布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱布病)是由布魯氏菌引起的一種變態(tài)反應(yīng)性人畜共患傳染病。近年來(lái),隨著牛羊業(yè)的快速發(fā)展,活畜及其產(chǎn)品的頻繁調(diào)運(yùn),人畜間布病發(fā)病率上升,防控形勢(shì)嚴(yán)峻。開(kāi)展牛羊布病流行病學(xué)調(diào)查,掌握流行現(xiàn)狀及流行率,為布病進(jìn)一步防控和凈化奠定基礎(chǔ)。過(guò)去布病檢測(cè)方法單一,國(guó)標(biāo)規(guī)定是用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)進(jìn)行篩選,試管凝集試驗(yàn)(SAT)進(jìn)行確診,近年來(lái)出現(xiàn)了一些快速檢測(cè)方法如競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(cELISA)、膠體金免疫層析試驗(yàn)(GICA,簡(jiǎn)稱膠體金)等,因此,開(kāi)展快速檢測(cè)方法的符合情況研究勢(shì)在必行。本研究通過(guò)對(duì)不同檢測(cè)方法進(jìn)行比對(duì),篩選更簡(jiǎn)單快捷的檢測(cè)方法�！秶�(guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃(2016—2020年)》要求,全國(guó)布病防控實(shí)行區(qū)域化管理,共劃分為三類區(qū)域,我省屬于一類地區(qū)�！渡綎|省布魯氏菌病防控推進(jìn)工作方案》(魯牧動(dòng)衛(wèi)發(fā)[2018]22號(hào))要求,青島、威海、煙臺(tái)為布病非免疫區(qū),采取檢測(cè)凈化的措施,其余13市為免疫區(qū),采取檢測(cè)免疫措施。2018年我省首次大面積使用豬種布魯氏菌S2疫苗(S2疫苗)對(duì)牛羊灌服免疫,免疫效果如何在我省還缺乏相關(guān)數(shù)據(jù),為此本研究對(duì)疫苗免疫后的免疫效果進(jìn)行了檢測(cè)。本研究調(diào)查了2019年山東省牛羊布病的流行情況,旨在為山東省制定符合現(xiàn)階段的布病綜合防控措施提供科學(xué)合理的依據(jù)。2019年共采集山東省16個(gè)地市的474個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng),牛羊非免疫血清共22212份,其中219個(gè)養(yǎng)牛場(chǎng),非免疫血清11675份;255個(gè)養(yǎng)羊場(chǎng),非免疫血清10537份。經(jīng)檢測(cè),牛布病陽(yáng)性樣品56份,涉及15個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng),個(gè)體陽(yáng)性率0.48%,群體陽(yáng)性率6.85%;羊布病陽(yáng)性樣品9份,涉及3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng),個(gè)體陽(yáng)性率0.09%,群體陽(yáng)性率1.18%。經(jīng)分析,牛羊布病陽(yáng)性樣品來(lái)源7個(gè)市,共18個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)。從空間上看,主要分布在魯西、魯中地區(qū);從季節(jié)上看,牛羊布病在春季為發(fā)病高峰;從群體看,牛布病多發(fā)于存欄量100-500頭的小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng),羊布病在存欄量大于100的規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)中均有存在。布病常用的血清學(xué)檢測(cè)方法無(wú)論是敏感性和特異性,還是操作簡(jiǎn)便、易行和快速等方面都存在一定差異。本研究通過(guò)對(duì)四種血清學(xué)方法RBT、SAT、cELISA和膠體金進(jìn)行比較,分析四種檢測(cè)方法的敏感性、特異性以及符合率,篩選更適用的血清學(xué)檢測(cè)方法。采用四種檢測(cè)方法分別對(duì)648份牛羊血清(其中牛血清328份,羊血清320份)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明SAT、RBT、cELISA和膠體金四種布病血清學(xué)檢測(cè)方法符合率較高(85%~90%)。膠體金特異性略低,但操作方便快捷,可用在調(diào)運(yùn)過(guò)程中的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè);cELISA敏感性最高,實(shí)驗(yàn)室操作簡(jiǎn)易,可用在布病的防控、凈化中實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。為評(píng)價(jià)牛羊免疫S2疫苗后免疫效果,本研究采用膠體金、RBT、cELISA三種方法,對(duì)奶牛、綿羊免疫S2疫苗后的轉(zhuǎn)陽(yáng)率進(jìn)行檢測(cè),分別在免疫后第7天、15天、30天、60天、90天、150天、180天,進(jìn)行跟蹤監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明奶牛、綿羊免疫S2疫苗后均能在第7天檢測(cè)到布病抗體;奶牛免疫后第15天抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率最高,綿羊免疫后第30天抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率最高;此后逐漸下降,在免疫150天后抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率均低于10%;在免疫180天后綿羊全部轉(zhuǎn)陰,奶牛僅2%尚未轉(zhuǎn)陰。同時(shí)檢測(cè)免疫后血清中IFN-γ和IL-10含量變化,S2疫苗試驗(yàn)組血清中IL-10、IFN-γ的含量比對(duì)照組略有所增加,并且隨免疫時(shí)間延長(zhǎng)而變化;奶牛、綿羊試驗(yàn)組在免疫后第15至30天血清中IFN-γ的含量顯著高于對(duì)照組(P0.05),S2疫苗能刺激奶牛、綿羊產(chǎn)生抗布魯氏菌的IFN-γ。綜上所述本研究掌握了2019年山東省牛羊布病個(gè)體陽(yáng)性率、群體陽(yáng)性率,以及在空間、時(shí)間和群體上的分布;明確了SAT、RBT、cELISA和膠體金四種布病檢測(cè)方法敏感性、特異性以及符合率;摸清奶牛、綿羊灌服S2疫苗后不同時(shí)間點(diǎn)抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率,以及S2疫苗免疫一年后可以進(jìn)行檢測(cè)淘汰。
【學(xué)位單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：S855.12
【部分圖文】：

