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成年枇杷葉柄及葉脈培養(yǎng)中防止褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的研究

發(fā)布時間:2017-05-08 11:11

  本文關(guān)鍵詞:成年枇杷葉柄及葉脈培養(yǎng)中防止褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本研究以十年生‘大五星’枇杷樹的幼嫩葉片為試材,對葉柄及葉脈離體培養(yǎng)中褐化控制、愈傷組織誘導(dǎo)及愈傷組織繼代培養(yǎng)進行了研究。研究內(nèi)容包括:外植體表面滅菌方法、葉齡選擇、葉柄及葉脈部位選擇、葉片4℃低溫處理、MS培養(yǎng)基(大量元素)濃度、抗褐化物質(zhì)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、生長調(diào)節(jié)劑的濃度、暗培養(yǎng)、低溫培養(yǎng)、轉(zhuǎn)瓶以及愈傷組織繼代培養(yǎng)。主要研究結(jié)果如下:1.外植體表面滅菌以75%酒精消毒時間為10s、0.1%升汞消毒時間為8min時,滅菌效果最好。此時葉柄及葉脈污染率和褐化率均較低,分別為14.44%和8.89%,而葉柄及葉脈成活率、愈傷組織誘導(dǎo)率較高,均為76.67%。2.葉齡及部位選擇:中度成熟(10d)葉片的葉柄為最理想的材料,成活率、愈傷組織誘導(dǎo)率較高,分別為55.56%、53.33%,且誘導(dǎo)的愈傷組織結(jié)構(gòu)較緊密,淡綠色,生理狀態(tài)較好。3.最佳抗褐化處理:以在1/8MS培養(yǎng)基,PVP1.5mg/L,接種前不經(jīng)過4℃低溫處理的組合下,褐化率最低,為11.11%,存活率和愈傷組織發(fā)生率最高,分別為80.00%、77.78%。4.枇杷葉柄及葉脈初代培養(yǎng)的最佳配方為:MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+ NAA0.4mg/L,在此配方中葉柄及葉脈褐化率較低,為17.78%,存活率和愈傷組織發(fā)生率最高,均為72.22%。5.外植體最佳的培養(yǎng)條件及轉(zhuǎn)瓶時間為:外植體接種后在20℃溫度下培養(yǎng),暗培養(yǎng)兩周,5d轉(zhuǎn)瓶一次,其褐化率最低,存活率和愈傷組織發(fā)生率最高,分別為15.74%、75.82%、69.93%。6.愈傷組織最佳的繼代培養(yǎng)配方為:MS(1/2N)+TDZ1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+ AgNO3 0.2mg/L,在此培養(yǎng)基中愈傷組織顆粒大小居中,表面局部突起最多,結(jié)構(gòu)較致密,深綠色,表面有少量白色顆粒,無褐化。
【關(guān)鍵詞】:枇杷 葉脈及葉柄 褐化
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S667.3
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-7
  • 縮略詞7-10
  • 前言10
  • 1 文獻綜述10-17
  • 1.1 枇杷組織培養(yǎng)研究概況10
  • 1.2 枇杷葉片、葉柄及葉脈組織培養(yǎng)概況10-11
  • 1.3 葉片離體再生的研究概況11
  • 1.3.1 基本培養(yǎng)基11
  • 1.3.2 生長調(diào)節(jié)劑11
  • 1.4 組織培養(yǎng)中的褐化問題及防治措施11-17
  • 1.4.1 褐化現(xiàn)象及機理11-12
  • 1.4.1.1 褐化現(xiàn)象11-12
  • 1.4.1.2 褐化機理12
  • 1.4.2 影響褐化的因素12-15
  • 1.4.2.1 基因型12-13
  • 1.4.2.2 外植體的生理狀態(tài)13-14
  • 1.4.2.3 培養(yǎng)基14
  • 1.4.2.4 培養(yǎng)條件14-15
  • 1.4.2.5 防褐劑15
  • 1.4.3 防止褐化的措施15-17
  • 1.4.3.1 母株及外植體預(yù)處理15
  • 1.4.3.2 選擇適宜的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件15-16
  • 1.4.3.3 培養(yǎng)基中加入防褐化物質(zhì)16-17
  • 1.4.3.4 連續(xù)轉(zhuǎn)移外植體17
  • 2 本研究的目的及意義17
  • 3 材料與方法17-25
  • 3.1 供試材料17-18
  • 3.2 方法18-25
  • 3.2.1 外植體表面滅菌處理18
  • 3.2.2 接種18
  • 3.2.3 酒精和升汞組合最佳滅菌時間的篩選18-19
  • 3.2.4 葉片成熟度及葉柄、葉脈部位對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響19-20
  • 3.2.5 褐化防止20-21
  • 3.2.6 生長調(diào)節(jié)劑及濃度組合對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響21-23
  • 3.2.7 接種后的培養(yǎng)溫度、暗培養(yǎng)時間及轉(zhuǎn)瓶時間對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響23-24
  • 3.2.8 葉柄及葉脈愈傷組織的繼代培養(yǎng)24-25
  • 3.3 培養(yǎng)條件25
  • 3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析25
  • 4 結(jié)果與分析25-34
  • 4.1 酒精和升汞組合最佳滅菌時間對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響25-27
  • 4.2 葉片成熟度及葉柄、葉脈不同部位對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響27-28
  • 4.3 不同的防褐化條件對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響28-30
  • 4.4 生長調(diào)節(jié)劑及濃度組合對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響30-31
  • 4.5 接種后的培養(yǎng)溫度、暗培養(yǎng)時間及轉(zhuǎn)瓶時間對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響31-32
  • 4.6 MS培養(yǎng)基中NH_4~+的濃度、TDZ、NAA及AgNO_3對愈傷組織繼代培養(yǎng)的影響32-34
  • 5 討論34-36
  • 5.1 酒精和升汞組合最佳滅菌時間對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響34
  • 5.2 葉片成熟度及葉柄、葉脈不同部位對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響34-35
  • 5.3 不同的防褐化條件對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響35
  • 5.4 生長調(diào)節(jié)劑及濃度組合對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響35
  • 5.5 接種后的培養(yǎng)溫度、暗培養(yǎng)時間及轉(zhuǎn)瓶時間對褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的影響35-36
  • 5.6 MS培養(yǎng)基中NH_4~+的濃度、TDZ、NAA及AgNO_3對愈傷組織繼代培養(yǎng)的影響36
  • 6 下一步工作建議36-38
  • 參考文獻38-44
  • 致謝44

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  本文關(guān)鍵詞:成年枇杷葉柄及葉脈培養(yǎng)中防止褐化及愈傷組織誘導(dǎo)的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:351017

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