蛹蟲草作為重要食藥用真菌,其很多功效都接近于冬蟲夏草,具有提高人體免疫力、抗腫瘤和抗氧化等功能,是冬蟲夏草的最佳替代品。目前,蛹蟲草在我國已經(jīng)實(shí)現(xiàn)人工大規(guī)模種植,但克服蛹蟲草菌株易退化的特性一直是其工業(yè)化生產(chǎn)中無法突破的技術(shù)瓶頸。隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,基因工程、CRISPR基因編輯等新技術(shù)的興起,將為蛹蟲草功能基因挖掘、菌株退化機(jī)制探索及菌種定向改良等研究提供新的途徑。本研究采用倒置顯微鏡、掃描電子顯微鏡觀察蛹蟲草退化菌株與正常菌株菌絲的形態(tài)特征,并且分別用高效液相色譜（HPLC）、BODIPY脂滴染色、熒光定量PCR測定蛹蟲草退化菌株與正常菌株中腺苷與蟲草素含量、脂質(zhì)含量、細(xì)胞自噬相關(guān)基因的表達(dá)水平。結(jié)果表明,蛹蟲草退化菌株的菌絲體分枝多、畸形,呈彎曲的不規(guī)則狀;退化菌株的菌絲中腺苷含量比正常菌株的低30.23%,兩者發(fā)酵液中的腺苷含量無差異,但在退化菌株的菌絲和發(fā)酵液中均未檢測到蟲草素;BODIPY染色后,退化菌株的熒光亮度明顯低于正常菌株;細(xì)胞自噬相關(guān)基因Atg13、Atg18、Atg22、Atg22-2表達(dá)量在退化菌株中呈上升表達(dá),退化菌株比正常菌株分別上升了432.19%... 

【文章來源】：長春工業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛹蟲草形態(tài)特征

第2章蛹蟲草退化菌株的生理生化特征11第2章蛹蟲草退化菌株的生理生化特征2.1材料與儀器2.1.1供試菌株本研究使用了蛹蟲草（C.militaris）正常菌株Norm3和退化菌株Dene3，其中Dene3是通過Norm3連續(xù)傳20代，每代生長21d后獲得的菌株（圖2.1C）。Dene3通過注射入蠶蛹進(jìn)行復(fù)壯，已不能生長出子座（圖2.2A），證明該菌株已退化且該退化不可逆。Dene3與Norm3均為上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所獲得且保存菌株。圖2.1菌絲傳代培養(yǎng)A：正常菌株Norm3；B：第10代菌株；C：退化菌株Dene3Fig.2.1HyphalsubcultureA:normalstrainNorm3;B:the10thpassageofNorm3;C:degradedstrainDene3圖2.2注射蠶蛹出菇對比A：退化菌株Dene3；B：正常菌株Norm3Fig.2.2FruitingafterinjectionintosilkwormcocoonsA:degradedstrainDene3;B:normalstrainNorm3

第2章蛹蟲草退化菌株的生理生化特征11第2章蛹蟲草退化菌株的生理生化特征2.1材料與儀器2.1.1供試菌株本研究使用了蛹蟲草（C.militaris）正常菌株Norm3和退化菌株Dene3，其中Dene3是通過Norm3連續(xù)傳20代，每代生長21d后獲得的菌株（圖2.1C）。Dene3通過注射入蠶蛹進(jìn)行復(fù)壯，已不能生長出子座（圖2.2A），證明該菌株已退化且該退化不可逆。Dene3與Norm3均為上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所獲得且保存菌株。圖2.1菌絲傳代培養(yǎng)A：正常菌株Norm3；B：第10代菌株；C：退化菌株Dene3Fig.2.1HyphalsubcultureA:normalstrainNorm3;B:the10thpassageofNorm3;C:degradedstrainDene3圖2.2注射蠶蛹出菇對比A：退化菌株Dene3；B：正常菌株Norm3Fig.2.2FruitingafterinjectionintosilkwormcocoonsA:degradedstrainDene3;B:normalstrainNorm3


本文編號：3000640