本文關(guān)鍵詞：光葉鐵仔殺蟲(chóng)活性成分及殺蟲(chóng)機(jī)理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：光葉鐵仔(Myrsine stolonifera (Koidz.)E. Walker)屬紫金�？�(Myrsinaceae)鐵仔屬(Myrsine)植物。以小菜蛾(Plutella xyllostella (Linnaeus))2-3齡幼蟲(chóng)和家蠅(Musca domestica)成蟲(chóng)為靶標(biāo),采用活性跟蹤分離技術(shù)對(duì)光葉鐵仔殺蟲(chóng)活性物質(zhì)進(jìn)行了分離,采用核磁共振(NMR)、質(zhì)譜(MS)等技術(shù)鑒定了活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu),并對(duì)其殺蟲(chóng)機(jī)理進(jìn)行了初步研究,為進(jìn)一步利用該植物資源奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：1.采用胃毒法測(cè)定了光葉鐵仔根、莖、葉甲醇粗提取(5mg/g)對(duì)家蠅成蟲(chóng)的活性,結(jié)果表明莖部甲醇提取物的48 h校正死亡率大于50%；采用葉片藥膜法理小菜蛾2-3齡幼蟲(chóng),結(jié)果表明莖部甲醇提取物(5 mg/mL)的72 h校正死亡率最高,達(dá)到23.70%；根部甲醇提取(5 mg/mL)處理小菜蛾2-3齡幼蟲(chóng)24 h后,其體重抑制率最大,達(dá)到34.77%；而莖部甲醇提取物(5 mg/mL)48 h后對(duì)小菜蛾的非選擇性和選擇性拒食率最高,分別為44.84%和37.46%。2.采用D101型大孔吸附樹(shù)脂對(duì)光葉鐵仔甲醇提取物進(jìn)行了初步分離,并測(cè)定了不同餾分的殺蟲(chóng)活性。結(jié)果表明,根莖95%乙醇餾分(2 mg/g)殺蟲(chóng)活性最強(qiáng),對(duì)家蠅成蟲(chóng)36h的校正死亡率達(dá)到85%以上。葉部50%乙醇餾分對(duì)小菜蛾2-3齡幼蟲(chóng)胃毒作用效果最強(qiáng),其72 h的校正死亡率為57.13%,且葉70%和50%乙醇餾分、根莖95%和70%乙醇餾分對(duì)2-3齡小菜蛾拒食作用明顯,作用72 h后非選擇性拒食率均達(dá)到90%以上；而葉50%與70%乙醇餾分的體重抑制率在72 h后都超過(guò)了100%。3.采用胃毒法研究了光葉鐵仔根莖95%乙醇餾分對(duì)小菜蛾殺蟲(chóng)作用機(jī)制。結(jié)果表明,95%餾分(20.65 mg/mL)作用試蟲(chóng)48 h后,對(duì)羧酸酯酶有明顯的抑制作用；對(duì)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶活性抑制作用12h最強(qiáng)；對(duì)多功能氧化酶O-脫甲基活力為抑制作用24 h最顯著；對(duì)乙酰膽堿酯酶活性具一定的抑制作用,處理36h后顯著高于對(duì)照處理。4.采用活性跟蹤分離技術(shù)從光葉鐵仔中分離得到8個(gè)活性化合物,采用核磁共振和質(zhì)譜對(duì)其結(jié)構(gòu)分別鑒定為4個(gè)黃酮類(lèi)化合物：槲皮素-7-O-α-D-葡萄糖苷、kaempferol-3-O-glucopyranoside-rhamnose-glucopyranoside、quercetin-3-O-glucopyranoside- rhamnose-glucopyranoside、表兒茶素；1個(gè)酚酸類(lèi)：3,5-二甲氧基-芐醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；3個(gè)苯丙素類(lèi)：2,6-二甲氧基-4-羥基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丁香苷、(+)-lyoniresinol 3a-O-β-D-glucopyranoside。5.采用胃毒法測(cè)定8種化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性。結(jié)果表明,丁香苷和2,6-二甲氧基-4-羥基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、kaempferol-3-O-glu-rha-glu、quercetin-3-O-glu-rha-glu(500 μg/g)表現(xiàn)出良好的殺蟲(chóng)活性。