微小隱孢子蟲（Cryptosporidium parvum）是一種重要的人獸共患原蟲,呈世界性分布,主要引起人或動物腹瀉。對幼年動物和免疫缺陷患者危害較大,可導(dǎo)致嬰兒或生長發(fā)育障礙、營養(yǎng)不良等癥狀,甚至致死性腹瀉。目前用于治療隱孢子蟲病的藥物主要是硝唑尼特,但效果并不理想,且尚無隱孢子蟲疫苗,因此隱孢子蟲疫苗和藥物的研發(fā)有待加強(qiáng)。研究微小隱孢子蟲與宿主免疫應(yīng)答特點(diǎn)將有助于對該病的防治。細(xì)胞自噬（Autophagy）是廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的一種溶酶體依賴性的降解途徑,在清除胞內(nèi)病原中發(fā)揮重要的作用。本實(shí)驗(yàn)室張夢鴿等（2018）研究表明,微小隱孢子蟲感染早期誘導(dǎo)細(xì)胞自噬,自噬發(fā)揮清除細(xì)胞內(nèi)蟲體作用。據(jù)報道調(diào)控自噬的因素很多,包括microRNA和MAPK信號通路等。本研究在前期工作基礎(chǔ)上,開展微小隱孢子蟲感染HCT-8后,microRNA和MAPK信號通路相關(guān)分子表達(dá)變化,探討它們在調(diào)控自噬及清除蟲體中的作用,從微小隱孢子蟲調(diào)控自噬機(jī)制角度揭示微小隱孢子蟲致病機(jī)制,為該病防治提供靶點(diǎn)和依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下:1.微小隱孢子蟲感染細(xì)胞自噬的檢測子孢子感染HCT-8細(xì)胞不同時間,western... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫對照表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 隱孢子蟲病概述
        1 病原及生活史
        2 入侵機(jī)制
        3 流行病學(xué)
        4 隱孢子蟲的診斷和治療
    第二章 自噬及其調(diào)控機(jī)制
        1 細(xì)胞自噬及其抗病原作用
        2 MicroRNA與自噬
        3 MAPK信號通路與自噬
        4 MicroRNA,MAPK與自噬的關(guān)系
    第三章 寄生蟲與宿主MicroRNA、MAPK與自噬研究進(jìn)展
        1 寄生蟲與自噬
        2 寄生蟲與microRNA
        3 寄生蟲與MAPK信號通路
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 微小隱孢子蟲感染細(xì)胞自噬的檢測
        1.1 材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 主要儀器
            1.1.3 主要溶液的配制
            1.1.4 細(xì)胞及蟲種
        1.2 方法
            1.2.1 微小隱孢子蟲感染HCT-8 細(xì)胞自噬的檢測
            1.2.2 微小隱孢子蟲對EGFP-LC3 聚集的影響
        1.3 結(jié)果
            1.3.1 微小隱孢子蟲誘導(dǎo)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)變化
            1.3.2 微小隱孢子蟲誘導(dǎo)EGFP-LC3 的聚集
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 MiR-30a和 miR-26a在微小隱孢子蟲調(diào)控自噬中的作用
        2.1 材料
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要溶液配制
        2.2 方法
            2.2.1 自噬相關(guān)microRNA動態(tài)表達(dá)的檢測
            2.2.2 MiR-30a和 miR-26a的檢測
            2.2.3 干擾miR-30a和 miR-26a后對自噬蛋白的檢測
            2.2.4 干擾miR-30a和 miR-26a后對微小隱孢子蟲增殖的檢測
            2.2.5 干擾miR-30a和 miR-26a對 ERFP-LC3 聚集的檢測
        2.3 結(jié)果
            2.3.1 自噬相關(guān)microRNA的動態(tài)表達(dá)
            2.3.2 微小隱孢子蟲對HCT-8 miR-30a和 miR-26a的調(diào)控
            2.3.3 干擾miR-30a和 miR-26a對微小隱孢子蟲誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的影響
            2.3.4 干擾miR-30a和 miR-26a對微小隱孢子蟲增殖的影響
            2.3.5 干擾miR-30a和 miR-26a誘導(dǎo)EGFP-LC3 的聚集
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 MAPK信號通路在微小隱孢子蟲調(diào)控自噬中的作用
        3.1 材料
            3.1.1 主要試劑
            3.1.2 主要儀器
            3.1.3 主要溶液的配制
        3.2 方法
            3.2.1 微小隱孢子蟲感染HCT-8 細(xì)胞后MAPK信號通路的檢測
            3.2.2 抑制ERK和 P38 MAPK后對自噬蛋白的檢測
            3.2.3 抑制ERK和 P38 MAPK后對微小隱孢子蟲增殖的檢測
            3.2.4 干擾miR-26a對 ERK和 P38 MAPK通路的檢測
            3.2.5 抑制ERK和 P38 MAPK對 ERFP-LC3 聚集的檢測
        3.3 結(jié)果
            3.3.1 微小隱孢子蟲激活MAPK信號通路
            3.3.2 抑制ERK和 P38 MAPK表達(dá)對微小隱孢子蟲誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的影響
            3.3.3 抑制ERK和 P38 MAPK表達(dá)對微小隱孢子蟲增殖的影響
            3.3.4 MiR-26a對 MAPK信號通路的調(diào)控
            3.3.5 抑制ERK和 P38 MAPK表達(dá)誘導(dǎo)EGFP-LC3 的聚集
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]3-O-Acetyl-11-keto-β-boswellic acid ameliorated aberrant metabolic landscape and inhibited autophagy in glioblastoma[J]. Wan Li,Liwen Ren,Xiangjin Zheng,Jinyi Liu,Jinhua Wang,Tengfei Ji,Guanhua Du.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2020(02)
[2]Pathogens causing diarrhoea among Bangladeshi children with malignancy: Results from two pilot studies[J]. Sabina Karim,Ferdousi Begum,Afiqul Islam,Monowar Ahmad Tarafdar,Mamtaz Begum,Md Johirul Islam,Bushra Malik,Md Shamim Ahsan,Ameneh Khatami,Harunor Rashid.  World Journal of Clinical Cases. 2020(02)
[3]人畜共患賈第鞭毛蟲和隱孢子蟲國內(nèi)研究進(jìn)展[J]. 韓明毅,安偉,馬金鋒,李紅巖.  中國病原生物學(xué)雜志. 2019(05)
[4]微小隱孢子蟲在HCT-8細(xì)胞內(nèi)的培養(yǎng)[J]. 朱惠麗,劉利敏,王臣榮,張素梅,張龍現(xiàn),王榮軍.  中國人獸共患病學(xué)報. 2016(08)
[5]人體隱孢子蟲病流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]. 王慶權(quán),操治國,李啟揚(yáng),汪天平.  熱帶病與寄生蟲學(xué). 2015(02)
[6]隱孢子蟲病原分類研究進(jìn)展[J]. 楊建偉,李國清.  熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2008(07)

碩士論文
[1]湖北省部分地區(qū)鳥類隱孢子蟲分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 廖聰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]微小隱孢子蟲感染對HCT-8細(xì)胞自噬的影響[D]. 李智鵬.吉林大學(xué) 2017
[3]隱孢子蟲感染激活細(xì)胞Akt通路和誘導(dǎo)自噬的研究[D]. 張夢鴿.吉林大學(xué) 2018



本文編號：3477861