遼寧省稻曲病菌生物學(xué)特性及遺傳多樣性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-18 15:42
稻曲病是一種水稻穗部真菌性病害,在我國(guó)南北方稻區(qū)均有發(fā)生,現(xiàn)已成為限制水稻高產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)的主要障礙之一。本試驗(yàn)采用形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合rDNA-ITS序列分析確定病原菌的種類、同源性及種內(nèi)群體分化狀況;利用菌絲生長(zhǎng)速率法、孢子萌發(fā)法和相關(guān)性分析研究不同地區(qū)稻曲病菌的生物學(xué)特性;運(yùn)用重復(fù)序列PCR(repetitive element-based PCR,rep-PCR)技術(shù)和田間接種方法探索稻曲病菌的遺傳多樣性及致病力差異;使用單因素和正交設(shè)計(jì)建立稻曲病菌的最佳基于序列擴(kuò)增多態(tài)性(Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP)的反應(yīng)體系和篩選SRAP多態(tài)性引物,應(yīng)用最佳SRAP反應(yīng)體系進(jìn)一步明確稻曲病菌種群多樣性遺傳水平,以上研究旨為稻曲病的綜合防控和抗病育種提供理論依據(jù),研究結(jié)果如下:遼寧省稻曲病菌分離及rDNA-ITS鑒定:2017年自遼寧省8個(gè)市區(qū)(沈陽(yáng)市、鞍山市、盤錦市、大連市、丹東市、遼陽(yáng)市、鐵嶺市、撫順市)采集273株稻曲病粒樣品,經(jīng)組織分離法或農(nóng)用鏈霉素洗滌法和單孢純化后共獲得159株供試菌株;選取63株代表菌株以通用引物ITS1和ITS...
【文章來(lái)源】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:98 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分供試菌株的rDNA-ITS序列PCR擴(kuò)增產(chǎn)物Fig.1-2TherDNA-ITSPCRamplifiedproductsofsometestedstrains
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文27圖1-363株供試菌株基于rDNA-ITS序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.1-3ThephylogenetictreebasedonrDNA-ITSsequencesof63testedstrains2.2.6供試菌株的遺傳關(guān)系分化遺傳距離的遠(yuǎn)近可反映出供試菌株的進(jìn)化關(guān)系,采用MEGA7數(shù)據(jù)處理軟件根據(jù)MaximumCompositeLikelihood參數(shù)分析得到序列間遺傳距離(表1-3)。63株供試菌株的遺傳距離均在0.000~2.000之間;SY-9與DL-2菌株間的遺傳距離最遠(yuǎn),為2.000;DL-2與AS-1、PJ-4與DL-2、SY-9與TL-4等菌株間的遺傳距離為1.000,表現(xiàn)出較近的遺傳距離;AS-2與AS-1、DL-1與DD-9、DL-3與DL-1等菌株間的遺傳距離為0.000,表現(xiàn)出非常近的遺傳距離,則說(shuō)明大多數(shù)供試菌株之間的遺傳關(guān)系較近,其遺傳分化可能發(fā)生很晚或者種群間的基因流動(dòng)發(fā)生頻繁。表1-363株稻曲病菌之間的遺傳距離Table1-3Geneticdistancebetween63strainsofUstilaginoideavirens菌株編號(hào)NumberofstrainsAS-1AS-2~DL-1DL-2DL-3DL-4~SY-8SY-9SY-10~TL-3TL-4AS-1AS-2~DL-10.000DL-21.0001.000DL-30.0000.0001.000DL-4~SY-80.0000.0001.0000.000SY-90.0000.0002.0001.0001.000SY-10~TL-30.0000.0001.0000.0000.0001.000TL-40.0000.0001.0000.0000.0001.0000.000
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文33注:a、b、c、d、e、f:不同培養(yǎng)基、不同碳源、不同氮源、不同溫度、不同pH、不同光照條件。Note:a,b,c,d,e,f:differentculturemedium,differentcarbonsource,differentnitrogensource,differenttemperature,differentpH,differentlightconditions.圖2-1不同培養(yǎng)環(huán)境對(duì)稻曲病菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響Fig.2-1EffectofdifferentcultureenvironmentonmycelialgrowthrateofU.virens注:a、b、c、d、e、f、g、h、i、j、k、l:麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基、燕麥培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、V8瓊脂培養(yǎng)基、脅本哲氏培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、薩市培養(yǎng)基、水瓊脂培養(yǎng)基、無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基、玉米粉培養(yǎng)基。