銳頂鐮刀菌的RT-qPCR檢測及黃芪對其侵染響應(yīng)的代謝組分析
發(fā)布時(shí)間:2021-06-10 16:25
黃芪是常用大宗中藥材,根腐病的普遍發(fā)生嚴(yán)重阻礙其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展?共∮N是當(dāng)前根腐病防治最經(jīng)濟(jì)安全且有效的方法。然而,由于抗病性指標(biāo)缺失、傳統(tǒng)抗性鑒定方法效率低下等原因,針對黃芪根腐病的抗病育種工作尚未開展。代謝組學(xué)作為生物標(biāo)志物最有力的高通量篩選工具,在植物抗病標(biāo)志物指認(rèn)方面效果顯著。本研究在建立銳頂鐮刀菌F.acuminatum實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測體系和該菌侵染黃芪后苯丙烷途徑關(guān)鍵酶活性變化的基礎(chǔ)上,利用1H NMR的非靶向和LC-MS的靶向代謝組學(xué)技術(shù),分析F.acuminatum侵染后黃芪初級代謝產(chǎn)物和苯丙烷途徑次級代謝產(chǎn)物的變化,以此來指認(rèn)黃芪抗F.acuminatum侵染的相關(guān)代謝產(chǎn)物,以期為黃芪的抗病育種和建立高效的抗性鑒定方法提供指標(biāo)參考和思路。本論文的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.基于EF-1α基因序列設(shè)計(jì)了F.acuminatum的特異性引物,建立了該病菌的SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time qPCR)檢測體系。該方法特異性強(qiáng),檢測靈敏度高,為0.002ng/μL,可在F.acuminatum接種黃芪根1h...
【文章來源】:山西大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
苯丙烷代謝途徑
引物FaeF4/FaeR4特異性檢測結(jié)果
引物FaeF/FaeR引物特異性檢測注:M:2000bp分子量標(biāo)準(zhǔn);1:銳頂鐮刀菌;2:腐皮鐮刀菌;3:尖孢鐮刀菌;4:黃瓜
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]山西省蒙古黃芪根腐病優(yōu)勢致病菌群分析[J]. 高芬,趙曉霞,秦雪梅,雷振宏. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2018(04)
[2]天麻苯丙烷代謝途徑的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析[J]. 文歡,張大燕,彭成,王偉,謝曉芳,饒朝龍,高繼海. 中藥材. 2017(04)
[3]5種方法提取真菌基因組DNA作為PCR模板效果的比較[J]. 李煥宇,付婷婷,張?jiān)?呂天佑,李遠(yuǎn),徐秉良. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(16)
[4]低溫脅迫下蒙古黃芪差異表達(dá)基因分析[J]. 華夢藝,顧卓雅,殷甘強(qiáng),王偉,南蓬. 植物生理學(xué)報(bào). 2017(04)
[5]采用EF-1α序列分析法對苜蓿根腐病病原菌——銳頂鐮刀菌的鑒定[J]. 易銘,梁嘉俊,史建,李洪建,程積民,焦鋒. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2017(02)
[6]山西黃芪產(chǎn)業(yè)發(fā)展思考[J]. 秦雪梅,李愛平,李科,李安平,寧潞宏. 中國中藥雜志. 2016(24)
[7]苯丙氨酸解氨酶的研究進(jìn)展[J]. 杜欣誼. 現(xiàn)代化農(nóng)業(yè). 2016(07)
[8]接種尖鐮孢菌對枸杞苯丙烷代謝關(guān)鍵酶及產(chǎn)物的影響[J]. 李捷,馮麗丹,楊成德,王有科,何靜,張寶琳,陳秀蓉. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2016(05)
[9]植物響應(yīng)病原真菌的代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 張凡忠,劉小紅,章初龍,林福呈. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2016(04)
[10]機(jī)械損傷誘導(dǎo)植物苯丙氨酸解氨酶活性研究進(jìn)展[J]. 吳瓊,方吳云,王文杰. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(01)
博士論文
[1]蒙古黃芪對干旱脅迫的響應(yīng)及分子應(yīng)答機(jī)制研究[D]. 賈鑫.內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[2]茶樹類黃酮3′-羥基化酶功能分析及其在代謝工程中的應(yīng)用[D]. 周天山.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[3]甘肅環(huán)縣紫花苜蓿根腐病及其生物防治[D]. 文朝慧.蘭州大學(xué) 2015
[4]基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)新方法的研究與應(yīng)用[D]. 夏建飛.華東理工大學(xué) 2010
