【摘要】：鹵蟲作為重要的基礎實驗材料和經濟動物資源,研究其孵化條件和開發(fā)微衛(wèi)星標記工具具有重要意義。本研究通過對柯柯鹽湖鹵蟲卵的孵育實驗,探索了柯柯鹽湖鹵蟲發(fā)育對溫度和鹽度的耐受條件；基于FIASCO方法,構建青藏高原鹵蟲的(AC)n和(AG)n微衛(wèi)星富集文庫,并篩選6對微衛(wèi)星引物,為鹵蟲資源評估和遺傳分化研究等提供遺傳標記工具。主要研究結果如下：1、25‰鹽度是柯柯鹽湖鹵蟲卵孵化和幼體發(fā)育的理想鹽濃度。在7個鹽度梯度中,隨著鹽度不斷升高,柯柯鹽湖鹵蟲卵的孵化率平均值呈現下降趨勢；但鹽度低于25‰時,鹵蟲卵雖可破膜,但無法發(fā)育為無節(jié)幼體,是無活力的破膜幼體,而當鹽度為80%‰時,鹵蟲將不會孵化。2、在25‰鹽度條件下,柯柯鹽湖鹵蟲卵的最適孵化溫度為26℃,以26℃為基點,隨著溫度上升或降低鹵蟲卵孵化率呈下降趨勢；當溫度上升到39℃或下降到13℃時,孵化率為0。3、挑取平板上的陽性克隆進行培養(yǎng),分別從(AC)n文庫和(AG)n文庫中隨機挑選120個和200個白色單菌落.以M13通用引物和對應探針序列(無生物素標記)進行PCR擴增,分別篩選到80個和120個可能含有微衛(wèi)星序列的陽性克隆,經測序得到陽性克隆率分別為66.7%、60.0%。4、依據得到的微衛(wèi)星序列,用Primer premier 5.0軟件設計并合成引物63對,對2個地理單元(青海、西藏)的18個鹵蟲基因組DNA擴增,篩選出6對具有多態(tài)性的鹵蟲微衛(wèi)星引物。
【學位授予單位】：青海師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S917.4

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