細胞色素芳香化酶P450是催化雌二醇合成的關鍵酶,能使得雄激素向雌激素轉化,該基因在雄性性腺的檢測表達卻相對較低。我們使用芳香化酶抑制劑能抑制芳香化酶的表達。在魚類的實驗研究中我們發(fā)現的兩種基因編碼的p450arom,它們分別是大量表白于性腺和腦。這兩種芳香化酶都具有特異性的啟動因子,表達受不同調節(jié)因子的調控。在胚胎發(fā)育過程中:我們檢測到不同的時空表達,具有獨特的功能。在芳香化酶反應過程中,P450芳香化酶起著主要的作用。所以我們認為,開展芳香化酶的研究具有重要意義。哺乳動物中,卵巢芳香化酶主要在卵泡的顆粒細胞中,催化激素與顆粒細胞的受體結合,使得顆粒細胞逐漸增長,并不斷合成芳香化酶。研究發(fā)現顆粒細胞自身并不能合成雄性激素,這一反應是黃體生成素和內膜細胞結合,促得使細胞將乙酸和膽固醇轉變?yōu)樾巯┒?雄烯二酮再經擴散作用進入顆粒細胞,最后在顆粒細胞內被芳香化,從而形成雌性雌性激素被分泌到卵泡和血液中,進而達到促使卵泡發(fā)育的作用。在對鮸魚的實驗研究中,我們發(fā)現,芳香化酶在2-3月的鮸魚體內能夠檢測到芳香化酶的時空表達,在其血液中也可以檢測到雌二醇,這表明鮸魚在性腺發(fā)育的早期已經初步具備類固... 

【文章來源】：浙江海洋大學浙江省

【文章頁數】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略用語及中英文對照表
第一章 文獻綜述
    1.1 種群結構
    1.2 魚類卵巢的組織學分期
    1.3 自然條件下的魚類性別逆轉
    1.4 基因與魚類性別
    1.5 人為手段改變魚類的性別
    1.6 采取人為手段的意義
    1.7 芳香化酶基因介紹
    1.8 芳香化酶基因的特點
    1.9 芳香化酶在魚卵巢發(fā)育中的表達狀況研究
    1.10 芳香化酶在水產中的應用概述
    1.11 研究目標和擬解決的關鍵問題
第二章 材料方法與實驗設計
    2.1 儀器和設備
    2.2 試劑與試劑盒
    2.3 主要試劑和酶
    2.4 實驗材料
        2-4-1 載體、菌株和細胞
        2-4-2 實驗用魚
    2.5 實驗方法
        2-5-1 各種生物學組織總RNA的提取
        2-5-2 提取基因組DNA (苯酚氯仿法)
        2-5-3 質粒DNA的提取
        2-5-4 序列分析
        2-5-5 RT-PCR
        2-5-6 感受態(tài)制作與質粒轉化
        2-5-7 目的基因在大腸桿菌中的表達
        2-5-8 免疫熒光定位
        2-5-9 提取RNA和合成SMART c DNA
        2-5-10 克隆鮸魚cyp19a1a基因
        2-5-11 克隆鮸魚cyp19a1a啟動子
第三章 實驗結果及分析
    3.1 氨基酸序列比較和系統(tǒng)發(fā)育分析
    3.2 多克隆抗血清制備和Westerm印跡分析
    3.3 鮸魚免疫組織化學定位和定量cyp19a1a在卵巢中的表達
    3.4 鮸魚體內cyp19a1a啟動子在斑馬魚中的表達分析
第四章 討論
    4.1 芳香化酶基因具有保守性
    4.2 鮸魚芳香化酶基因表達具有組織細胞特異性
    4.3 Mmcyp19a1a啟動子的特異性
    4.4 總結
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術論文及研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]斜帶石斑魚囊胚期胚胎和尾芽期胚胎差異表達基因的篩選及克隆[J]. 汲廣東,李名友,周莉,桂建芳.  動物學研究. 2006(05)
[2]17α-甲基睪酮對赤點石斑魚性逆轉的影響[J]. 李廣麗,劉曉春,林浩然.  水產學報. 2006(02)
[3]芳香化酶抑制劑letrozole對赤點石斑魚（Epinephelus akaara）性逆轉的作用[J]. 李廣麗,劉曉春,林浩然.  生理學報. 2005(04)
[4]斜帶石斑魚生長激素/催乳素家族基因cDNAs的分子克隆及其進化意義[J]. 賈海波,周莉,石耀華,桂建芳.  動物學研究. 2004(03)
[5]大鱗副泥鰍ZZ/ZW型性別決定的細胞遺傳學證據[J]. 常重杰,余其興.  遺傳. 1997(03)
[6]紅羅非魚單性化試驗研究[J]. 曹麗琴,陶永剛,談慧珍.  水產學報. 1994(01)
[7]17α-甲基睪酮對赤點石斑魚性逆轉的影響[J]. 方永強,林秋明,齊襄,洪桂英.  水產學報. 1992(02)



本文編號：3345152