支持細胞（Sertoli cells,SCs）是維持睪丸免疫豁免功能的重要體細胞,主要通過形成血睪屏障（BTB）、高表達FasL、分泌免疫抑制因子（如TGF-β、IL-1、 IGF-Ⅱ等）來實現(xiàn)其免疫豁免功能。腫瘤壞死因子（TNF）屬TNFSFL家族成員,包括TNF-α和TNF-β兩種類型,睪丸中主要分泌的是TNF-α。TNF-α通過與SCs上的受體結(jié)合,影響SCs分泌功能,調(diào)節(jié)FSH誘導(dǎo)的SCs生精功能和SCs參與的BTB的開閉及SCs免疫調(diào)節(jié)因子的分泌,進而影響SCs的各種功能。但目前TNF-α是調(diào)節(jié)SCs中Fas/FasL系統(tǒng)的表達的機制還不完善。本研究的目的是探索TNF-α對SCs中Fas/FasL的表達的影響以及調(diào)節(jié)Fas/FasL表達的分子機制。本研究以體外培養(yǎng)的仔豬睪丸SCs為研究材料,用TNF-α處理培養(yǎng)的SCs,采用CCK-8細胞增殖檢測試劑盒檢測TNF-α對SCs增殖的影響,利用流式細胞術(shù)檢測TNF-α對SCs周期進程的變化和細胞早期凋亡的影響；用Western blot和熒光定量PCR技術(shù)檢測Fas/FasL、MMP-2/MMP-9和TIMP-2/TIMP-1蛋白... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１體外培養(yǎng)的ＳＣｓ??Ａ■培養(yǎng)第?１?天（ｘｌＯＯ）；?Ｂ．培養(yǎng)?２４ｈ?后（ｘｌＯＯ）；?Ｃ．培養(yǎng)?４８ｈ?后?ＯｌＯＯ）；??．ｘｘ．＞＜

Ｄ．ＳＣｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ?ｆｏｒ?３?ｄａｙｓ（＞＜１００），?Ｅ．ＳＣｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ?ｆｏｒ?４?ｄａｙｓ（＞＾１００），Ｆ．ＳＣｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ?ｆｏｒ?３?ｄａｙｓ（＾２００）??２總ＲＮＡ完整性檢測??從圖２可以清楚地看出總ＲＮＡ電泳所得２８Ｓ、１８Ｓ條帶，其中２８Ｓ的亮度為１８Ｓ的??２倍，５Ｓ比較彌散、模糊，不易看清楚。同時檢測所得樣品的ＯＤ值，ＯＤ２６（）／ＯＤ２８Ｏ??在１．８？２．０之間，表明ＲＮＡ的純度較高，可用于下一步的分析。??３３??

Ｆｉｇ．２?Ｄｅｌｅｃｔｉｎｇ?ｔｈｅ?ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??３勞光定量ＰＣＲ礦增曲線和溶解曲線??從圖３Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｇ、Ｉ、Ｋ可以看出，基因的擴增曲線為“Ｓ’’型的光滑曲線，??且在基線期，基線平穩(wěn)，說明干擾信號很��；ＡＣＴＢ起跳的循環(huán)數(shù)為１５？２５，滿??足作為內(nèi)參的條件。??從圖３Ｂ、Ｄ、Ｆ、Ｈ、Ｊ、Ｌ可以看出，各基因的溶解曲線中均出現(xiàn)單一峰，說??明無非特異性擴增產(chǎn)物，定量準(zhǔn)確。??Ａｍｐｌｆ?ｃａｔｉｏｎ?Ｍ？？Ｐ？ａｆｃ??■＇ｉ?：?．Ｊ?＇Ｋ—‘一１??ｍ，，．?一二－?：力〕?ＡＣＴＢ???２?：?ＡＣｌ＇Ｂ?／?Ｆａｓ?％Ｉ?ｆｆｆｙｋ＾?Ｆａｓ??“＂“．．?—?——－Ｉ?１?－?＾?■?＼?丨?？?Ｉ?Ｉ?＊?ｆ?＜?？?＞?Ｉ?１?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?ｔ?Ｉ?ｔ?Ｉ?，？１，１１?Ｉ?Ｉ??０?ｌ．＿?．．ＩＩ?４ｒ．＜?Ｋ?７０?７５?ＤＯ?ＣＳ?如?３９??丨?ｅｍｕ＊??Ａ?Ｂ??Ｉ?Ｍｄｌ??‘丨丨ｎ；??■？Ｉ?Ｉ?．Ｍｌ?４＜ｉ?ｆ?ｆ?Ｉ．�。海�?ｎ？??Ｃ、ｄ，ｋ?Ｔｔｉ?ｉｊｗｉｌｉｉｉｆ

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3024500