【摘要】：本研究開展了大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗的制備及佐劑的篩選；接種疫苗后進行了大鯢血清中溶菌酶活力、ACH5o活力、抗體水平,血液中主要組織相容性復合體(MHC)Ⅰ基因、MHCⅡA基因的表達和干擾素α誘導蛋白(IFI)6基因的表達變化及免疫保護率的測定。通過檢測疫苗接種大鯢后免疫相關指標和保護效果的研究,旨在為有效防控大鯢蛙病毒病提供理論依據(jù)。通過p-丙內(nèi)酯(BPL)滅活CGSRV,制備滅活疫苗、黃芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)佐劑疫苗和ISA763A佐劑疫苗3種疫苗。3種疫苗經(jīng)過無菌及安全檢查合格后,腹腔注射試驗大鯢,每尾0.3mL。分別測定疫苗接種后第10d、20d、30d和40d大鯢血清中溶菌酶活力、ACH50活力及抗體水平和測定血液中MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表達等免疫指標；免疫40d后進行攻毒試驗,每組攻毒15尾,連續(xù)觀察40d統(tǒng)計死亡率和測定相對免疫保護率；每組剩余的5尾不做處理,用于抗體水平的檢測。結果表明：滅活疫苗、佐劑疫苗均能不同程度提高機體免疫水平,大鯢的抗體水平,ACHso活力,MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表達都有不同程度提高,而三種疫苗對溶菌酶活力影響不同,僅APS佐劑疫苗能提高溶菌酶活力。ISA763A+Ag疫苗組、APS+Ag疫苗組和Ag疫苗組的相對免疫保護率(RPS)分別為85.71%、71.43%和64.29%,ISA763A佐劑和APS佐劑分別提高了21.41%和7.14%的免疫保護率,由于ISA763A佐劑的效果更好,故推薦使用ISA763A作為CGSRV疫苗的佐劑。以上試驗結果證明：大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗不僅能夠提高大鯢的特異性免疫水平,刺激機體產(chǎn)生特異性抗體,誘導MHCⅠ基因和MHCⅡA基因的表達；而且能提高大鯢非特異性免疫水平,提高機體ACH50活力以及誘導大鯢的抗病毒細胞因子IFI 6基因的表達。黃芪多糖和ISA763A兩種佐劑都能提高CGSRV滅活疫苗的免疫效應,其中ISA763A佐劑的增強作用更好。
【學位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S947.3

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