碩士論文
[1]基于酶學(xué)響應(yīng)及代謝組變化的根腐病菌Fusarium spp.-黃芪互作研究[D]. 岳換弟.山西大學(xué) 2018
[2]基于LC-MS/MS技術(shù)的克羅恩病模型大鼠的靶標(biāo)定量代謝組學(xué)研究[D]. 侯婉兒.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[3]青枯菌接種后花生抗感2個(gè)品種中幾種防御性酶活性的變化[D]. 王輝.中南民族大學(xué) 2011
[4]采后檸檬酸與蘋果酸處理對馬鈴薯塊莖干腐病的抑制及其機(jī)理[D]. 張慶春.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3222720
【文章來源】:山西大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
苯丙烷代謝途徑
引物FaeF4/FaeR4特異性檢測結(jié)果
引物FaeF/FaeR引物特異性檢測注:M:2000bp分子量標(biāo)準(zhǔn);1:銳頂鐮刀菌;2:腐皮鐮刀菌;3:尖孢鐮刀菌;4:黃瓜
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]山西省蒙古黃芪根腐病優(yōu)勢致病菌群分析[J]. 高芬,趙曉霞,秦雪梅,雷振宏. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2018(04)
[2]天麻苯丙烷代謝途徑的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析[J]. 文歡,張大燕,彭成,王偉,謝曉芳,饒朝龍,高繼海. 中藥材. 2017(04)
[3]5種方法提取真菌基因組DNA作為PCR模板效果的比較[J]. 李煥宇,付婷婷,張?jiān)?呂天佑,李遠(yuǎn),徐秉良. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(16)
[4]低溫脅迫下蒙古黃芪差異表達(dá)基因分析[J]. 華夢藝,顧卓雅,殷甘強(qiáng),王偉,南蓬. 植物生理學(xué)報(bào). 2017(04)
[5]采用EF-1α序列分析法對苜蓿根腐病病原菌——銳頂鐮刀菌的鑒定[J]. 易銘,梁嘉俊,史建,李洪建,程積民,焦鋒. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2017(02)
[6]山西黃芪產(chǎn)業(yè)發(fā)展思考[J]. 秦雪梅,李愛平,李科,李安平,寧潞宏. 中國中藥雜志. 2016(24)
[7]苯丙氨酸解氨酶的研究進(jìn)展[J]. 杜欣誼. 現(xiàn)代化農(nóng)業(yè). 2016(07)
[8]接種尖鐮孢菌對枸杞苯丙烷代謝關(guān)鍵酶及產(chǎn)物的影響[J]. 李捷,馮麗丹,楊成德,王有科,何靜,張寶琳,陳秀蓉. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2016(05)
[9]植物響應(yīng)病原真菌的代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 張凡忠,劉小紅,章初龍,林福呈. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2016(04)
[10]機(jī)械損傷誘導(dǎo)植物苯丙氨酸解氨酶活性研究進(jìn)展[J]. 吳瓊,方吳云,王文杰. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(01)
博士論文
[1]蒙古黃芪對干旱脅迫的響應(yīng)及分子應(yīng)答機(jī)制研究[D]. 賈鑫.內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[2]茶樹類黃酮3′-羥基化酶功能分析及其在代謝工程中的應(yīng)用[D]. 周天山.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[3]甘肅環(huán)縣紫花苜蓿根腐病及其生物防治[D]. 文朝慧.蘭州大學(xué) 2015
[4]基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)新方法的研究與應(yīng)用[D]. 夏建飛.華東理工大學(xué) 2010
碩士論文
[1]基于酶學(xué)響應(yīng)及代謝組變化的根腐病菌Fusarium spp.-黃芪互作研究[D]. 岳換弟.山西大學(xué) 2018
[2]基于LC-MS/MS技術(shù)的克羅恩病模型大鼠的靶標(biāo)定量代謝組學(xué)研究[D]. 侯婉兒.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[3]青枯菌接種后花生抗感2個(gè)品種中幾種防御性酶活性的變化[D]. 王輝.中南民族大學(xué) 2011
[4]采后檸檬酸與蘋果酸處理對馬鈴薯塊莖干腐病的抑制及其機(jī)理[D]. 張慶春.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3222720
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