植物乳桿菌BS22對(duì)日糧添加AFB1肉雞消化道菌群的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-04-29 02:11
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【摘要】:本論文通過在日糧中添加植物乳桿菌BS22 (BS22)和黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)飼喂肉雞,研究AFB1對(duì)肉雞消化道菌群的影響,同時(shí)探究植物乳桿菌BS22對(duì)AFB1肉雞消化道菌群的改善作用。試驗(yàn)選用1日齡,健康艾維茵肉雞120羽,公母隨機(jī),分為3個(gè)組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10羽。分別為:空白組I(基礎(chǔ)日糧)、AFB1組Ⅱ(基礎(chǔ)日糧+50μg/kg AFB1)和解毒組Ⅲ(基礎(chǔ)日糧+50μg/kg AFB1+1%植物乳酸桿菌BS22),試驗(yàn)期為28d。在28日齡時(shí),采集消化道嗉囊、腺胃、十二指腸、空腸、回腸及盲腸內(nèi)容物和黏膜樣品,通過PCR-DGGE、克隆測序、平板活菌計(jì)數(shù)和Real-time PCR方法檢測消化道內(nèi)容物和黏膜菌群。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.PCR-DGGE:DGGE結(jié)果顯示消化道除回腸內(nèi)容物外其他部位解毒組Ⅲ發(fā)的細(xì)菌條帶數(shù)高于AFB1組Ⅱ和空白組Ⅰ。聚類圖顯示除腺胃和盲腸其他部位均是AFB1組Ⅱ與空白組Ⅰ聚在一起,而解毒組Ⅲ單獨(dú)存在。除空腸和盲腸黏膜外,其他部位細(xì)菌條帶數(shù)AFB1組Ⅱ均高于解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ,且解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ的條帶數(shù)相近或相同。除回腸和盲腸,其他部位解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ聚在一起,而AFB1組Ⅱ單獨(dú)存在。2.克隆測序:DGGE圖譜上割膠回收條帶,克隆,測序,比對(duì),得到的優(yōu)勢菌群為卷曲乳桿菌、唾液乳桿菌和嗜酸乳桿菌等;得到的特異性條帶大多為未培養(yǎng)的微生物。3.活菌計(jì)數(shù):在嗉囊內(nèi)容物中,解毒組大腸埃希桿菌數(shù)量顯著低于空白組、AFB1組組。腺胃內(nèi)容物中解毒組腸球菌和大腸埃希菌數(shù)量均是極顯著低于空白組和AFB1組。十二指腸、空腸和盲腸內(nèi)容物菌群各組間的同一種菌群數(shù)量差異均不顯著,除盲腸外其他部位解毒組乳酸桿菌數(shù)量均高于空白組和AFB1組,而腸球菌和大腸埃希桿菌數(shù)量除空腸外,其他部位均是空白組和AFBl組高于解毒組。在腺胃黏膜中,AFB1組的腸球菌數(shù)量極顯著高于空白組和解毒組,AFB1組大腸埃希桿菌數(shù)量極顯著高于空白組,并顯著高于解毒組。在十二指腸,空白組乳酸桿菌數(shù)量顯著高于AFB1組,AFB1組大腸埃希菌數(shù)量顯著高于空白組和解毒組。在空腸黏膜AFB1組腸球菌數(shù)量極顯著高于空白組。在回腸,空白組乳酸桿菌數(shù)量極顯著高于攻毒組。嗉囊、盲腸2個(gè)部位同一種菌群含量空白組、AFB1組及解毒組3個(gè)組間差異不顯著。4.Real-time PCR:在嗉囊內(nèi)容物中,空白組和AFB1組腸桿菌科均極顯著高于解毒組。在腺胃,解毒組乳酸桿菌屬數(shù)量極顯著高于空白組和AFB1組,空白組腸球菌屬含量顯著高于解毒組,AFB1組腸桿菌科含量顯著高于解毒組。在回腸空白組腸桿菌科極顯著高于AFB1組和解毒組。整體內(nèi)容物乳酸桿菌屬和腸球菌屬的含量AFB1組與空白組間無顯著差異,解毒組乳酸桿菌屬數(shù)量相對(duì)空白組和AFB1組有增多的趨勢,而腸桿菌科數(shù)量解毒組相對(duì)空白組、AFB1組有減少的趨勢。在腺胃黏膜中,AFB1組腸球菌屬和腸桿菌科的數(shù)量均是極顯著高于空白組和解毒組。十二指腸黏膜空白組乳酸桿菌屬數(shù)量極顯著高于AFB1組,并顯著高于解毒組,AFB1組腸桿菌科數(shù)量極顯著高于空白組和解毒組,解毒組極顯著高于空白組。整體黏膜乳酸桿菌屬數(shù)量AFB1組和解毒組與空白組相比有減少的趨勢,而腸球菌屬和腸桿菌科數(shù)量比空白組有增多的趨勢。綜上所述,黃曲霉毒素B1對(duì)各腸段內(nèi)容物菌群的作用不顯著,對(duì)黏膜菌群有較大影響,尤其是十二指腸;植物乳桿菌BS22能調(diào)節(jié)由于黃曲霉毒素B1引起的腸道黏膜菌群失衡。
