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銳頂鐮刀菌的RT-qPCR檢測及黃芪對其侵染響應的代謝組分析

發(fā)布時間:2021-06-10 16:25
  黃芪是常用大宗中藥材,根腐病的普遍發(fā)生嚴重阻礙其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展?共∮N是當前根腐病防治最經(jīng)濟安全且有效的方法。然而,由于抗病性指標缺失、傳統(tǒng)抗性鑒定方法效率低下等原因,針對黃芪根腐病的抗病育種工作尚未開展。代謝組學作為生物標志物最有力的高通量篩選工具,在植物抗病標志物指認方面效果顯著。本研究在建立銳頂鐮刀菌F.acuminatum實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測體系和該菌侵染黃芪后苯丙烷途徑關鍵酶活性變化的基礎上,利用1H NMR的非靶向和LC-MS的靶向代謝組學技術,分析F.acuminatum侵染后黃芪初級代謝產(chǎn)物和苯丙烷途徑次級代謝產(chǎn)物的變化,以此來指認黃芪抗F.acuminatum侵染的相關代謝產(chǎn)物,以期為黃芪的抗病育種和建立高效的抗性鑒定方法提供指標參考和思路。本論文的研究內(nèi)容及結果如下:1.基于EF-1α基因序列設計了F.acuminatum的特異性引物,建立了該病菌的SYBR Green I實時熒光定量PCR(Real-time qPCR)檢測體系。該方法特異性強,檢測靈敏度高,為0.002ng/μL,可在F.acuminatum接種黃芪根1h... 

【文章來源】:山西大學山西省

【文章頁數(shù)】:90 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

銳頂鐮刀菌的RT-qPCR檢測及黃芪對其侵染響應的代謝組分析


苯丙烷代謝途徑

銳頂鐮刀菌的RT-qPCR檢測及黃芪對其侵染響應的代謝組分析


引物FaeF4/FaeR4特異性檢測結果

銳頂鐮刀菌的RT-qPCR檢測及黃芪對其侵染響應的代謝組分析


引物FaeF/FaeR引物特異性檢測注:M:2000bp分子量標準;1:銳頂鐮刀菌;2:腐皮鐮刀菌;3:尖孢鐮刀菌;4:黃瓜

【參考文獻】:
期刊論文
[1]山西省蒙古黃芪根腐病優(yōu)勢致病菌群分析[J]. 高芬,趙曉霞,秦雪梅,雷振宏.  植物保護學報. 2018(04)
[2]天麻苯丙烷代謝途徑的轉(zhuǎn)錄組學分析[J]. 文歡,張大燕,彭成,王偉,謝曉芳,饒朝龍,高繼海.  中藥材. 2017(04)
[3]5種方法提取真菌基因組DNA作為PCR模板效果的比較[J]. 李煥宇,付婷婷,張云,呂天佑,李遠,徐秉良.  中國農(nóng)學通報. 2017(16)
[4]低溫脅迫下蒙古黃芪差異表達基因分析[J]. 華夢藝,顧卓雅,殷甘強,王偉,南蓬.  植物生理學報. 2017(04)
[5]采用EF-1α序列分析法對苜蓿根腐病病原菌——銳頂鐮刀菌的鑒定[J]. 易銘,梁嘉俊,史建,李洪建,程積民,焦鋒.  草業(yè)學報. 2017(02)
[6]山西黃芪產(chǎn)業(yè)發(fā)展思考[J]. 秦雪梅,李愛平,李科,李安平,寧潞宏.  中國中藥雜志. 2016(24)
[7]苯丙氨酸解氨酶的研究進展[J]. 杜欣誼.  現(xiàn)代化農(nóng)業(yè). 2016(07)
[8]接種尖鐮孢菌對枸杞苯丙烷代謝關鍵酶及產(chǎn)物的影響[J]. 李捷,馮麗丹,楊成德,王有科,何靜,張寶琳,陳秀蓉.  草業(yè)學報. 2016(05)
[9]植物響應病原真菌的代謝組學研究進展[J]. 張凡忠,劉小紅,章初龍,林福呈.  中國細胞生物學學報. 2016(04)
[10]機械損傷誘導植物苯丙氨酸解氨酶活性研究進展[J]. 吳瓊,方吳云,王文杰.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(01)

博士論文
[1]蒙古黃芪對干旱脅迫的響應及分子應答機制研究[D]. 賈鑫.內(nèi)蒙古大學 2016
[2]茶樹類黃酮3′-羥基化酶功能分析及其在代謝工程中的應用[D]. 周天山.西北農(nóng)林科技大學 2016
[3]甘肅環(huán)縣紫花苜蓿根腐病及其生物防治[D]. 文朝慧.蘭州大學 2015
[4]基于液質(zhì)聯(lián)用技術的代謝組學新方法的研究與應用[D]. 夏建飛.華東理工大學 2010

碩士論文
[1]基于酶學響應及代謝組變化的根腐病菌Fusarium spp.-黃芪互作研究[D]. 岳換弟.山西大學 2018
[2]基于LC-MS/MS技術的克羅恩病模型大鼠的靶標定量代謝組學研究[D]. 侯婉兒.廣州中醫(yī)藥大學 2016
[3]青枯菌接種后花生抗感2個品種中幾種防御性酶活性的變化[D]. 王輝.中南民族大學 2011
[4]采后檸檬酸與蘋果酸處理對馬鈴薯塊莖干腐病的抑制及其機理[D]. 張慶春.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2009



本文編號:3222720

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