發(fā)布時間：2021-10-14 16:23

　　褪黑激素（melatonin, MEL）是一種生物體內(nèi)強有效的天然抗氧化劑,不僅自身可以清除自由基,而且還可以增強體內(nèi)抗氧化酶的作用,減輕活性氧對機體的損害。目前對于MEL抗氧化功能的研究多集中于哺乳動物的卵母細胞,而對于同樣在卵泡發(fā)育過程中起著重要作用的顆粒細胞研究較少,尤其在鳥類上這方面相關的報道還未曾見到。本研究以天府肉鵝母系母鵝為試驗材料,研究了鵝卵泡卵黃內(nèi)MEL的含量和不同等級卵泡顆粒層細胞中抗氧化酶（SOD1、GPx1、CAT）的表達量,探討MEL在卵泡發(fā)育過程中的抗氧化作用。同時以鵝的顆粒細胞為模型,初步探討了MEL在鵝顆粒細胞中的抗氧化作用,再用H2O2模擬氧化應激對顆粒細胞造成損傷,最后對H202誘導的顆粒細胞進行MEL預處理,進一步研究MEL可以緩解H2O2對顆粒細胞造成的凋亡,從而驗證MEL在鵝顆粒細胞中的抗氧化作用。主要研究結果如下：（1）測了鵝等級卵泡卵黃中MEL的含量,發(fā)現(xiàn)隨著卵泡的發(fā)育成熟,MEL的含量呈現(xiàn)遞增的趨勢,在F1卵泡內(nèi)達到最大值8.865 pg/ml,等級卵泡內(nèi)的MEL均高于血漿（5.811 pg/ml）,表明MEL在卵泡的發(fā)育過程中起著重要作... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號說明
前言
1. 文獻綜述
    1.1 褪黑激素的發(fā)現(xiàn)
    1.2 褪黑激素的生物合成、代謝與分布
        1.2.1 褪黑激素的生物合成
        1.2.2 褪黑激素的代謝
        1.2.3 褪黑激素的分布
    1.3 褪黑激素的受體
    1.4 褪黑激素的抗氧化功能
        1.4.1 褪黑激素清除自由基
        1.4.2 褪黑激素對抗氧化酶和促氧化酶的作用
        1.4.3 褪黑激素增強線粒體的功能
    1.5 排卵引起氧化應激
    1.6 褪黑激素能夠緩解卵泡內(nèi)的氧化應激
    1.7 顆粒細胞在卵泡發(fā)育過程中的作用
    1.8 本試驗目的及意義
2. 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物的挑選
        2.1.2 組織樣品的采集
        2.1.3 顆粒細胞的培養(yǎng)
        2.1.4 主要試劑與試劑盒
        2.1.5 主要試劑配制
        2.1.6 主要試驗器材與軟件
    2.2 試驗方法
        2.2.1 組織cDNA的準備
        2.2.2 血漿及卵黃內(nèi)MEL含量的測定
        2.2.3 實時熒光定量基因表達檢測
        2.2.4 鵝原代顆粒細胞的培養(yǎng)
        2.2.5 MEL、H_2O_2處理鵝顆粒細胞及最適濃度的篩選
        2.2.6 MEL、H_2O_2共同處理顆粒細胞
    2.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3. 結果與分析
    3.1 鵝組織RNA的提取
    3.2 鵝等級前卵泡和等級卵泡卵黃中MEL含量水平
    3.3 鵝等級卵泡顆粒層中抗氧化酶的基因表達
    3.4 MEL對鵝顆粒細胞氧化相關指標的影響
        3.4.1 MEL對細胞活性的影響
        3.4.2 MEL對細胞內(nèi)ROS含量的影響
        3.4.3 MEL對細胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關基因表達的影響
        3.4.4 MEL對細胞內(nèi)抗氧化相關蛋白表達的影響
    3.5 氧化應激模型的建立
        3.5.1 H_2O_2對細胞活性的影響
        3.5.2 H_2O_2對細胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關基因表達的影響
        3.5.3 H_2O_2對細胞內(nèi)抗氧化等相關蛋白表達的影響
    3.6 MEL對氧化應激狀態(tài)下鵝顆粒細胞相關氧化指標的影響
        3.6.1 MEL對氧化應激狀態(tài)下鵝顆粒細胞活性的影響
        3.6.2 MEL對氧化應激狀態(tài)下鵝顆粒細胞內(nèi)ROS含量的影響
        3.6.3 MEL對氧化應激狀態(tài)下鵝顆粒細胞凋亡的影響
        3.6.4 MEL對氧化應激狀態(tài)下鵝顆粒細胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關基因表達的影響
4. 討論
    4.1 褪黑激素及抗氧化酶均表達于卵泡發(fā)育進程
    4.2 褪黑激素促進鵝顆粒細胞的發(fā)育
    4.3 MEL能夠緩解氧化應激引起顆粒細胞的凋亡
5. 結論
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Ghrelin對雞等級前卵泡發(fā)育的影響[J]. 林金杏,毛赟杰,米玉玲,張才喬.  畜牧獸醫(yī)學報. 2011(09)
[2]前列腺素對禽類等級卵泡發(fā)育的影響[J]. 金艷梅.  中國畜牧獸醫(yī). 2010(04)
[3]褪黑激素對受損傷腦神經(jīng)元的保護作用與bcl-2蛋白過度表達有關（英文）[J]. 凌祥,張玲妹,陸世鐸,李學君,孫鳳艷.  Acta Pharmacologica Sinica. 1999(05)

博士論文
[1]褪黑素對H2O2誘導的大鼠腦微血管周細胞損傷的影響[D]. 鹿文葆.北京協(xié)和醫(yī)學院 2012



本文編號：3436468