2019年山東省牛羊布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查及S2疫苗免疫效果評(píng)價(jià)18表5奶牛血清樣品來(lái)源Table5Sourceofbovineserumsamples血清來(lái)源Serumsource總數(shù)total陽(yáng)性數(shù)Positivenumber陽(yáng)性率Positiverate（%）濟(jì)南78040.51棗莊93590.96青島87000.00臨沂67071.04淄博57500.00聊城630111.75煙臺(tái)61000.00菏澤67000.00濟(jì)寧53500.00日照78000.00濱州64000.00濰坊72000.00東營(yíng)75500.00威海90000.00德州87560.69泰安730192.60總計(jì)11675560.48圖1奶牛布病陽(yáng)性場(chǎng)空間分布圖Fig1Spatialdistributionmapofbovinebrucellosispositivefield3.1.2季節(jié)分布對(duì)春季、秋季采樣數(shù)量以及奶牛陽(yáng)性樣品統(tǒng)計(jì)（表6）。2019年奶牛布病在春季為發(fā)病高峰。奶牛布病季節(jié)分布圖見(jiàn)圖2。

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文19表6不同季節(jié)奶牛陽(yáng)性樣品統(tǒng)計(jì)Table6Statisticsofcattlepositivesamplesindifferentseasons季節(jié)seasons奶牛陽(yáng)性樣品數(shù)Numberofbovinepositivesamples奶牛采血清總數(shù)Totalbovineserum奶牛陽(yáng)性樣品占比Proportionofbovinepositivesamples（%）春季3054020.56秋季2662730.41總計(jì)56116750.48圖2奶牛布病季節(jié)分布圖Fig2Bovinediseaseseasonsdistributionmap3.1.3群體分布檢測(cè)發(fā)現(xiàn)219個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）中有15個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)（戶）。存欄量在100-500之間的陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)有8個(gè)；500-1000的陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)有3個(gè)。奶牛布病陽(yáng)性場(chǎng)主要集中在存欄量在100-500之間的小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，大于1000的大規(guī)模場(chǎng)數(shù)量較少。陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）存欄量統(tǒng)計(jì)表見(jiàn)表7。表7奶牛陽(yáng)性場(chǎng)存欄量統(tǒng)計(jì)Table7Statisticsontheinventoryofcattle-positivefarms存欄量/頭Inventory/Each采樣場(chǎng)數(shù)Numberofsamplingfields陽(yáng)性場(chǎng)數(shù)Numberofpositivefield陽(yáng)性場(chǎng)占比（%）Proportionofpositivefields＜10016212.50100-50054814.81500-10007633.95＞10007322.74總計(jì)219156.853.22019年山東省羊布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果羊主要采集商品代養(yǎng)殖場(chǎng)，商品代養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品量占總樣品數(shù)的68%以上。開(kāi)展布

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文21圖3羊布病陽(yáng)性場(chǎng)空間分布圖Fig3Spatialdistributionofsheep-positivefield3.2.2季節(jié)分布對(duì)春季、秋季羊采樣數(shù)量以及陽(yáng)性樣品統(tǒng)計(jì)（表10），2019年羊布病在春季為發(fā)病高峰，羊布病季節(jié)分布圖（圖4）。表10：不同季節(jié)羊陽(yáng)性樣品統(tǒng)計(jì)Table10:Statisticsofsheeppositivesamplesindifferentseasons季節(jié)seasons羊陽(yáng)性樣品數(shù)Numberofbovinesheepsamples羊采血清總數(shù)Totalsheepserum羊陽(yáng)性樣品占比Proportionofsheeppositivesamples（%）春季742440.16秋季262930.03總計(jì)9105370.09圖4羊布病季節(jié)分布Fig4Sheepdiseaseseasonsdistribution3.2.3群體分布檢測(cè)255個(gè)羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）中發(fā)現(xiàn)有3個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)（戶）。存欄量在100-500之間的陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)有1個(gè)、存欄量在500-1000之間的陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)有1個(gè)、存欄量在>1000的規(guī)
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2891435