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內(nèi)蒙古地區(qū)乳源金黃色葡萄球菌腸毒素基因分布的調(diào)查及Ⅰ型腸毒素蛋白表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-02-08 07:36
  試驗(yàn)旨在了解內(nèi)蒙古地區(qū)臨床型奶牛乳房炎乳樣中金黃色葡萄球菌腸毒素(Staphylococcal enterotoxin,SE)基因的分布狀況,為預(yù)測(cè)SE的污染風(fēng)險(xiǎn)和研制金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)疫苗提供基礎(chǔ)資料。采用PCR檢測(cè)方法,對(duì)從內(nèi)蒙古地區(qū)奶牛乳房炎乳樣中分離到的121株S.aureus.進(jìn)行sea~selq 16種腸毒素基因檢測(cè)。結(jié)果表明,121株S.aureus全部攜帶SE基因,其中攜帶比例較高的是sei、selm和selj基因,分別為121株(100%)、81株(66.94%)和64株(52.89%);未檢測(cè)到see、seh、selo和selp基因;攜帶新型腸毒素基因(seg~selq)共有121株(100%),其比例高于攜帶傳統(tǒng)腸毒素基因(sea~see)的59株(48.76%)。同時(shí)攜帶2種及2種以上SE毒基因的有118株(97.52%),組合也很復(fù)雜,表明內(nèi)蒙古地區(qū)由金黃色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎情況復(fù)雜,防治較為困難。在內(nèi)蒙古地區(qū)臨床型奶牛乳房炎乳樣中分離的S.aureus均含有I型腸毒素基因,因此對(duì)I型腸毒素(SE... 

【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

內(nèi)蒙古地區(qū)乳源金黃色葡萄球菌腸毒素基因分布的調(diào)查及Ⅰ型腸毒素蛋白表達(dá)


圖1部分&?菌株PCR檢測(cè)結(jié)果電泳圖??Fig.?1?electrophoresis?map?of?PCR?of?S.?aureus??-

統(tǒng)計(jì)圖,金黃色葡萄球菌腸毒素,基因分型,統(tǒng)計(jì)圖


5:?seg(327bp)?;?6:?sei(465?bp);?7:?selj(142bp);?8:?selk(516bp);??9:?sell(369bp);?10:?selm(148bp);?II:?seln(237bp);?12:?selq(330?bp)??腸毒素基因檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)圖3,從圖3中可以看出,121株S?awrews菌株全部??攜帶腸毒素基因,其中攜帶比例較高的是m/、M/m和m//基因,分別有121株??(100%)、81?株(66.94%)和?64?株(52.89%),未檢測(cè)到?see、從6、從/〇?和.se/p??基因。攜帶傳統(tǒng)腸毒素基因(■yea-see)共有59株(48.76%),攜帶新型腸毒素??基因共有121株(100%)。同時(shí)攜帶2種及2種以上腸毒素毒基因??的有118株(97.52%),其中同時(shí)攜帶2種、3種、4種、5種、6種、7種和8??種的分別有?20?株(16.53%)

試驗(yàn)流程,重組表達(dá)質(zhì)粒,載體質(zhì)粒,試驗(yàn)方法


3.?2試驗(yàn)方法??3.2.1試驗(yàn)流程圖??試驗(yàn)流程按圖5所示進(jìn)行操作。??H的基因的提取、純化???V?????如?及pET32a?(+)的雙酶切???j???j???目的基因5^的M收、純化?pET32a(+)載體質(zhì)粒的M收、純化???Y???連接????Y???感受態(tài)細(xì)胞£?co"7Vcm/-77?—+?

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重組金黃葡萄球菌腸毒素B及熱休克蛋白65融合蛋白的原核表達(dá)及其在小鼠體內(nèi)的體液免疫效果[J]. 侯天全,張國(guó)利,滕利榮,岳玉環(huán),吳廣謀,田園,付玉禾,趙鑫,張培培.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2017(02)
[2]金黃色葡萄球菌新型腸毒素Ⅰ型蛋白的表達(dá)研究[J]. 孫佳怡,王君瑋,王娟,趙建梅,劉鮮鮮,張倩,鄒明.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(19)
[3]食源性金黃色葡萄球菌腸毒素及其檢測(cè)方法[J]. 李瓊瓊,范一靈,宋明輝,施春雷,楊美成.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2016(02)
[4]金黃色葡萄球菌腸毒素及移動(dòng)基因元件研究進(jìn)展[J]. 王瓊,唐俊妮.  食品科學(xué). 2016(03)
[5]乳源金黃色葡萄球菌9種腸毒素基因的檢測(cè)[J]. 謝秀蘭,劉溪源,王建東,范春梅,康曉冬,薛偉.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2014(07)
[6]牛奶中金黃色葡萄球菌的耐藥性及其腸毒素分型研究[J]. 王娟,黃秀梅,劉書(shū)科,李玉清,趙思俊,曲志娜,王玉東,王君瑋.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2013(03)
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[8]乳房炎奶牛金黃色葡萄球菌毒素基因的檢測(cè)及PFGE分型研究[J]. 王新,韋藝媛,張靜,周婷,梁珍娟,楊保偉,席美麗,夏效東,孟江洪,俞英.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(07)
[9]奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌FnbpB-D基因的表達(dá)及其抗血清活性[J]. 史冬艷,郝永清,張愛(ài)榮.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(05)
[10]重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J]. 鄒廣眾.  生命科學(xué)儀器. 2009(09)

博士論文
[1]基于乳腺上皮FcRn胞吞轉(zhuǎn)運(yùn)途徑的金黃色葡萄球菌多價(jià)毒力因子疫苗設(shè)計(jì)及其誘導(dǎo)免疫應(yīng)答效果的研究[D]. 潘海婷.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]奶牛乳房炎四種主要致病菌多重PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[D]. 許金朋.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]牛源金黃色葡萄球菌腸毒素的提取及其部分免疫活性的研究[D]. 柳旭偉.石河子大學(xué) 2006



本文編號(hào):3023583

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