Note:a,b,c,d,e,f,g,h,i,j,k,l:MEA,OA,PDA,PSA,V8,XBZ,CDA,Rice,SA,Water,ISA,CMA.圖2-2不同培養(yǎng)基對(duì)稻曲病菌生長(zhǎng)速率的影響(正面)Fig.2-2EffectofdifferentculturemediumonmycelialgrowthrateofU.virens(positive)ab\cdefghijklabcdefaabcdfe
本文編號(hào):3088563
【文章來(lái)源】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:98 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分供試菌株的rDNA-ITS序列PCR擴(kuò)增產(chǎn)物Fig.1-2TherDNA-ITSPCRamplifiedproductsofsometestedstrains
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文27圖1-363株供試菌株基于rDNA-ITS序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.1-3ThephylogenetictreebasedonrDNA-ITSsequencesof63testedstrains2.2.6供試菌株的遺傳關(guān)系分化遺傳距離的遠(yuǎn)近可反映出供試菌株的進(jìn)化關(guān)系,采用MEGA7數(shù)據(jù)處理軟件根據(jù)MaximumCompositeLikelihood參數(shù)分析得到序列間遺傳距離(表1-3)。63株供試菌株的遺傳距離均在0.000~2.000之間;SY-9與DL-2菌株間的遺傳距離最遠(yuǎn),為2.000;DL-2與AS-1、PJ-4與DL-2、SY-9與TL-4等菌株間的遺傳距離為1.000,表現(xiàn)出較近的遺傳距離;AS-2與AS-1、DL-1與DD-9、DL-3與DL-1等菌株間的遺傳距離為0.000,表現(xiàn)出非常近的遺傳距離,則說(shuō)明大多數(shù)供試菌株之間的遺傳關(guān)系較近,其遺傳分化可能發(fā)生很晚或者種群間的基因流動(dòng)發(fā)生頻繁。表1-363株稻曲病菌之間的遺傳距離Table1-3Geneticdistancebetween63strainsofUstilaginoideavirens菌株編號(hào)NumberofstrainsAS-1AS-2~DL-1DL-2DL-3DL-4~SY-8SY-9SY-10~TL-3TL-4AS-1AS-2~DL-10.000DL-21.0001.000DL-30.0000.0001.000DL-4~SY-80.0000.0001.0000.000SY-90.0000.0002.0001.0001.000SY-10~TL-30.0000.0001.0000.0000.0001.000TL-40.0000.0001.0000.0000.0001.0000.000
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文33注:a、b、c、d、e、f:不同培養(yǎng)基、不同碳源、不同氮源、不同溫度、不同pH、不同光照條件。Note:a,b,c,d,e,f:differentculturemedium,differentcarbonsource,differentnitrogensource,differenttemperature,differentpH,differentlightconditions.圖2-1不同培養(yǎng)環(huán)境對(duì)稻曲病菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響Fig.2-1EffectofdifferentcultureenvironmentonmycelialgrowthrateofU.virens注:a、b、c、d、e、f、g、h、i、j、k、l:麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基、燕麥培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、V8瓊脂培養(yǎng)基、脅本哲氏培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、薩市培養(yǎng)基、水瓊脂培養(yǎng)基、無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基、玉米粉培養(yǎng)基。Note:a,b,c,d,e,f,g,h,i,j,k,l:MEA,OA,PDA,PSA,V8,XBZ,CDA,Rice,SA,Water,ISA,CMA.圖2-2不同培養(yǎng)基對(duì)稻曲病菌生長(zhǎng)速率的影響(正面)Fig.2-2EffectofdifferentculturemediumonmycelialgrowthrateofU.virens(positive)ab\cdefghijklabcdefaabcdfe
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