kaempferol-3-O-glu-rha-glu和quercetin-3-O-glu-rha-glu對(duì)家蠅成蟲(chóng)的LCso值分別為0.75 mg/g和1.81 mg/g。6.測(cè)定了2種高活性化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)酶活性的影響。結(jié)果表明kaempferol-3-O-glu-rha-glu和quercetin-3-O-glu-rha-glu 2種化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)的羧酸酯酶、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶、多功能氧化酶以及乙酰膽堿酯酶活性均有一定的抑制作用,其中對(duì)乙酰膽堿酯酶和多功能氧化酶的抑制作用顯著。7.以斜紋夜蛾SL細(xì)胞為模型研究了3種高活性化合物對(duì)昆蟲(chóng)細(xì)胞的毒性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),丁香苷(100 μg/mL)對(duì)斜紋夜蛾SL細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制活性(MTT法),其抑制率為40.34%,低于對(duì)照藥劑魚(yú)藤酮(100 μg/mL)對(duì)細(xì)胞的作用(62.47%)；丁香苷(50 μg/mL)對(duì)斜紋夜蛾SL細(xì)胞線粒體膜電位影響最大,其Rhodaminel23熒光強(qiáng)度為25.19,高于對(duì)照藥劑魚(yú)藤酮(熒光強(qiáng)度為22.36)；丁香苷(50μg/mL)對(duì)斜紋夜蛾SL細(xì)胞活性氧影響(DCF熒光強(qiáng)度為27.07)與對(duì)照藥劑魚(yú)藤酮(DCF熒光強(qiáng)度為26.04)相當(dāng)。本文研究了光葉鐵仔提取物的殺蟲(chóng)活性及活性機(jī)理,并采用活性跟蹤方法首次從光葉鐵仔中分離得到8個(gè)化合物,分別為槲皮素-7-O-α-D-葡萄糖苷、kaempferol-3-O-glucopyranoside-rhamnose-glucopyranoside、quercetin-3-O-glucopyranoside-rhamnose-glucopyranoside、表兒茶素、3,5-二甲氧基-芐醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、2,6-二甲氧基4-羥基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丁香苷、(+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside。丁香苷有很好的殺蟲(chóng)活性,其作用機(jī)理需要進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：光葉鐵仔 殺蟲(chóng)活性 活性跟蹤 細(xì)胞毒性
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S482.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 前言11-12
• 1 文獻(xiàn)綜述12-21
• 1.1 植物源殺蟲(chóng)劑的研究概況12-19
• 1.1.1 植物源殺蟲(chóng)劑種類(lèi)及應(yīng)用13-17
• 1.1.2 植物源殺蟲(chóng)劑生物活性及作用機(jī)理17-18
• 1.1.3 植物源殺蟲(chóng)劑的前景18-19
• 1.2 光葉鐵仔的化學(xué)成分研究現(xiàn)狀19-20
• 1.3 研究目的及意義20
• 1.4 研究路線20-21
• 2 材料與方法21-30
• 2.1 試驗(yàn)材料21-22
• 2.1.1 供試植物21
• 2.1.2 供試?yán)ハx(chóng)21
• 2.1.3 供試細(xì)胞系21
• 2.1.4 供試儀器21-22
• 2.1.5 供試試劑22
• 2.2 試驗(yàn)方法22-30
• 2.2.1 植物成分的提取22
• 2.2.2 植物甲醇提取物活性測(cè)定22-24
• 2.2.3 化學(xué)成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定24-28
