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AMPK信號(hào)通路負(fù)向調(diào)節(jié)熱應(yīng)激誘導(dǎo)仔豬睪丸支持細(xì)胞乳酸分泌

發(fā)布時(shí)間:2020-12-08 05:23
  AMP依賴性蛋白激酶(AMP activated protein kinases,AMPK)是一種負(fù)責(zé)代謝和能量需求的蛋白激酶,激活A(yù)MPK可以增強(qiáng)分解代謝(脂肪酸氧化和糖酵解等),而且這一激酶也是細(xì)胞響應(yīng)代謝壓力時(shí)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)能量穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵分子。睪丸支持細(xì)胞(Sertoli cels,SCs)的代謝具有“瓦爾堡效應(yīng)”,即使在氧氣充足的情況下也能通過高速的糖酵解將葡萄糖轉(zhuǎn)化為乳酸,并產(chǎn)生ATP。睪丸支持細(xì)胞分泌的乳酸不僅是生精細(xì)胞發(fā)育的首選能量底物,而且在精子形成過程中還具有抗凋亡的作用。豬睪丸支持細(xì)胞內(nèi)乳酸的分泌受到GLUT3(glucose transporters 3,葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體3)、LDHA(lactate dehydrogenases A,乳酸脫氫酶A)和MCT1(monocarboxylate transporter 1,單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1)的調(diào)控。本試驗(yàn)室的前期研究發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激(43°C,30 min)能夠促進(jìn)支持細(xì)胞中乳酸的分泌;越來越多的證據(jù)顯示,熱應(yīng)激改變了多種組織和細(xì)胞中AMPK的活性,但是熱應(yīng)激是否可以通過調(diào)節(jié)AMPK活性影響睪丸支持細(xì)胞中乳酸生成目前還不清楚。因... 

【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

AMPK信號(hào)通路負(fù)向調(diào)節(jié)熱應(yīng)激誘導(dǎo)仔豬睪丸支持細(xì)胞乳酸分泌


體外培養(yǎng)的支持細(xì)胞和支持細(xì)胞純度鑒定A.體外培養(yǎng)的支持細(xì)胞(400×);B.支持細(xì)胞純度鑒定(100×)

擴(kuò)增曲線,完整性檢測


圖 2 RNA 完整性檢測Figure.2 The integrity of total RNA光定量 PCR 擴(kuò)增曲線和融解曲線分析光定量 PCR 擴(kuò)增曲線圖 3 可以看出,在 β-actin、AMPK、SLC2A3、LDHA 和 SLC16A1 的擴(kuò)增中穩(wěn),說明,樣品擴(kuò)增所受干擾信號(hào)小。β-actin的起跳的循環(huán)數(shù)為 15-25,不下的 Ct 差異小于 0.5,符合作為內(nèi)標(biāo)的條件。

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西南大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 2 RNA 完整性檢測Figure.2 The integrity of total RNA3.熒光定量 PCR 擴(kuò)增曲線和融解曲線分析3.1 熒光定量 PCR 擴(kuò)增曲線從圖 3 可以看出,在 β-actin、AMPK、SLC2A3、LDHA 和 SLC16A1 的擴(kuò)增中,基線平穩(wěn),說明,樣品擴(kuò)增所受干擾信號(hào)小。β-actin的起跳的循環(huán)數(shù)為 15-25,不同時(shí)間點(diǎn)下的 Ct 差異小于 0.5,符合作為內(nèi)標(biāo)的條件。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]熱應(yīng)激對(duì)奶牛血液中胰島素、脂肪因子、AMP激活蛋白激酶和熱休克信號(hào)分子的影響(英文)[J]. Li MIN,Jian-bo CHENG,Bao-lu SHI,Hong-jian YANG,Nan ZHENG,Jia-qi WANG.  Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2015(06)
[2]高溫對(duì)豬群健康的影響及防控[J]. 韓國全,王利娜,余冰,顏其貴,郭萬柱,陳代文.  豬業(yè)科學(xué). 2012(05)
[3]熱應(yīng)激對(duì)體外仔豬肝細(xì)胞AMPK活性及脂質(zhì)代謝產(chǎn)物的影響[J]. 鄭萍,陳代文,張克英,余冰.  營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2007(01)
[4]動(dòng)物熱應(yīng)激機(jī)理及其研究進(jìn)展[J]. 鄒勝龍,馮定遠(yuǎn).  廣東飼料. 2000(04)

碩士論文
[1]HSP70對(duì)熱應(yīng)激條件下仔豬睪丸支持細(xì)胞乳酸合成的影響[D]. 廖婷婷.西南大學(xué) 2016
[2]自噬在溫和型熱應(yīng)激誘導(dǎo)仔豬睪丸支持細(xì)胞乳酸生成中的作用[D]. 鮑自強(qiáng).西南大學(xué) 2016



本文編號(hào):2904533

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