【關(guān)鍵詞】:植物乳桿菌BS22 AFB1 腸道菌群 定性及定量分析 肉雞
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S831.5
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-9
- 縮寫說明9-13
- 1 前言13-19
- 1.1 黃曲霉毒素概述13-15
- 1.1.1 黃曲霉毒素的來源及理化性質(zhì)13
- 1.1.2 黃曲霉毒素的解毒方法13-15
- 1.2 黃曲霉毒素的危害15-17
- 1.2.1 黃曲霉毒素對(duì)動(dòng)物器官的危害15-16
- 1.2.2 黃曲霉毒素對(duì)動(dòng)物生長性能的危害16
- 1.2.3 黃曲霉毒素對(duì)動(dòng)物胃腸道的危害16-17
- 1.3 腸道正常菌群17-19
- 1.3.1 腸道正常菌群的作用17-18
- 1.3.2 腸道菌群與動(dòng)物健康18-19
- 1.4 研究目的及意義19
- 2 材料19-21
- 2.1 試驗(yàn)菌株19-20
- 2.2 主要試劑20
- 2.3 主要儀器與設(shè)備20-21
- 2.4 主要培養(yǎng)基21
- 3 試驗(yàn)方法21-27
- 3.1 菌株活化21-22
- 3.2 基礎(chǔ)日糧配制22
- 3.3 試驗(yàn)分組22
- 3.4 樣品采集22
- 3.5 樣品總DNA的提取22-23
- 3.6 PCR-DGGE定性分析23-25
- 3.6.1 樣品DGGE分析23-24
- 3.6.2 膠回收及克隆24-25
- 3.7 消化道菌群定量分析25-27
- 3.7.1 樣品活菌數(shù)檢測25
- 3.7.2 Real-time PCR檢測菌群DNA拷貝數(shù)25-27
- 3.8 統(tǒng)計(jì)分析27
- 4 結(jié)果與分析27-40
- 4.1 消化道內(nèi)容物菌群定性分析結(jié)果27-29
- 4.1.1 消化道內(nèi)容物樣品菌群DGGE結(jié)果27-29
- 4.1.2 消化道內(nèi)容物菌群DGGE圖譜中共性及特異性條帶測序結(jié)果29
- 4.2 消化道內(nèi)容物菌群定量分析結(jié)果29-34
- 4.2.1 消化道內(nèi)容物活菌計(jì)數(shù)結(jié)果30-31
- 4.2.2 消化道內(nèi)容物菌群Real-time PCR結(jié)果31-34
- 4.3 消化道黏膜菌群定性分析結(jié)果34-37
- 4.3.1 消化道黏膜樣品菌群DGGE結(jié)果34
- 4.3.2 消化道黏膜菌群DGGE圖譜中共性及特異性條帶測序結(jié)果34-37
- 4.4 消化道黏膜菌群定量分析結(jié)果37-40
- 4.4.1 消化道黏膜的活菌計(jì)數(shù)結(jié)果37
- 4.4.2 Real-time檢測PCR黏膜菌群DNA拷貝數(shù)37-40
- 5 討論40-44
- 5.1 肉雞消化道內(nèi)容物菌群多樣性的變化40-41
- 5.2 定量分析肉雞消化道內(nèi)容物菌群的變化41
- 5.3 肉雞消化道黏膜菌群多樣性的變化41-43
- 5.4 定量分析肉雞消化道黏膜菌群的變化43
- 5.5 消化道內(nèi)容物和黏膜菌群變化的比較43-44
- 6 結(jié)論44-45
- 參考文獻(xiàn)45-54
- 致謝54-55
- 附錄55
【相似文獻(xiàn)】
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 張艷;植物乳桿菌BS22對(duì)日糧添加AFB1肉雞消化道菌群的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
本文關(guān)鍵詞:植物乳桿菌BS22對(duì)日糧添加AFB1肉雞消化道菌群的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):334012
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