山東作為中國(guó)生豬養(yǎng)殖主要省份,豬圓環(huán)病毒病是危害其養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病之一。盡管豬場(chǎng)一般都進(jìn)行該病免疫,但許多豬場(chǎng)免疫效果不理想,未能顯著降低該病的感染發(fā)病率。本研究基于對(duì)2018年-2019年本實(shí)驗(yàn)室接收與采集的來(lái)自山東各地規(guī)�；i場(chǎng)以及試驗(yàn)場(chǎng)的臨床樣品的檢測(cè)結(jié)果,對(duì)山東省規(guī)模化豬場(chǎng)豬圓環(huán)病毒病疫情進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查分析,評(píng)估該病免疫效果并對(duì)免疫程序進(jìn)行調(diào)整優(yōu)化。病原學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,2018年檢測(cè)樣品中PCV2陽(yáng)性率為27.11%(125/461),其中一、二、三、四季度的陽(yáng)性率分別為25.93%、25.71%、12.00%和40.54%;2019年陽(yáng)性率為22.03%(87/395),其中一、二、三、四季度的陽(yáng)性率分別為26.67%、19.13%、15.32%和30.63%。對(duì)37株山東PCV2分離株的ORF2基因進(jìn)行克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),山東地區(qū)流行毒株以2.1d亞型為主,其次是2.1b和2.1a。分離株間的核苷酸和氨基酸同源性分別為89.6%-100%和87.2%-100%,與國(guó)內(nèi)外其他各型參考毒株核苷酸和氨基酸同源性分別為81.1%-100%和81.2%-100%。血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,2018年P(guān)CV2總體抗體陽(yáng)性率為89.03%,平均S/P值1.47,變異系數(shù)37.86%;2019年總體抗體陽(yáng)性率為94.21%,平均S/P值1.66,變異系數(shù)38.45%。許多豬場(chǎng)各胎次經(jīng)產(chǎn)母豬、公豬以及后備豬等種豬群S/P值過高,基于種豬群較少免疫,推測(cè)存在較高比例的野毒感染,PCV2的垂直傳播壓力較大。商品豬抗體陽(yáng)性率和平均S/P值自2周齡開始呈下降趨勢(shì),10周齡或13周齡開始逐漸升高,變異系數(shù)也相對(duì)應(yīng)的自2周齡開始呈上升趨勢(shì),10周齡或13周齡開始逐漸降低。對(duì)不同免疫時(shí)間段的PCV2抗體水平檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn),大多數(shù)豬場(chǎng)14日齡仔豬母源抗體水平較高,有較好的保護(hù)力且能干擾仔豬的早期疫苗免疫。14日齡進(jìn)行免疫后,抗體水平在1個(gè)月內(nèi)只有小幅度升高,免疫后2個(gè)月就逐漸下降到較低水平,失去了疫苗保護(hù)力度,進(jìn)而導(dǎo)致免疫后2~3月內(nèi)發(fā)生了野毒感染。在探究感染豬群各階段PCV2帶毒排毒情況的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),3周齡至5周齡開始排毒量上升,推測(cè)豬群因垂直傳播存在早期感染,7周齡開始排毒量逐漸下降,在12周齡后又重新升高,至20周齡排毒量達(dá)到最高水平,提示此期正在發(fā)生野毒感染。病原和抗體檢測(cè)結(jié)果表明,多數(shù)規(guī)模化豬場(chǎng)PCV2疫苗免疫效果不盡合理,科學(xué)合理的免疫程序制定迫在眉睫。免疫程序優(yōu)化結(jié)果顯示,本研究將某試驗(yàn)場(chǎng)免疫程序由原來(lái)的僅14日齡一次免疫調(diào)整為仔豬14天首免,35日齡二免,后備母豬5月齡免疫一次,配種前再加強(qiáng)免疫一次,種公豬和經(jīng)產(chǎn)母豬不免疫。各階段豬群PCV2抗體總體陽(yáng)性率由未調(diào)整前的65.49%上升為94.20%,首免以及二次加強(qiáng)免疫后,陽(yáng)性率均上升為100%,并且各階段豬群未存在帶毒排毒情況,取得了良好的保護(hù)效果,減少了感染壓力。