鐵皮石斛,蘭科石斛蘭屬多年生草本植物�，F(xiàn)代藥理學研究證明其成分具有多種功效,在食用、藥用等方面都體現(xiàn)出一定的價值。但鐵皮石斛對生長環(huán)境和氣候條件要求十分苛刻,且生長發(fā)育緩慢,野生資源十分稀缺。20世紀90年代,浙江省在全國率先開始鐵皮石斛的規(guī)�；N植和產(chǎn)業(yè)化開發(fā),目前已是鐵皮石斛種植與深加工產(chǎn)業(yè)的主要分布地。然而,鐵皮石斛的人工栽培往往是大棚設(shè)施栽培且高密度栽培,棚內(nèi)濕度大、通風不良、相對悶熱,非常利于病害的發(fā)生,浙江省又地處亞熱帶,夏季高溫高濕,梅雨季持續(xù)時間久,導致病害的發(fā)生更加持久、普遍。為明確浙江省幾種常見的鐵皮石斛病害的病原物,以及篩選出適合鐵皮石斛生長的綠色防控措施和高效低毒低殘留的化學應急技術(shù),本文進行了一些初步的研究探索。主要研究結(jié)果如下:（1）通過對鐵皮石斛種植基地的病害發(fā)生規(guī)律調(diào)查,病害典型癥狀樣本的采集、病原菌的分離、純化、致病性測定、形態(tài)觀察、rDNA-ITS序列分析等,明確引起鐵皮石斛白絹病的病原菌為齊整小核菌Sclerotium rolfsii,該病發(fā)生高峰期為高溫高濕的梅雨季節(jié)或夏、秋高溫季節(jié);明確引起鐵皮石斛輪紋病的病原菌為露濕漆斑菌Myrotheciu... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

設(shè)施栽培鐵皮石斛不同栽培方式

浙江大學碩士學位論文鐵皮石斛白絹病的病原物鑒定及防控措施1912d左右可見淡黃色油菜籽狀菌核，不均勻地分布在培養(yǎng)基表面，30d后變?yōu)辄S褐色（圖2.2-e）。在菌核形成過程中，培養(yǎng)基上產(chǎn)生大量水珠，后期減少。此形態(tài)指標與齊整小核菌Sclerotiumrolfsii一致。圖2.2鐵皮石斛白絹病田間發(fā)病癥狀、致病性測定結(jié)果及病原菌特征Fig.2.2ThesymptomsofDendrobiumofficinalesouthernblight,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofSclerotiumrolfsiia～b：田間發(fā)病癥狀；c：致病性測定結(jié)果；d：在PDA上5d大小的菌落；e：在PDA上30d大小的菌落a～b：thesymptomsinthefield；c：resultsofpathogenicity；d：5doldcolonyonPDA；e：30doldcolonyandsclerotiaonPDA2.2.4病原菌的分子鑒定以分離菌株SR1的基因組DNA為模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4進行PCR擴增，得到約650bp的PCR產(chǎn)物，PCR產(chǎn)物測序結(jié)果用BLAST軟件在GenBank中進行同源性比對（登錄號為KU854983）。比對結(jié)果表明株菌與齊整

浙江大學碩士學位論文鐵皮石斛輪紋病的病原物鑒定及防控措施31圖3.1鐵皮石斛輪紋病田間發(fā)病癥狀、致病性測定結(jié)果及病原菌特征Fig.3.1ThesymptomsofDendrobiumofficinaleringrot,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofMyrotheciumroriduma：田間發(fā)病癥狀；b：致病性測定結(jié)果；c：PDA上菌落正面；d：PDA上菌落背面；e：分生孢子梗；f：分生孢子a：thesymptomsinthefield；b：resultsofpathogenicity；c：topofthecolonyonPDA；d：bottomofthecolonyonPDA；e：sporodochia；f：conidiophore.3.2.4病原菌的分子生物學特征分別以分離菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05的基因組DNA為模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物電泳后在紫外透射儀中觀察可見各菌株分別擴增出約600bp的PCR產(chǎn)物（圖3.2），PCR產(chǎn)物測序所得的rDNA-ITS序列提交至GenBank，獲得上述5株菌對應的GenBank登錄號分別為MF939638、MF939639、MF939640、MF939641、MF939642。BLAST搜索和比對結(jié)果表明這5株菌與露濕漆斑菌（登錄號為KX421205.1）的同源相性為100.0%。通過系統(tǒng)發(fā)育樹分析表明，鐵皮石斛輪紋病病原菌與露濕漆斑菌同源性最高，位于系統(tǒng)發(fā)育樹的同一分支，支持率為66％(圖3.3)。進一步證實了分離菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05為露濕漆斑菌。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]鐵皮石斛栽培條件對品質(zhì)的影響及栽培技術(shù)規(guī)范研究[D]. 林文亮.集美大學 2019
[2]鐵皮石斛常見真菌病害的鑒定及復合菌劑的應用研究[D]. 李夢嬌.云南農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]14種觀賞植物17種真菌病害的病原鑒定[D]. 王曉陽.華南農(nóng)業(yè)大學 2016
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本文編號：3365902