativecontrol×100;B:testingforFSHR×100;C:negativecontrol×400;D:testingforFSHR×400ABDABC

西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2017級(jí)碩士研究生畢業(yè)論文13圖2-2卵巢顆粒細(xì)胞HE染色形態(tài)觀察A：HE染色×100B:HE染色×400Figure2-2ObservationofHEstainingofovariangranulosacellsA:HEstaining×100B:HEstaining×400圖2-3牦牛卵巢顆粒細(xì)胞FSHR免疫細(xì)胞化學(xué)染色A：陰性對(duì)照組×100;B：實(shí)驗(yàn)組×100;C：陰性對(duì)照×400;D：實(shí)驗(yàn)組×400Figure2-3ImmunohistochemicalstainingofFSHRinyakovariangranulosacellsA:negativecontrol×100;B:testingforFSHR×100;C:negativecontrol×400;D:testingforFSHR×400ABDABC

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]甘南牦牛繁殖性能調(diào)查及提高繁殖性能的技術(shù)措施[J]. 石紅梅,楊勤,馬登錄,丁考仁青,祁紅霞.  中國(guó)牛業(yè)科學(xué). 2013(01)
[2]論牦牛繁殖性能低下的原因分析及對(duì)策[J]. 王偉.  青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2011(06)
[3]哺乳動(dòng)物卵泡顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)研究概況[J]. 楊永梅,陳娟,陳洋,楊雨江,鞏俊銘,姜懷志.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(03)
[4]卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控因素[J]. 劉鵬,李向臣,姚雅馨,喬利敏,關(guān)偉軍,馬月輝.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(13)
[5]大豆異黃酮的雌激素樣作用研究[J]. 張文眾,李寧,李蓉.  衛(wèi)生研究. 2008(06)
[6]大鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)及分泌產(chǎn)物測(cè)定條件的研究[J]. 劉英華,王靜,王曉軍,謝永玲.  毒理學(xué)雜志. 2008(05)
[7]牦牛繁殖科學(xué)研究進(jìn)展[J]. 字向東,鐘金城.  西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(01)
[8]大豆異黃酮雌激素樣作用研究進(jìn)展[J]. 張峻.  中國(guó)藥師. 2006(04)
[9]大豆異黃酮對(duì)氧化損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗氧化作用(英文)[J]. 劉英華,黃國(guó)偉,常紅,劉莉,任大林,薛長(zhǎng)勇.  中國(guó)臨床康復(fù). 2006(11)
[10]大豆異黃酮對(duì)小鼠抗氧化酶活性的影響[J]. 劉賀榮,李國(guó)莉,劉秀英,任彬彬,張居慧,劉瑛.  寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2005(03)

博士論文
[1]幾種生殖激素對(duì)體外培養(yǎng)的牦牛卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響[D]. 楊世華.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002

碩士論文
[1]生殖激素對(duì)體外培養(yǎng)的水牛卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響研究[D]. 李彩萍.廣西大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3511676