【摘要】：本研究開展了大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗的制備及佐劑的篩選；接種疫苗后進(jìn)行了大鯢血清中溶菌酶活力、ACH5o活力、抗體水平,血液中主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅰ基因、MHCⅡA基因的表達(dá)和干擾素α誘導(dǎo)蛋白(IFI)6基因的表達(dá)變化及免疫保護(hù)率的測定。通過檢測疫苗接種大鯢后免疫相關(guān)指標(biāo)和保護(hù)效果的研究,旨在為有效防控大鯢蛙病毒病提供理論依據(jù)。通過p-丙內(nèi)酯(BPL)滅活CGSRV,制備滅活疫苗、黃芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)佐劑疫苗和ISA763A佐劑疫苗3種疫苗。3種疫苗經(jīng)過無菌及安全檢查合格后,腹腔注射試驗(yàn)大鯢,每尾0.3mL。分別測定疫苗接種后第10d、20d、30d和40d大鯢血清中溶菌酶活力、ACH50活力及抗體水平和測定血液中MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表達(dá)等免疫指標(biāo)；免疫40d后進(jìn)行攻毒試驗(yàn),每組攻毒15尾,連續(xù)觀察40d統(tǒng)計(jì)死亡率和測定相對免疫保護(hù)率；每組剩余的5尾不做處理,用于抗體水平的檢測。結(jié)果表明：滅活疫苗、佐劑疫苗均能不同程度提高機(jī)體免疫水平,大鯢的抗體水平,ACHso活力,MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI 6基因的表達(dá)都有不同程度提高,而三種疫苗對溶菌酶活力影響不同,僅APS佐劑疫苗能提高溶菌酶活力。ISA763A+Ag疫苗組、APS+Ag疫苗組和Ag疫苗組的相對免疫保護(hù)率(RPS)分別為85.71%、71.43%和64.29%,ISA763A佐劑和APS佐劑分別提高了21.41%和7.14%的免疫保護(hù)率,由于ISA763A佐劑的效果更好,故推薦使用ISA763A作為CGSRV疫苗的佐劑。以上試驗(yàn)結(jié)果證明：大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗不僅能夠提高大鯢的特異性免疫水平,刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體,誘導(dǎo)MHCⅠ基因和MHCⅡA基因的表達(dá)；而且能提高大鯢非特異性免疫水平,提高機(jī)體ACH50活力以及誘導(dǎo)大鯢的抗病毒細(xì)胞因子IFI 6基因的表達(dá)。黃芪多糖和ISA763A兩種佐劑都能提高CGSRV滅活疫苗的免疫效應(yīng),其中ISA763A佐劑的增強(qiáng)作用更好。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S947.3

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本文編號：2796137