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栽培一粒小麥不同Glu-A1x等位基因的分子鑒定

發(fā)布時(shí)間:2020-07-09 23:52
【摘要】:高分子量谷蛋白亞基(HMW.GS)是重要的種子貯藏蛋白,與普通小麥(Triticum aestivum L.,2n=6x=42,AABBDD)烘烤品質(zhì)密切相關(guān)。普通小麥Glu-Alx位點(diǎn)變異很少。二倍體栽培一粒小麥(Triticum monococcum ssp. monococcum,2n=2x=14,AmAm)是人類歷史上第一個(gè)小麥栽培種。本研究利用SDS-PAGE系統(tǒng)地分析了197份栽培一粒小麥的Glu-Alx等位基因變異,取得如下結(jié)果:1、在197份栽培一粒小麥中,共檢測(cè)到10個(gè)Glu-Alx等位基因變異類型,其中7個(gè)是新的變異,即Glu-A1md、Glu-Alme、Glu-A1mf、GlM-A1mg、Glu-A1mh、Glu-AImi和Glu-A1mj。10個(gè)等位變異類型出現(xiàn)的頻率和分布地區(qū)高度可變,Glu-A1mg等位基因出現(xiàn)頻率最低(1份,0.5%),Glu-A1mc出現(xiàn)頻率最高(132份,67%)。其中,Glu-A1ma是沉默的,在2份材料中被檢測(cè)到,其他的等位基因都是可表達(dá)的。出現(xiàn)頻率最高的Glu-A1mc電泳遷移率與1Ax2*相似。2、利用設(shè)計(jì)的2對(duì)特異性引物對(duì)10個(gè)Glu-A1x變異類型代表性材料分別擴(kuò)增Glu-A1x基因的兩端(片段1和片段2),并進(jìn)行測(cè)序。其中片段1包括信號(hào)肽、N端和重復(fù)區(qū)的前174個(gè)核苷酸;其中片段2包括重復(fù)區(qū)的最后210個(gè)核苷酸和C端。測(cè)序結(jié)果表明,片段1是477bp,而片段2是336bp,兩個(gè)片段在所有序列中都是大小相同的。片段1和片段2的整合序列可在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢。3、利用片段1和片段2的整合序列進(jìn)行了Glu-A1x基因的DNA序列多態(tài)性分析,共檢測(cè)到了18個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)(s),其中片段1有10個(gè),片段2有8個(gè)。這些突變位點(diǎn)中,有5個(gè)是同義突變,其他的13個(gè)都是非同義突變,包括6個(gè)重復(fù)區(qū)突變,而且C端的變異(4個(gè)突變)高于N端(2個(gè)突變)。4、氨基酸序列分析結(jié)果表明,與普通小麥的Ax1和Ax2*亞基相比,Glu-A1x基因除了存在單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)外,主要差異是存在于重復(fù)區(qū)的3個(gè)缺失/插入,其中片段1有1個(gè)(第137-142位氨基酸殘基,Pro-Gly-Gln-Gly-Gln-Gln),片段2有2個(gè)(第6-10位氨基酸殘基,Gln-Gly-Gln-Gln-Gly;第46-50位氨基酸殘基,Ser-Gly-Gln-Gly-Gln),可能影響小麥面粉的彈性。5、栽培一粒小麥Glu-Alx位點(diǎn)的遺傳多樣性明顯高于普通小麥。栽培一粒小麥Glu-Alx位點(diǎn)新的變異產(chǎn)生于A和Am基因組分化之后,因此這些變異在普通小麥群體中并不存在,可以作為今后小麥品質(zhì)改良的新的資源加以利用。
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S512.1

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本文編號(hào):2748162

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