不同C/N物料連續(xù)厭氧發(fā)酵特性及菌群結(jié)構(gòu)變化的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-05 12:04
為了解析不同C/N物料的連續(xù)厭氧發(fā)酵特性及菌群結(jié)構(gòu)變化規(guī)律,本文以豬糞、金針菇菌包、稻稈和甘蔗葉為物料,分別進(jìn)行批次厭氧發(fā)酵和連續(xù)厭氧發(fā)酵實(shí)驗(yàn),分析不同C/N物料連續(xù)厭氧發(fā)酵特性,并采用PCR-DGGE技術(shù)解析不同C/N物料連續(xù)厭氧發(fā)酵過程中的菌群結(jié)構(gòu)變化規(guī)律。本研究主要結(jié)果如下:(1)采用瑞典BioProcess公司研發(fā)的全自動(dòng)甲烷潛力測(cè)試系統(tǒng)(AMPTS II)對(duì)四種物料進(jìn)行批次厭氧發(fā)酵產(chǎn)甲烷潛力實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,豬糞、金針菇菌包、稻稈和甘蔗葉均具有一定的產(chǎn)甲烷能力,且其產(chǎn)甲烷潛力值分別為387.4.2±8.6、210.2±12.0、269.0±8.8和152.4±16.7 mL/(gVS),物料的產(chǎn)甲烷能力與物料種類、物質(zhì)結(jié)構(gòu)和營(yíng)養(yǎng)組成等因素有關(guān);四種物料日產(chǎn)甲烷速率曲線總體趨勢(shì)相近,在短時(shí)間內(nèi)均達(dá)到產(chǎn)甲烷峰值,隨后逐漸回落至產(chǎn)甲烷終點(diǎn),但不同物料日產(chǎn)甲烷量的出峰時(shí)間不同,甘蔗葉、稻稈、豬糞和金針菇菌包的出峰時(shí)間分別在第2、4、5和5天,其當(dāng)日產(chǎn)甲烷量分別為76.3、130.8、279.5和137.8 mL,而且四種物料能夠在較短時(shí)間內(nèi)被分解,并獲得90%左右的甲烷產(chǎn)量。(2)四種...
【文章來源】:江西師范大學(xué)江西省
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
厭氧發(fā)酵原理
DGGE 技術(shù)是由 Fischer 和 Lerman 于 1979 年最先提出的用于檢測(cè) DNA點(diǎn)突變的一項(xiàng)電泳技術(shù)。Muyzer 等于 1985 年首次將“GC 夾子”技術(shù)和異源雙鏈技術(shù)應(yīng)用于 DGGE,使該技術(shù)趨于完善;1993 年首次將該技術(shù)應(yīng)用于分子微生物學(xué)研究領(lǐng)域,并證實(shí)了這種技術(shù)在揭示自然界微生物區(qū)系的遺傳多樣性和種群差異方面具有獨(dú)特的優(yōu)越性。PCR 對(duì) DNA 片段的 16 S rRNA 或 18 S rRNA 中具有保守性、可變性和分子量適中的基因序列進(jìn)行擴(kuò)增,獲得長(zhǎng)度相同而序列不同的 DNA 片段[31]。根據(jù)不同堿基序列組成的 DNA 雙螺旋發(fā)生變性所要求的變性劑濃度不同這一DNA 解鏈特性,DGGE 技術(shù)中使用的變性梯度凝膠能夠誘導(dǎo)相同片段大小但序列不同的 DNA 雙鏈在相應(yīng)的階段解鏈,由螺旋狀分子變成部分解鏈狀線性分子,導(dǎo)致電泳遷移率逐漸降低,從而使其在聚丙烯酰胺凝膠的不同位置停止遷移,染色后在凝膠上則可呈分開的條帶,每個(gè)條帶代表一個(gè)長(zhǎng)度相同而堿基順序和組成不同的 DNA 序列,從而達(dá)到分辨不同微生物的目的。PCR-DGGE 技術(shù)基本原理如圖 1-2 所示。
江西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文操作過程是 DGGE 方法中最為常見的一種技術(shù),如下:首先獲取樣品,提取樣品的總 DN產(chǎn)物 DGGE 技術(shù)分離與染色,獲取指紋圖物種的數(shù)量及該群落中的優(yōu)勢(shì)菌群。但為 DGGE 的目的條帶或特異條帶進(jìn)行測(cè)序并E 分子生物技術(shù)中,樣品總 DNA 的提取裂解法、高溫裂解法、和基于 SDS 的細(xì)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]4℃冷藏對(duì)厭氧發(fā)酵接種物活性的影響[J]. 陳柳萌,勒系意,聶紅,桂倫,熊江花,俞瑩,張誠(chéng). 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(01)
[2]底物濃度對(duì)餐廚垃圾厭氧消化的影響[J]. 姜立,張成明,韓婭新,陳雪蘭,李十中. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2016(04)
