發(fā)布時間：2020-12-27 20:17

　　棉花黃萎菌（Verticillium dahliae）是一種危害性極強且廣寄主的土傳病原真菌,其作為棉花全球性的病害,嚴(yán)重危害新疆種植區(qū)的棉區(qū)。目前,還沒有效果明顯的防治措施,化學(xué)防治造成土壤微環(huán)境的污染;倒茬輪作、深耕等防控策略在新疆棉區(qū)田間施用有很多限制因素,目前利用生物方法防控棉花土傳黃萎病成為主要防治手段。芽孢桿菌形成的菌膜可以增強植物根部定植能力。本研究通過對芽孢桿菌培養(yǎng)條件優(yōu)化后提高產(chǎn)膜能力,增強其對黃萎菌的抑制效果;通過在兩種不同基因型的棉花根部施用優(yōu)化后的芽孢桿菌液,檢測其對兩種基因型棉花防御和抵抗黃萎病的能力,為后續(xù)的棉花黃萎病的防控提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH、接種量、裝液量和培養(yǎng)基的溫度,對培養(yǎng)基成分進行優(yōu)化;通過對優(yōu)化結(jié)果的分析,最終確定芽孢桿菌C-9培養(yǎng)條件溫度為30℃、pH為5,接種量為0.25mL、裝液量為20mL時,生防菌菌密度最大,產(chǎn)生菌膜厚度較厚。2.通過qPCR技術(shù)驗證芽孢桿菌誘導(dǎo)黃萎菌致病相關(guān)基因的表達量。基因VMK1與大麗輪枝菌菌核產(chǎn)生有關(guān);NADPH基因和GLU基因的表達,可引起活性氧累積;甘油-3-磷酸脫氫酶能誘... 

【文章來源】： 成鳳鳳 石河子大學(xué)

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同碳源培養(yǎng)下對生防菌菌膜產(chǎn)生的影響

芽孢桿菌對新疆棉花黃萎病拮抗作用的研究9在上述優(yōu)化培養(yǎng)條條件下，溫度梯度設(shè)置為25,30,35,40℃，接種量0.25mL，初始pH5.0，150ml三角瓶裝液量20ml，培養(yǎng)72h，測定不同pH對芽孢桿菌菌膜的影響。本研究涉及芽孢桿菌C-9在不同的營養(yǎng)情況下的生長情況，故在本研究中采取在不同營養(yǎng)物質(zhì)與不同培養(yǎng)條件下培養(yǎng)芽孢桿菌。2.3結(jié)果與分析2.3.1芽孢桿菌培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)優(yōu)化2.3.1.1通過對培養(yǎng)芽孢桿菌培養(yǎng)基所用碳源優(yōu)化發(fā)現(xiàn)，本研究中供試生防菌C-9在不同碳源下培養(yǎng)，通過測得OD600發(fā)現(xiàn)以酵母提取物為碳源時的值最高，說明在本實驗中，碳源為酵母提取物時的菌密度最大，最易形成菌膜，而碳源分別為葡萄糖、蔗糖、玉米粉時的測得的OD600均低于酵母提取物為碳源時的OD600（圖2-1）。圖2-1不同碳源培養(yǎng)下對生防菌菌膜產(chǎn)生的影響Fig.2-1Effectsofdifferentcarbonsourceculturesonbiofilm2.3.1.2通過對培養(yǎng)芽孢桿菌培養(yǎng)基所用有機氮源優(yōu)化發(fā)現(xiàn)，本研究中供試生防菌C-9在不同有機氮源下培養(yǎng)，通過測得OD600發(fā)現(xiàn)以花生粉為有機氮源源時的值最高，說明在本實驗中，有機氮源為花生粉時的菌密度最大，最易形成菌膜，而有機氮源分別為牛肉膏、大豆蛋白胨、酵母提取物、(CK)蛋白胨時的測得的OD600均低于花生為有機氮源時的OD600（圖2-2）。圖2-2不同有機氮源培養(yǎng)下對生防菌菌膜產(chǎn)生的影響Fig.2-2Effectsofdifferentorganicnitrogensourceculturesonbiofilm

芽孢桿菌對新疆棉花黃萎病拮抗作用的研究102.3.1.3通過對芽孢桿菌培養(yǎng)基所用無機氮源優(yōu)化發(fā)現(xiàn)，本研究中供試生防菌C-9在不同無機氮源下培養(yǎng)，通過測得OD600發(fā)現(xiàn)CK為無機氮源源時的值最高，說明在本實驗中，不添加無機氮源時的菌密度最大，而有機氮源分別為氯化銨、硫酸銨、硝酸銨、硝酸鈉時的測得的OD600均低于CK為無機氮源時的OD600（圖2-3）。圖2-3不同無機氮源培養(yǎng)下對生防菌菌膜產(chǎn)生的影響Fig.2-3Effectsofdifferentinorganicnitrogensourceculturesonbiofilm2.3.1.4通過對芽孢桿菌培養(yǎng)基所用無機鹽優(yōu)化發(fā)現(xiàn)，本研究中供試生防菌C-9在不同無機鹽下培養(yǎng)，通過測得OD600發(fā)現(xiàn)以磷酸二氫鉀為無機鹽時的值最高，說明在本實驗中，以磷酸二氫鉀為無機鹽時的菌密度最大，最易形成菌膜，而無機鹽分別為硫酸錳、硫酸鎂、碳酸鈣、氯化鈉（CK）時的測得的OD600均低于磷酸二氫鉀為無機氮源時的OD600（圖2-4）。圖2-4梯度不同無機鹽培養(yǎng)下對生防菌菌膜產(chǎn)生的影響Fig.2-4Effectsofinorganicsaltculturewithdifferentgradientsonbiofilm2.3.1.5通過對芽孢桿菌培養(yǎng)基所用金屬離子優(yōu)化發(fā)現(xiàn)，本研究中供試生防菌C-9在培養(yǎng)基中添加不同金屬離子下培養(yǎng)，通過測得OD600發(fā)現(xiàn)以氯化鐵為金屬離子時的值最高，說明在本實驗中，以氯化鐵中鐵離子為金屬離子時的菌密度最大，最易形成菌膜，而金屬離子分別為氯化錳、氯化鈣、硫酸亞鐵時的測得的OD600均低于磷酸二氫鉀為無機氮源時的OD600（圖2-5）。

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：2942416