鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構(gòu)建及其對巨噬細(xì)胞自噬的影響
發(fā)布時(shí)間：2021-04-07 16:57
鼠傷寒沙門菌作為病原菌,在入侵宿主體內(nèi)之后會遭遇到宿主出于免疫保護(hù)而形成的高活性氧（ROS）內(nèi)環(huán)境。過量的ROS會對生物體的DNA、蛋白質(zhì)和脂類等產(chǎn)生毒害作用。超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）作為唯一可以清除超氧陰離子（·O2-）的抗氧化酶系成員,是細(xì)胞抵御ROS脅迫的第一道防線。已有研究表明,SOD參與到細(xì)菌的生長、菌膜生成、毒力等方面,但是對于其在鼠傷寒沙門菌中的功能研究,迄今為止還未見報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)通過Red重組系統(tǒng),構(gòu)建了鼠傷寒沙門菌SM52ΔsodA缺失株和SM52CΔsodA互補(bǔ)株,對其生物學(xué)特性以及對巨噬細(xì)胞自噬的影響進(jìn)行探討,并且表達(dá)了SodA蛋白,對其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。為進(jìn)一步研究sodA基因的功能以及在細(xì)胞自噬過程中的作用奠定良好基礎(chǔ)。主要內(nèi)容如下:1.鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究利用Red同源重組系統(tǒng)構(gòu)建鼠傷寒沙門菌sodA基因缺失株SM52ΔsodA以及互補(bǔ)株SM52CΔsodA,并對其生長速度、抗氧化脅迫、運(yùn)動(dòng)性、菌膜形成、耐環(huán)境壓力（酸、堿、滲透壓、血清）、ROS測定、酶活性等生物學(xué)特性進(jìn)行研究。結(jié)果...
【文章來源】：河南科技大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：75 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
Cm打靶片段的擴(kuò)增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
圖 2-1 Cm 打靶片段的擴(kuò)增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM：5000 Marker；泳道1：打靶片段；：Marker DL5000；Lane 1：PCR product of 的構(gòu)建渾濁狀態(tài)時(shí)，使用菌液 PCR 對其進(jìn)行KD46 鑒定性引物可以擴(kuò)增出明顯目的46 大小為 888 bp，證明 SM52pKD46
圖 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鑒定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鑒定；泳道 2：SM52 野生株外部鑒定f SM52ΔsodA；Lane 2：PCR product of SM52；行內(nèi)部檢測。對 invA 及 sodA 內(nèi)部片段 sodA 內(nèi)部片段，證明 SM52ΔsodA::Cm
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]分子生物學(xué)技術(shù)在食源性致病菌檢測中的研究進(jìn)展[J]. 唐廷廷,韓國全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2016(09)
[2]多重PCR技術(shù)在食源性致病菌檢測中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 李凡,許恒毅,李福來. 食品工業(yè)科技. 2015(21)
[3]黑脈羊肚菌SOD的純化及特性研究[J]. 侯玉艷,吳素蕊,張麗,趙天瑞,邰麗梅. 食品工業(yè)科技. 2015(15)
[4]兩種檢測SOD酶活性方法的比較[J]. 曲敏,秦麗楠,劉羽佳,范宏臣,朱姝,王金鳳. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2014(10)
[5]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在食源性致病菌檢測中的應(yīng)用[J]. 李敏,綦國紅. 中國食物與營養(yǎng). 2014(08)
[6]沙門菌分子鑒定和分型方法的研究進(jìn)展[J]. 王玉平. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2014(10)
[7]鼠傷寒沙門菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性初步研究[J]. 田芳華,程相朝,張春杰,李銀聚,李靜,張明亮,李小康,李正,趙戰(zhàn)勤. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(11)
[8]動(dòng)物血液資源的開發(fā)利用研究進(jìn)展[J]. 楊葆春,靳義超,李全,吳海玥,賈濮華. 青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的提取及分離純化方法研究綜述[J]. 王志鑫,孔維寶. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2010(10)
[10]豬霍亂沙門氏菌C78-1株Δcrp缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,趙戰(zhàn)勤,張春杰,李銀聚,吳庭才. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(05)
碩士論文
[1]木瓜SOD的顆�；庸ぜ捌渖飳W(xué)效應(yīng)研究[D]. 趙靖.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶（SOD）提取及純化技術(shù)的研究[D]. 王海靈.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3123840
【文章來源】：河南科技大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：75 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
Cm打靶片段的擴(kuò)增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
圖 2-1 Cm 打靶片段的擴(kuò)增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM：5000 Marker；泳道1：打靶片段；：Marker DL5000；Lane 1：PCR product of 的構(gòu)建渾濁狀態(tài)時(shí)，使用菌液 PCR 對其進(jìn)行KD46 鑒定性引物可以擴(kuò)增出明顯目的46 大小為 888 bp，證明 SM52pKD46
圖 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鑒定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鑒定；泳道 2：SM52 野生株外部鑒定f SM52ΔsodA；Lane 2：PCR product of SM52；行內(nèi)部檢測。對 invA 及 sodA 內(nèi)部片段 sodA 內(nèi)部片段，證明 SM52ΔsodA::Cm
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]分子生物學(xué)技術(shù)在食源性致病菌檢測中的研究進(jìn)展[J]. 唐廷廷,韓國全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2016(09)
[2]多重PCR技術(shù)在食源性致病菌檢測中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 李凡,許恒毅,李福來. 食品工業(yè)科技. 2015(21)
[3]黑脈羊肚菌SOD的純化及特性研究[J]. 侯玉艷,吳素蕊,張麗,趙天瑞,邰麗梅. 食品工業(yè)科技. 2015(15)
[4]兩種檢測SOD酶活性方法的比較[J]. 曲敏,秦麗楠,劉羽佳,范宏臣,朱姝,王金鳳. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2014(10)
[5]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在食源性致病菌檢測中的應(yīng)用[J]. 李敏,綦國紅. 中國食物與營養(yǎng). 2014(08)
[6]沙門菌分子鑒定和分型方法的研究進(jìn)展[J]. 王玉平. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2014(10)
[7]鼠傷寒沙門菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性初步研究[J]. 田芳華,程相朝,張春杰,李銀聚,李靜,張明亮,李小康,李正,趙戰(zhàn)勤. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(11)
[8]動(dòng)物血液資源的開發(fā)利用研究進(jìn)展[J]. 楊葆春,靳義超,李全,吳海玥,賈濮華. 青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的提取及分離純化方法研究綜述[J]. 王志鑫,孔維寶. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2010(10)
[10]豬霍亂沙門氏菌C78-1株Δcrp缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,趙戰(zhàn)勤,張春杰,李銀聚,吳庭才. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(05)
碩士論文
[1]木瓜SOD的顆�；庸ぜ捌渖飳W(xué)效應(yīng)研究[D]. 趙靖.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶（SOD）提取及純化技術(shù)的研究[D]. 王海靈.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3123840
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