薄殼山核桃[Carya illinoensis（Wangenh.）K.Koch],是一種經(jīng)濟(jì)型堅(jiān)果樹種,因其果實(shí)營養(yǎng)豐富,味美可口而廣為種植。隨著我國薄殼山核桃的種植面積逐漸增加,病害成為限制薄殼山核桃產(chǎn)量和品質(zhì)的主要因素。其中薄殼山核桃黑斑病的發(fā)生最為嚴(yán)重,目前并沒有針對(duì)該病害發(fā)生的情況進(jìn)行相關(guān)全面、準(zhǔn)確的報(bào)道與研究,所以本研究主要針對(duì)我國6個(gè)薄殼山核桃主要種植區(qū)采集的薄殼山核桃黑斑病樣本,通過形態(tài)學(xué)（包括菌落特征）、分子生物學(xué)（rDNA-ITS序列分析）和致病性研究的鑒定方法,鑒定黑斑病的病原菌,篩選出高效殺菌劑,為防治該病害提供科學(xué)的理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1、將分別采自安徽滁州、江蘇東臺(tái)、江西吉安、云南玉溪、浙江建德和浙江金華薄殼山核桃6個(gè)采樣點(diǎn)的病樣進(jìn)行組織分離培養(yǎng),結(jié)果顯示薄殼山核桃黑斑病由多種病菌造成,不是由單一的病菌引起的,分離結(jié)果表明從6個(gè)采樣點(diǎn)采集的病樣標(biāo)本中共分離到110株菌株,分屬16個(gè)屬,其中分離頻率最高的屬分別為Colletotrichum spp.（35.45%）、Phomopsis spp.（10.91%）、Phoma spp.（8.18%）和Aca... 

【文章來源】：河南科技學(xué)院河南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

薄殼山核桃黑斑病林間葉片的發(fā)病癥狀（a-e）

薄殼山核桃黑斑病病原菌鑒定及室內(nèi)藥劑篩選14圖2-2薄殼山核桃黑斑病林間果實(shí)的發(fā)病癥狀（a-f）Fig2-2SymptomsofblackspotonforestfruitsofthinshellwalnutInthewoods(a-f)2.2.2黑斑病病原菌ITS序列分析將純培養(yǎng)得到的110株薄殼山核桃黑斑病病原菌株進(jìn)行DNA的提取和檢測(cè)，同時(shí)采用ITS（內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)）的通用引物ITS1（上游引物）和ITS4（下游引物）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到500bp左右的條帶。將測(cè)序得到的序列在NCBI上進(jìn)行Blasta比對(duì)，同時(shí)利用Mega6.0構(gòu)建系統(tǒng)中N-J法構(gòu)建5.8s/ITS序列樹狀圖。所有菌株按屬共分為16個(gè)聚類群（如圖2-3），其中，占分離頻率最大的為炭疽菌屬（Colletorichumspp.），共39個(gè)菌株，表明該類病原菌為薄殼山核桃黑斑病的主要致病菌，由樹狀圖可以發(fā)現(xiàn)炭疽菌屬共分為4個(gè)分支，說明39株炭疽菌株分別為不同的種，此部分鑒定結(jié)果將在第三章闡述。另外，在NCBI上進(jìn)行Blast比對(duì)時(shí)，發(fā)現(xiàn)鐮刀菌屬菌株中5株安徽滁州的樣品與KJ000430.1和MK828131.1的比對(duì)相似率為100%，均為Fusariumfujikuroi，浙江建德的2個(gè)菌株比對(duì)為Fusariumproliferatum（MN511330，比對(duì)相似率99.26%）。在云南玉溪的樣品中分離到3株輪層炭殼菌屬真菌，Blast比對(duì)結(jié)果為Daldiniachildiae（KT192354，比對(duì)相似率為99.32%）。6株擬盤多毛孢屬真菌分別比對(duì)上Pestalotiopsismangiferae和Pestalotiopsismicrospora2個(gè)種，比對(duì)相似率均在99%以上；8株黑孢霉屬真菌在樹狀圖上分為2個(gè)分支，在NCBI上進(jìn)行Blast比對(duì)結(jié)果為Nigrosporasphaerica（KU878079.1，比對(duì)相似率為100%）和Nigrosporalacticolonia。7株葡萄座腔菌屬真菌Blast比對(duì)結(jié)果均為Botryosphaeriadothidea（MN296357、KY788313、MN165109，比對(duì)相似率均為100%）。12株擬莖點(diǎn)霉屬菌株和9株莖點(diǎn)霉屬菌株在樹

薄殼山核桃黑斑病的ITS序列聚類分析樹形圖


本文編號(hào)：3477220