口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒引發(fā)的一種以感染偶蹄動(dòng)物為主的急性、烈性、熱性、高度接觸性傳染病。其傳播途徑多、傳播速度快、傳染性強(qiáng)、病原變異大、嚴(yán)重危害畜牧業(yè)的發(fā)展和國(guó)家的經(jīng)濟(jì)貿(mào)易。在我國(guó),口蹄疫的防制主要依賴(lài)于以強(qiáng)制免疫為主的綜合免疫措施,但是目前使用的滅活疫苗有存在著許多缺憾,研究、開(kāi)發(fā)安全、高效的新型疫苗是大勢(shì)所趨。而表位肽疫苗正是其中一個(gè)研究熱點(diǎn)。在口蹄疫病毒引發(fā)的免疫應(yīng)答中,細(xì)胞免疫起著重要的作用,且結(jié)構(gòu)蛋白VP1上有口蹄疫病毒主要的表位。因此,研究能夠誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答的CTL表位,將加深對(duì)細(xì)胞介導(dǎo)的抗口蹄疫病毒免疫的了解,并為設(shè)計(jì)新型疫苗提供參考。口蹄疫病毒A/GDMM/CHA/2013株是2013年廣東省茂名分離的豬源毒,其很可能是由境外傳入。因此,研究該毒株的細(xì)胞表位、發(fā)展相應(yīng)疫苗,可能可以抵御外來(lái)疫情的傳入。結(jié)構(gòu)蛋白VP1上有口蹄疫病毒的主要抗原表位位點(diǎn)。研究根據(jù)Gen Bank中A/GDMM/CHA/2013株結(jié)構(gòu)蛋白VP1的序列,先借助計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)了A/GDMM/CHA/2013株VP1結(jié)構(gòu)蛋白上H-2d限制性C... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1.蹄疫現(xiàn)狀及其防治
        1.1.1.蹄疫病原學(xué)
        1.1.2.蹄疫流行病學(xué)
        1.1.3.蹄疫的防治
    1.2.蹄疫可替代疫苗策略
        1.2.1 蛋白和多肽
        1.2.2 弱毒疫苗
        1.2.3 空衣殼
    1.3 T細(xì)胞表位
        1.3.1 T細(xì)胞表位的分子基礎(chǔ)
        1.3.2 MHCⅠ類(lèi)抗原的加工和遞呈
        1.3.3 CTL的作用
        1.3.4.蹄疫CTL表位研究現(xiàn)狀
    1.4 T細(xì)胞表位的預(yù)測(cè)方法
    1.5 細(xì)胞表位鑒定方法
        1.5.1 T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)
        1.5.2 ELISPOT
        1.5.3 胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞因子染色
    1.6 研究的目的和意義
第二章 FMDV A/GDMM/CHA/2013株結(jié)構(gòu)蛋白VP1 CTL表位預(yù)測(cè)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 序列分析
        2.1.2 預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)表位
        2.1.3 候選表位的化學(xué)合成
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 VP1基因序列分析
        2.2.2 VP1蛋白CTL細(xì)胞表位預(yù)測(cè)及合成
    2.3 討論
        2.3.1 FMDV A/GDMM/CHA/2013株
        2.3.2 結(jié)構(gòu)蛋白VP1
        2.3.3 CTL與T細(xì)胞表位
        2.3.4 表位預(yù)測(cè)
第三章 FMDV A/GDMM/CHA/2013株結(jié)構(gòu)蛋白VP1 CTL細(xì)胞表位的鑒定
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及細(xì)胞
        3.1.2 毒株
        3.1.3 主要試劑和儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 測(cè)定病毒毒價(jià)
        3.2.2 BALB/C小鼠的免疫試驗(yàn)
        3.2.3 抗體水平分析
        3.2.4 小鼠淋巴細(xì)胞的分離
        3.2.5 小鼠淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)及活力測(cè)定
        3.2.6 T細(xì)胞增殖測(cè)定
        3.2.7 ELISPOT
        3.2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 病毒毒價(jià)測(cè)定
        3.3.2 抗體滴度測(cè)定
        3.3.3 小鼠淋巴細(xì)胞的活力
        3.3.4 T細(xì)胞增殖
        3.3.5 ELISPOT結(jié)果
        3.3.6 流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果
    3.4 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一種新型T細(xì)胞免疫原的原核表達(dá)及對(duì)口蹄疫疫苗的免疫增強(qiáng)作用[J]. 趙清,孫普,劉在新,李平花,包慧芳,曹軼梅,白興文,付元芳,盧曾軍,李冬.  生物工程學(xué)報(bào). 2011(09)
[2]T細(xì)胞表位預(yù)測(cè)及其在抗口蹄疫病毒疫苗研發(fā)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 陳啟偉,王永錄.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(06)
[3]抗原表位的研究方法及口蹄疫病毒抗原表位的研究進(jìn)展[J]. 張中旺,張永光.  微生物學(xué)通報(bào). 2008(08)

博士論文
[1]基于重組腺病毒載體的烈性病原體疫苗研究[D]. 吳詩(shī)坡.中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2013
[2]早期應(yīng)用抗病毒藥物聯(lián)合DNA疫苗對(duì)旱獺WHV感染過(guò)程的影響[D]. 朱珍妮.華中科技大學(xué) 2012

碩士論文
[1]熱應(yīng)激大鼠腸道抗原遞呈及黏膜免疫功能的變化[D]. 劉曉曦.北京農(nóng)學(xué)院 2013
[2]口蹄疫病毒AF/72株結(jié)構(gòu)蛋白VP1的H-2d限制性T細(xì)胞表位篩選與鑒定[D]. 劉新生.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011



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