但存在高胎齡母豬抗體水平低,2周齡仔豬母源抗體水平不高的缺陷。因此本研究得出如下結(jié)論:(1)山東地區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)PCV2感染率較高,一般均有PCVAD臨床病例的發(fā)生,該病四季流行,在冬春季節(jié)感染及發(fā)病率較高,流行毒株以毒力較強(qiáng)的2.1d亞型為主,其次是2.1b和2.1a亞型。(2)山東地區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)PCV2免疫效果2019年好于2018年,但大多數(shù)豬場(chǎng)PCV2免疫程序有待調(diào)整優(yōu)化,仍存在仔豬11周齡左右的免疫風(fēng)險(xiǎn)期,此階段的仔豬易被野毒感染,致使20周齡的豬群有較高的排毒量。(3)基于流行病學(xué)調(diào)查與免疫檢測(cè)評(píng)估,將試驗(yàn)場(chǎng)免疫程序調(diào)整為:仔豬14日齡首免,35日齡二免;后備母豬5月齡免疫一次,配種前再加強(qiáng)免疫一次;經(jīng)產(chǎn)母豬產(chǎn)前3~5周跟胎免疫,種公豬每年2次免疫,取得了良好的免疫效果。
【學(xué)位單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：S858.28
【部分圖文】：

山東省規(guī)模豬場(chǎng)圓環(huán)病毒流行病學(xué)調(diào)查及免疫程序調(diào)整優(yōu)化18圖1臨床病例剖檢病變Fig.1pathologicalchangesinclinicalcasesA：皮膚紅斑；B：扁桃體灰白色腫脹壞死；C：肺臟實(shí)變；D：淋巴結(jié)腫脹壞死；E：淋巴結(jié)腫脹壞死；F：肝臟出血壞死；G：脾臟出月；H：腎臟壞死；I：回盲瓣潰瘍A:skinerythema;B:grayish-whitetonsilswellingandnecrosis;C:lungconsolidation;D:lymphnodeswellingandnecrosis;E:lymphnodeswellingandnecrosis;F:liverhemorrhageandnecrosis;G:spleenmenorrhagia;H:kidneynecrosis;I:ileocecalvalveulcer3.1.2組織病理學(xué)病變臨床病例剖檢時(shí)取扁桃體、脾臟、淋巴結(jié)、肺臟、腎臟等器官組織于10%福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟切片，HE染色。鏡檢，扁桃體淋巴濾泡內(nèi)淋巴細(xì)胞壞死缺失、水腫(圖2A)；肺臟呈典型間質(zhì)性肺炎病變，支氣管周圍淋巴細(xì)胞灶狀浸潤(rùn)增生，肺泡壁增厚，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)（圖2B、2C)；脾臟見淋巴細(xì)胞壞死以及出血(圖2D)；腎臟呈急性間質(zhì)性腎炎病變，間質(zhì)有淋巴細(xì)胞灶狀浸潤(rùn)，腎小球出血（圖2E、2F）。

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文19圖2PCV2組織病理學(xué)觀察Fig.2histopathologicalobservationofPCV2A:扁桃體淋巴細(xì)胞壞死缺失、水腫,HE×200；B:間質(zhì)性肺炎,HE×400；C:間質(zhì)性肺炎,HE×400；D：脾臟見淋巴細(xì)胞壞死出血,HE×400；E:間質(zhì)性腎炎,HE×400;F:間質(zhì)性腎炎病變,HE×1000A：necrosisandedemaoftonsillymphocytes,HE×200；B：interstitialpneumonia,HE×400；C：interstitialpneumonia,HE×400；D：lymphocytenecrosisandbleedingwereseeninthespleen,HE×400；E：interstitialglomerulonephritis,HE×400；F：interstitialglomerulonephritis,HE×10003.2山東地區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)PCV2病原學(xué)調(diào)查結(jié)果與分析3.2.12018-2019年山東省PCV2病原檢測(cè)結(jié)果與分析對(duì)山東各地區(qū)不同規(guī)模豬場(chǎng)的送檢和采集的856份病料樣品進(jìn)行了PCV2病原檢測(cè)。