[3]產(chǎn)甲烷古菌研究進(jìn)展[J]. 承磊,鄭珍珍,王聰,張輝. 微生物學(xué)通報(bào). 2016(05)
[4]絲瓜18S rRNA基因克隆及其作為內(nèi)參基因的應(yīng)用[J]. 朱海生,陳敏氡,溫慶放,藍(lán)新隆,李永平,王彬,張前榮,吳衛(wèi)東. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]變性梯度凝膠電泳技術(shù)在食品微生物多樣性研究中的應(yīng)用前景[J]. 楊向瑩,許美玲,張錫全,張捷,張巖,張帆,王靜,王小晉,陳偉,董麗君,楊娟,陳廣全. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2015(06)
[6]不同原料厭氧發(fā)酵及其微生物種群的研究[J]. 李海紅,巴琦玥,閆志英,劉曉風(fēng). 中國(guó)環(huán)境科學(xué). 2015(05)
[7]淺談農(nóng)村固體廢棄物處理存在的問題及對(duì)策[J]. 李素梅. 福建農(nóng)業(yè). 2015(03)
[8]產(chǎn)甲烷生化代謝途徑研究進(jìn)展[J]. 方曉瑜,李家寶,芮俊鵬,李香真. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2015(01)
[9]變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)在畜禽糞便厭氧發(fā)酵液中的研究進(jìn)展[J]. 王欣,蘇小紅,郭廣亮,劉偉,徐曉秋,高德玉. 黑龍江科學(xué). 2015(01)
[10]農(nóng)村固體廢棄物污染現(xiàn)狀及其處理處置技術(shù)[J]. 楊松梅,何曼妮. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技. 2014(12)
博士論文
[1]農(nóng)業(yè)廢棄物循環(huán)利用的績(jī)效評(píng)價(jià)及產(chǎn)業(yè)發(fā)展機(jī)制研究[D]. 李鵬.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]兩段式厭氧工藝產(chǎn)甲烷發(fā)酵特性及微生物生態(tài)調(diào)控機(jī)制研究[D]. 趙光.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]玉米秸稈厭氧發(fā)酵產(chǎn)沼氣特性的研究[D]. 王光遠(yuǎn).東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]PCR-DGGE技術(shù)分析多菌態(tài)混合樣品中微生物群落結(jié)構(gòu)[D]. 劉飛.華南理工大學(xué) 2012
[3]玉米秸稈與畜禽糞便堆料發(fā)酵技術(shù)研究[D]. 韋小慶.西南大學(xué) 2012
[4]有機(jī)垃圾厭氧發(fā)酵過程性能預(yù)測(cè)系統(tǒng)建模與實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證[D]. 李慶林.上海交通大學(xué) 2009
[5]高濃度造紙廢水厭氧處理中顆粒污泥的微生物群落結(jié)構(gòu)及形成的研究[D]. 尹礎(chǔ).中南大學(xué) 2008
本文編號(hào):3419705
【文章來源】:江西師范大學(xué)江西省
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
厭氧發(fā)酵原理
DGGE 技術(shù)是由 Fischer 和 Lerman 于 1979 年最先提出的用于檢測(cè) DNA點(diǎn)突變的一項(xiàng)電泳技術(shù)。Muyzer 等于 1985 年首次將“GC 夾子”技術(shù)和異源雙鏈技術(shù)應(yīng)用于 DGGE,使該技術(shù)趨于完善;1993 年首次將該技術(shù)應(yīng)用于分子微生物學(xué)研究領(lǐng)域,并證實(shí)了這種技術(shù)在揭示自然界微生物區(qū)系的遺傳多樣性和種群差異方面具有獨(dú)特的優(yōu)越性。PCR 對(duì) DNA 片段的 16 S rRNA 或 18 S rRNA 中具有保守性、可變性和分子量適中的基因序列進(jìn)行擴(kuò)增,獲得長(zhǎng)度相同而序列不同的 DNA 片段[31]。根據(jù)不同堿基序列組成的 DNA 雙螺旋發(fā)生變性所要求的變性劑濃度不同這一DNA 解鏈特性,DGGE 技術(shù)中使用的變性梯度凝膠能夠誘導(dǎo)相同片段大小但序列不同的 DNA 雙鏈在相應(yīng)的階段解鏈,由螺旋狀分子變成部分解鏈狀線性分子,導(dǎo)致電泳遷移率逐漸降低,從而使其在聚丙烯酰胺凝膠的不同位置停止遷移,染色后在凝膠上則可呈分開的條帶,每個(gè)條帶代表一個(gè)長(zhǎng)度相同而堿基順序和組成不同的 DNA 序列,從而達(dá)到分辨不同微生物的目的。PCR-DGGE 技術(shù)基本原理如圖 1-2 所示。
