虎斑烏賊（Sepia pharaonis）是我國重要的海洋經(jīng)濟頭足類。由于過度捕撈、棲息地破壞和生境退化,虎斑烏賊的漁業(yè)資源自1980年代以來逐年降低,逐漸淪為瀕危物種。虎斑烏賊資源的恢復和利用取決于該物種生殖特性的相關(guān)研究,然而當前我們對虎斑烏賊的生殖發(fā)育分子機制仍知之甚少。神經(jīng)肽廣泛分布在無脊椎動物和脊椎動物中,通常充當神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)調(diào)節(jié)劑和神經(jīng)激素。神經(jīng)肽FMRFamide（FLP）是已知的最大的神經(jīng)肽家族,以四肽FMRFamide（Phe-Met-Arg-Phe-NH2;FMRFa）為代表。前期研究證明,FMRFamide與GnRH（Gonadotropin-releasing hormone）共同參與了頭足類生殖發(fā)育的調(diào)控,而此過程中FMRFamide的兩種受體扮演著重要的角色。本文在此基礎(chǔ)上,首次開展了虎斑烏賊FMRFamide兩種受體基因的克隆和序列特征分析;開展了兩種受體的組織表達特異性研究,并對兩種FMRFamide的受體和FMRFamide前體的mRNA進行了定位;最后,我們通過體外細胞實驗檢測了FMRFamide對細胞蛋白分泌活動的影響。研究結(jié)果如下:1.原位雜交... 

【文章來源】：浙江海洋大學浙江省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

虎斑烏賊的生殖器官A：雌性虎斑烏賊生殖器官；B：雄性虎斑烏賊生殖器官Fig.1-1ReproductiveorgansofS.pharaonis.

FaNaC結(jié)構(gòu)的簡化表示Fig.1-2SimplifiedrepresentationofFaNaCstructure

第二章神經(jīng)肽FMRFamide在虎斑烏賊腦等組織的定位與功能初探15圖2-1SpFMRF前體基因mRNA的腦組織原位雜交。A、D：正義探針對照組；B、E、F：反義探針實驗組；C：部分腦的HE染色。A、B：視葉組織的原位雜交結(jié)果；D、E、F：食道上神經(jīng)團的原位雜交結(jié)果。黑色箭頭表示陽性信號（藍色），標尺顯示在圖片右下方。Bl，基葉；svl，亞垂直葉；vl，垂直葉；olf，嗅葉；med，髓質(zhì)；out.gr.cel，深層視網(wǎng)膜的外顆粒細胞層；inn.gr.cel，深層視網(wǎng)膜的內(nèi)顆粒細胞層。Fig.2-1InsituhybridizationofSpFMRFprecursorgenemRNAinthebrain.A,D:senseprobeincontrolgroup;B,E,F:antisenseprobeinexperimentalgroup;C:HEstainingofpartofthebrain.A,Bshowtheresultsinopticlobe;D,E,F:theresultsinsuprasophagealmass;Theblackarrowindicatesapositivesignal(blue)andthescaleisshownbelowthepicture.bl:basallobe;vl:verticallobe;olf:olfactorylobe;med.,medulla;out.gr.cel.,outergranulecellslayerofthedeepretina,inn.gr.cel.,innergranulecellslayerofthedeepretina.2.2.2FMRFamide成熟肽在虎斑烏賊腦中的定位為了進一步確認神經(jīng)肽FMRFamide在虎斑烏賊視葉中的分布位置，我們利用FaRF抗體（兔抗）進行免疫組化實驗。我們利用蘇木精和伊紅染色分析虎斑烏賊視葉組織的解剖學構(gòu)造：虎斑烏賊的視葉由深層視網(wǎng)膜和髓質(zhì)區(qū)組成，它們之間分布著傳入?yún)矤钌窠?jīng)纖維束（圖2-2A）；深層視網(wǎng)膜由內(nèi)顆粒細胞層和外細胞顆粒層構(gòu)成，

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2962228