本文關(guān)鍵詞：胸膜肺炎放線桿菌四川分離株的生物學(xué)特性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)能夠引起豬患傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP),給我國乃至全球養(yǎng)豬業(yè)帶來了重大損失。本研究進(jìn)行了APP的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究,主要研究如下：從來自四川廣安、眉山等地區(qū)疑似病料中進(jìn)行APP分離,經(jīng)分離培養(yǎng)、溶血現(xiàn)象、“衛(wèi)星’現(xiàn)象、染色鏡檢、PCR、生化特性等鑒定,共分離獲得9株胸膜肺炎放線桿菌(分別命名為SC-GA.SC-MS1～SC-MS8).對分離株進(jìn)行PCR鑒定均能擴(kuò)增出大小約422bp的目的條帶；對分離株分別提取酚水抗原同標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做瓊擴(kuò)血清型鑒定,分離自廣安病豬關(guān)節(jié)積液的SC-GA株為血清7型,分離白眉山病豬的脾臟SC-MS5株、肺臟SC-MS1.SC-MS2.SC-MS3.SC-MS4.SC-MS6.SC-MS7.SC-MS8等7株均為血清1型。分別對9株分離株進(jìn)行藥物敏感試驗的研究,結(jié)果表明9株分離株均對慶大霉素、卡那霉素、四環(huán)素、林可霉素、紅霉素耐藥；均對諾氟沙星、環(huán)丙沙星等喹諾酮類,頭孢唑林、頭孢哌酮／舒巴坦等頭孢類,以及氟苯尼考、阿莫西林等敏感；除SC-GA外,其他分離株均對青霉素G敏感；除SC-GA.SC-MSI外,其他分離株均對氨芐西林敏感SC-GA對青霉素G、氨芐西林耐藥。本研究揭示臨床對APP的預(yù)防和治療用藥,應(yīng)選擇青霉素類、頭孢類、喹諾酮類等,避免使用氨基糖苷類和大環(huán)內(nèi)酯類藥物。對分離株之間毒力大小進(jìn)行比較研究,發(fā)現(xiàn)血清1型分離株毒性明顯比7型分離株強(qiáng),且1型分離株之間毒性也有較大差異。選取一株毒性最強(qiáng)1型分離株(SC-MS5)和一株血清7型分離株(SC-GA)分別進(jìn)行了毒力測定研究。測定分離株對小鼠的半數(shù)致死量,并觀察對小鼠的致病性。研究結(jié)果表明SC-MS5株和SC-GA株對小鼠均有較強(qiáng)的致病性,其中SC-MS5株的半數(shù)致死量為5.4378×107CFU,SC-GA株的半數(shù)致死量為1.9543×108CFU。2株分離株均能引起小鼠產(chǎn)生明顯的胸膜肺炎癥狀及病理變化：呼吸困難、精神萎靡：肺臟出血、粘連,脾臟淤血腫大等。利用SC-MS5 1型株和SC-GA7型株制備滅活苗對小鼠進(jìn)行免疫,免疫結(jié)束后1 4d對小鼠進(jìn)行10LD50攻毒。檢測首免前、二免前、攻毒前血清的抗體水平,發(fā)現(xiàn)免疫后血清抗體水平明顯上升,且二免后上升明顯。在對小鼠的保護(hù)方面,SC-GA7型分離株滅活苗對自身的免疫保護(hù)率為66.7%,SC-MS51型分離株滅活苗對自身的免疫保護(hù)率為83.3%；二價苗對各自的保護(hù)率均為83.3%。結(jié)果表明,分離株具有較好的免疫原性。本研究對豐富四川地區(qū)APP的病原學(xué)資料及豬傳染性胸膜肺炎臨床防治用藥提供科學(xué)依據(jù),對四川地區(qū)APP的防治具有一定臨床實際指導(dǎo)意義。
【關(guān)鍵詞】：四川 胸膜肺炎放線桿菌 分離鑒定 生物學(xué)特性
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.6
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-7
• 縮略語表7-11
• 第一章 文獻(xiàn)綜述11-21
• 1 病原學(xué)11-15
• 1.1 歷史及歸類11
• 1.2 病原形態(tài)與染色特性11
• 1.3 生化特性11
• 1.4 生長及培養(yǎng)特性11-12
• 1.5 耐藥性與抵抗力12
• 1.6 生物型與血清型12-13
• 1.7 致病因子13-15
• 1.8 致病機(jī)理及病理變化15
• 2 豬傳染性胸膜肺炎及其危害15-16
• 3 豬傳染性胸膜肺炎的診斷16-19
• 3.1 臨床診斷16-17
• 3.2 病原分離診斷17
• 3.3 分子生物學(xué)方法診斷17-18
• 3.4 血清學(xué)方法診斷18-19
• 4 豬傳染性胸膜肺炎的流行情況19
• 5 豬傳染性胸膜肺炎的防治19-20
• 6 研究的目的與意義20-21
• 第二章 胸膜肺炎放線桿菌分離鑒定及其生物學(xué)特性研究21-50
• 1 材料21-22
• 1.1 試驗材料21
• 1.2 試驗動物21
• 1.3 培養(yǎng)基及其制備方法21
• 1.4 病料來源21-22
• 1.5 主要試劑及儀器22
• 2 方法22-29
• 2.1 病料采集22-23
• 2.2 APP的分離鑒定23-24
• 2.3 生長形態(tài)觀察24-25
• 2.4 鏡檢形態(tài)觀察25
• 2.5 衛(wèi)星現(xiàn)象觀察25
• 2.6 NAD依賴試驗25
• 2.7 溶血現(xiàn)象觀察25
• 2.8 藥敏試驗25
• 2.9 生化試驗25-26
• 2.10 血清型鑒定26-27
• 2.11 生長曲線測定27
• 2.12 對小鼠的致病性試驗27-28
• 2.13 對小鼠免疫保護(hù)力研究28-29
• 3 結(jié)果29-45
• 3.1 細(xì)菌的分離鑒定29-32
• 3.2 生長特性32
• 3.3 鏡檢形態(tài)32-33
• 3.4 衛(wèi)星現(xiàn)象33
• 3.6 溶血現(xiàn)象33-34
• 3.7 藥敏試驗結(jié)果34-35
• 3.8 生化試驗結(jié)果35
• 3.9 血清型鑒定結(jié)果35-37
• 3.10 生長曲線測定結(jié)果37-38
• 3.11 對小鼠致病性結(jié)果38-42
• 3.12 對小鼠攻毒后的保護(hù)情況42-45
• 4 討論45-48
• 4.1 病料采集及細(xì)菌的分離鑒定45-46
• 4.2 藥敏試驗46
• 4.3 血清型鑒定46-47
• 4.4 生長曲線47
• 4.5 對小鼠免疫保護(hù)47-48
• 5 小結(jié)48-50
• 5.1 分離鑒定48
• 5.2 生長特性48
• 5.3 形態(tài)特性48-49
• 5.4 耐藥特性49
• 5.5 生化特性49
• 5.6 對小鼠的致病性49
• 5.7 對小鼠的免疫保護(hù)49-50
• 第三章 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 致謝57

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本文編號：319486