馬鞍藤產(chǎn)樹脂糖甙內(nèi)生真菌的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化
發(fā)布時間:2020-08-13 03:59
【摘要】:馬鞍藤是一種含有很多活性物質(zhì)的固沙植物和藥用植物,在環(huán)境綠化和醫(yī)藥方面有很好的利用價值。有很多研究通過化學(xué)方法從馬鞍藤中提取出了許多有用的物質(zhì),其中樹脂糖甙作為番薯屬植物的特征化學(xué)成份,具有新穎的化學(xué)結(jié)構(gòu)和多樣的生物活性,為新化合物的合成和新藥物的研制提供了很好的依據(jù)。本試驗從馬鞍藤中篩選出一株能產(chǎn)生樹脂糖甙的內(nèi)生真菌MJ8,鑒定出目標菌株并進行發(fā)酵條件的優(yōu)化來提高樹脂糖甙的產(chǎn)量。試驗結(jié)果如下:1)采用組織分離法,從馬鞍藤的莖和葉中分離出內(nèi)生真菌120株,然后通過搖瓶發(fā)酵對分離出的內(nèi)生菌進行篩選,將發(fā)酵液通過柱層析和蒸餾后采用薄層色譜法與標準品對照。最終篩選出一株內(nèi)生真菌MJ8可以產(chǎn)生樹脂糖甙。2)首先通過形態(tài)學(xué)方法,觀察MJ8的菌落、菌絲和分生孢子形態(tài),初步歸類為擬盤多毛孢屬真菌,然后運用分子生物學(xué)方法分析18S rDNA序列和ITS序列并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果表明MJ8可能為一株新的擬盤多毛孢屬真菌。3)首先通過單因素試驗確定發(fā)酵的氮源、碳源和發(fā)酵時間,并確定PDB培養(yǎng)基內(nèi)部各種物質(zhì)的最佳條件,然后通過Plackett-Burman試驗篩選出對試驗結(jié)果有顯著影響的4個因子乳糖、硫酸銨、溫度和接種量,最后采用Box-Behnken試驗進行響應(yīng)面分析確定了發(fā)酵的最佳條件為乳糖濃度40.200g/L,硫酸銨濃度13.800g/L,溫度31.8℃,接種量5%,硫酸亞鐵濃度0.010g/L,氯化鉀濃度2.000g/L,硫酸鎂濃度0.500g/L,磷酸氫二鉀2.000g/L,發(fā)酵時間16d,轉(zhuǎn)速120rmp/min,此時得到產(chǎn)物的產(chǎn)量為0.405g/L,與優(yōu)化前的0.138g/L相比提高了大約2倍。
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S567.239;Q93
本文編號:2791494
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
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1 萬占軼;馬鞍藤產(chǎn)樹脂糖甙內(nèi)生真菌的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年
2 李波;馬鞍藤內(nèi)生真菌及其次級代謝產(chǎn)物的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年
3 謝福林;馬鞍藤脂溶性成分分離與結(jié)構(gòu)鑒定[D];福建農(nóng)林大學(xué);2009年
本文編號:2791494
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