具體檢測(cè)結(jié)果如下。表122018-2019年山東地區(qū)各月份PCV2病原檢測(cè)結(jié)果Table12DetectionresultsofPCV2pathogensinShandongProvincefrom2018to2019月份Month2018年陽(yáng)性率2018Positiverate2019年陽(yáng)性率2019Positiverate兩年平均Average1月28.17%（20/71）33.33%（5/15）29.07%（25/86）2月27.78%（5/18）31.25%（5/16）29.41%（10/34）3月21.74%（10/46）14.29%（2/14）20.00%（12/60）4月25.00%（12/48）45.71%（16/35）33.73%（28/83）5月33.33%（15/45）6.25%（2/32）22.08%（17/77）6月19.15%（9/47）8.33%（4/48）13.68%（13/95）7月4.55%（1/22）17.78%（8/45）13.43%（9/67）8月25.00%（5/20）25.81%（8/31）25.49%（13/51）9月9.09%（3/33）6.25%（3/48）7.41%（6/81）10月21.43%（6/28）31.43%（11/35）26.98%（17/63）

/79）總計(jì)27.11%（125/461）22.03%（87/395）24.77%（212/856）表132018-2019年山東地區(qū)各季度PCV2病原檢測(cè)結(jié)果Table13DetectionresultsofPCV2pathogensinShandongin2018-2019季度Quarterly2018年陽(yáng)性率2018Positiverate2019年陽(yáng)性率2019Positiverate兩年平均Average第一季度25.93%（35/135）26.67%（12/45）26.11%（47/180）第二季度25.71%（36/140）19.13%（22/115）22.75%（58/255）第三季度12.00%（9/75）15.32%（19/124）14.07%（28/199）第四季度40.54%（45/111）30.63%（34/111）35.59%（79/222）圖32018-2019年度山東PCV2病原陽(yáng)性率Fig.3PositiverateofPCV2pathogeninShandongProvincein2018and2019病原檢測(cè)結(jié)果顯示，該病在山東地區(qū)的流行特點(diǎn)為：①PCV2檢測(cè)樣品數(shù)量較大，2年共檢測(cè)856份病料（因?yàn)榉侵挢i瘟疫情發(fā)生，2019年的病料樣品數(shù)量明顯減少）。說明豬圓環(huán)病毒病仍是危害豬場(chǎng)的主要疫病之一，絕大多數(shù)豬場(chǎng)都非常重視該病的檢測(cè)；②PCV2檢出率較高，2年共檢出陽(yáng)性樣品212份，總陽(yáng)性率24.77%（212/856）。說明該病在山東地區(qū)規(guī)�；i場(chǎng)流行情況嚴(yán)重，尤其是表現(xiàn)有育肥豬生長(zhǎng)遲緩和消瘦并伴有母豬繁殖障礙的豬場(chǎng)，該類豬場(chǎng)商品豬出欄體重低、經(jīng)濟(jì)效益差；③PCV2在第一季度和第四季度的陽(yáng)性率要明顯高于第二季度和第三季度。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，第一季度兩年平均陽(yáng)性率26.11%，第四季度兩年平均陽(yáng)性率35.59%，其中2018年第四季度的陽(yáng)性率達(dá)到40.54%，為兩年各季度PCV2病原陽(yáng)性率最高。說明該病流行仍有明顯的季節(jié)性，即在寒冷冬春時(shí)節(jié)多發(fā)，夏季少發(fā)。所以寒冷季節(jié)加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)管理、疫苗免疫、生物安全措施是該病防控的關(guān)鍵；④根據(jù)不同月份的病原檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，
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