江西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文操作過程是 DGGE 方法中最為常見的一種技術(shù),如下:首先獲取樣品,提取樣品的總 DN產(chǎn)物 DGGE 技術(shù)分離與染色,獲取指紋圖物種的數(shù)量及該群落中的優(yōu)勢(shì)菌群。但為 DGGE 的目的條帶或特異條帶進(jìn)行測(cè)序并E 分子生物技術(shù)中,樣品總 DNA 的提取裂解法、高溫裂解法、和基于 SDS 的細(xì)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]4℃冷藏對(duì)厭氧發(fā)酵接種物活性的影響[J]. 陳柳萌,勒系意,聶紅,桂倫,熊江花,俞瑩,張誠(chéng). 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(01)
[2]底物濃度對(duì)餐廚垃圾厭氧消化的影響[J]. 姜立,張成明,韓婭新,陳雪蘭,李十中. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2016(04)
[3]產(chǎn)甲烷古菌研究進(jìn)展[J]. 承磊,鄭珍珍,王聰,張輝. 微生物學(xué)通報(bào). 2016(05)
[4]絲瓜18S rRNA基因克隆及其作為內(nèi)參基因的應(yīng)用[J]. 朱海生,陳敏氡,溫慶放,藍(lán)新隆,李永平,王彬,張前榮,吳衛(wèi)東. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]變性梯度凝膠電泳技術(shù)在食品微生物多樣性研究中的應(yīng)用前景[J]. 楊向瑩,許美玲,張錫全,張捷,張巖,張帆,王靜,王小晉,陳偉,董麗君,楊娟,陳廣全. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2015(06)
[6]不同原料厭氧發(fā)酵及其微生物種群的研究[J]. 李海紅,巴琦玥,閆志英,劉曉風(fēng). 中國(guó)環(huán)境科學(xué). 2015(05)
[7]淺談農(nóng)村固體廢棄物處理存在的問題及對(duì)策[J]. 李素梅. 福建農(nóng)業(yè). 2015(03)
[8]產(chǎn)甲烷生化代謝途徑研究進(jìn)展[J]. 方曉瑜,李家寶,芮俊鵬,李香真. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2015(01)
[9]變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)在畜禽糞便厭氧發(fā)酵液中的研究進(jìn)展[J]. 王欣,蘇小紅,郭廣亮,劉偉,徐曉秋,高德玉. 黑龍江科學(xué). 2015(01)
[10]農(nóng)村固體廢棄物污染現(xiàn)狀及其處理處置技術(shù)[J]. 楊松梅,何曼妮. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技. 2014(12)
博士論文
[1]農(nóng)業(yè)廢棄物循環(huán)利用的績(jī)效評(píng)價(jià)及產(chǎn)業(yè)發(fā)展機(jī)制研究[D]. 李鵬.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]兩段式厭氧工藝產(chǎn)甲烷發(fā)酵特性及微生物生態(tài)調(diào)控機(jī)制研究[D]. 趙光.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]玉米秸稈厭氧發(fā)酵產(chǎn)沼氣特性的研究[D]. 王光遠(yuǎn).東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]PCR-DGGE技術(shù)分析多菌態(tài)混合樣品中微生物群落結(jié)構(gòu)[D]. 劉飛.華南理工大學(xué) 2012
[3]玉米秸稈與畜禽糞便堆料發(fā)酵技術(shù)研究[D]. 韋小慶.西南大學(xué) 2012
[4]有機(jī)垃圾厭氧發(fā)酵過程性能預(yù)測(cè)系統(tǒng)建模與實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證[D]. 李慶林.上海交通大學(xué) 2009
[5]高濃度造紙廢水厭氧處理中顆粒污泥的微生物群落結(jié)構(gòu)及形成的研究[D]. 尹礎(chǔ).中南大學(xué) 2008
本文編號(hào):3419705
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