• 2.2.4 化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)的毒力測(cè)定28
• 2.2.5 高活性化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)酶活性的影響28
• 2.2.6 高活性化合物對(duì)斜紋夜蛾SL細(xì)胞的毒性28-30
• 2.2.7 數(shù)據(jù)分析30
• 3 結(jié)果與分析30-63
• 3.1 光葉鐵仔根莖葉部活性成分的提取30
• 3.2 光葉鐵仔各部位甲醇提取物的生物活性30-33
• 3.2.1 光葉鐵仔各部位甲醇提取物的對(duì)家蠅的殺蟲(chóng)活性30-31
• 3.2.2 光葉鐵仔甲醇提取物對(duì)小菜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育的影響31-32
• 3.2.3 光葉鐵仔甲醇提取物對(duì)小菜蛾的拒食活性32-33
• 3.3 大孔吸附樹(shù)脂處理根莖部餾分的殺蟲(chóng)活性成分的分離33-54
• 3.3.0 D101型大孔吸附樹(shù)脂不同乙醇餾分對(duì)家蠅成蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性34-35
• 3.3.1 D101型大孔吸附樹(shù)脂不同乙醇餾分對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的胃毒作用35
• 3.3.2 光葉鐵仔不同部位甲醇提取物的D101型大孔吸附樹(shù)脂乙醇餾分對(duì)小菜蛾的拒食作用35
• 3.3.3 光葉鐵仔不同部位甲醇提取物的D101型大孔吸附樹(shù)脂餾分對(duì)小菜蛾的體重抑制作用35-39
• 3.3.4 根莖95%乙醇餾分與葉50%乙醇餾分對(duì)小菜蛾的生物活性影響39-41
• 3.3.5 光葉鐵仔根莖95%乙醇餾分對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的毒力41
• 3.3.6 光葉鐵仔根莖95%乙醇餾分對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的酶活性的影響41-43
• 3.3.7 光葉鐵仔活性成分的提取、分離與純化43-48
• 3.3.8 光葉鐵仔殺蟲(chóng)活性成分的鑒定48-54
• 3.4 化合物的殺蟲(chóng)活性及殺蟲(chóng)機(jī)理54-63
• 3.4.1 光葉鐵仔中8種化合物對(duì)家蠅的殺蟲(chóng)活性54-56
• 3.4.2 光葉鐵仔的2種化合物對(duì)家蠅的毒力56-57
• 3.4.3 光葉鐵仔高活性2種化合物對(duì)家蠅成蟲(chóng)的酶活性的影響57-59
• 3.4.4 活性化合物對(duì)斜紋夜蛾SL細(xì)胞的毒性59-63
• 4 總結(jié)與討論63-67
• 4.1 植物粗提物的活性及應(yīng)用63-64
• 4.2 光葉鐵仔化學(xué)成分靶向分離及結(jié)構(gòu)鑒定64
• 4.3 光葉鐵仔化學(xué)成分生物活性64-66
• 4.3.1 光葉鐵仔化學(xué)成分殺蟲(chóng)活性64-65
• 4.3.2 光葉鐵仔化學(xué)成分對(duì)家蠅酶活的影響65
• 4.3.3 光葉鐵仔化學(xué)成分的細(xì)胞毒性65-66
• 4.4 有待進(jìn)一步研究的問(wèn)題66-67
• 參考文獻(xiàn)67-74
• 致謝74-75
• 附錄A 化合物圖譜75-85
• 附錄B 作者攻讀碩士期間發(fā)表的論文及取得的成果85

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王學(xué)貴;沈麗淘;張敏;楊繼芝;陳華保;;36種植物甲醇提取物殺蚜蟲(chóng)活性的研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年02期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李倩;光葉鐵仔殺蟲(chóng)活性成分及殺蟲(chóng)機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：光葉鐵仔殺蟲(chóng)活性成分及殺蟲(chóng)機(jī)理研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：311829